1 |
1
서열번호 1, 2, 7, 8, 13, 14, 19, 20, 25 또는 26으로 기재된 염기서열 각각으로 이루어진 외부 프라이머 세트;서열번호 3, 4, 9, 10, 15, 16, 21, 22, 27 또는 28로 기재된 염기서열 각각으로 이루어진 내부 프라이머 세트; 및서열번호 5, 6, 11, 12, 17, 18, 23, 24, 29 또는 30으로 기재된 염기서열 각각으로 이루어진 루프 프라이머 세트;를 포함하고,인플루엔자 바이러스(Influenza Virus) B형, A H1형, A H3형, A H5형 및 A H7형 검출을 위한 역전사고리매개 등온증폭(Reverse Transcription Loop-mediated isothermal Amplificaiton, RT-LAMP)용 조성물로서,서열번호 1 내지 6으로 기재된 염기서열 각각으로 이루어진 프라이머 세트는 인플루엔자 바이러스 B형을 검출하고,서열번호 7 내지 12로 기재된 염기서열 각각으로 이루어진 프라이머 세트는 인플루엔자 바이러스 A H1형을 검출하며,서열번호 13 내지 18로 기재된 염기서열 각각으로 이루어진 프라이머 세트는 인플루엔자 바이러스 A H3형을 검출하고,서열번호 19 내지 24로 기재된 염기서열 각각으로 이루어진 프라이머 세트는 인플루엔자 바이러스 A H5형을 검출하며,서열번호 25 내지 30으로 기재된 염기서열 각각으로 이루어진 프라이머 세트는 인플루엔자 바이러스 A H7형을 검출하고,상기 조성물은 인플루엔자 바이러스 B형, A H1형 또는 A H3형의 검출을 위해 3 내지 7 μM의 외부 프라이머 세트, 35 내지 45 μM의 내부 프라이머 세트 및 8 내지 12 μM의 루프 프라이머 세트를 포함하며,인플루엔자 바이러스 A H5형 또는 A H7형의 검출을 위해 3 내지 7 μM의 외부 프라이머 세트, 75 내지 85 μM의 내부 프라이머 세트 및 3 내지 7 μM의 루프 프라이머 세트를 포함하는 조성물
|
2 |
2
제 1 항의 조성물을 포함하는 인플루엔자 바이러스 B형, A H1형, A H3형, A H5형 및 A H7형 검출용 키트
|
3 |
3
제 2 항에 있어서,상기 검출용 키트는 휴대용 열원을 더 포함하는 것인,인플루엔자 바이러스 B형, A H1형, A H3형, A H5형 및 A H7형 검출용 키트
|
4 |
4
분리된 시료의 RNA를 추출하는 단계;상기 RNA를 주형으로 역전사반응을 수행하여 전체 cDNA(total cDNA)를 합성하는 단계;상기 cDNA를 주형으로 제 1 항에 따른 조성물을 이용하여 역전사고리매개 등온증폭반응을 수행하여 표적 서열을 증폭시키는 단계;상기 증폭된 산물을 검출하는 단계;를 포함하는,인플루엔자 바이러스 B형, A H1형, A H3형, A H5형 및 A H7형 검출 방법
|
5 |
5
제 4 항에 있어서,상기 등온증폭반응은 60℃ 내지 65℃에서 40분내지 60분 동안 수행하는 것을 특징으로 하는,인플루엔자 바이러스 B형, A H1형, A H3형, A H5형 및 A H7형 검출 방법
|
6 |
6
제 4 항에 있어서,상기 증폭 산물을 검출하는 단계는 전기영동(electrophoresis)을 이용하여 증폭된 DNA를 확인하는 것을 특징으로 하는, 인플루엔자 바이러스 B형, A H1형, A H3형, A H5형 및 A H7형 검출 방법
|
7 |
7
제 4 항에 있어서,상기 증폭 산물을 검출하는 단계는 지시약의 색상 변화에 의해 증폭 산물을 검출하는 것을 특징으로 하는,인플루엔자 바이러스 B형, A H1형, A H3형, A H5형 및 A H7형 검출 방법
|
8 |
8
제 7 항에 있어서,상기 지시약은 페놀 레드인 것을 특징으로 하는,인플루엔자 바이러스 B형, A H1형, A H3형, A H5형 및 A H7형 검출 방법
|