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자일로스 이용능이 개선된 야로위아 리폴리티카 균주 및 이의 제조방법

  • 기술번호 : KST2020013382
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 명세서는 자일로스 이용능이 개선된 야로위아 리폴리티카 재조합 신규 균주, 이의 제조방법 및 이를 이용한 바이오 오일 생산방법에 관하여 기술한다. 본 발명은 자일로스를 탄소원으로 이용하지 못하는 야생형 야로위아 리폴리티카 균주를 형질전환함으로서 고수율의 바이오 오일 생산이 가능하므로, 바이오 연료 또는 화장품, 건강기능식품, 유지화학제품 등의 소재 생산 공정의 경제성 및 지속가능성을 향상시킬 수 있다.
Int. CL C12N 15/81 (2006.01.01) C12N 9/10 (2006.01.01)
CPC C12N 15/81(2013.01) C12N 15/81(2013.01) C12N 15/81(2013.01) C12N 15/81(2013.01) C12N 15/81(2013.01) C12N 15/81(2013.01)
출원번호/일자 1020190106889 (2019.08.29)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-2160215-0000 (2020.09.21)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20200928) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2019.08.29)
심사청구항수 25

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이선미 서울특별시 성북구
2 김지원 서울특별시 성북구
3 고자경 서울특별시 성북구
4 공경택 서울특별시 성북구
5 엄영순 서울특별시 성북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김영철 대한민국 서울특별시 종로구 종로*길 **, **층 케이씨엘특허법률사무소 (수송동, 석탄회관빌딩)
2 김 순 영 대한민국 서울특별시 종로구 종로*길 **, **층 케이씨엘특허법률사무소 (수송동, 석탄회관빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2019.08.29 수리 (Accepted) 1-1-2019-0892475-54
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2019.11.14 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2019.12.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2020-0046754-61
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2020.04.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0270058-77
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2020.06.05 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-0580347-58
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견서·답변서·소명서
 2020.06.05 수리 (Accepted) 1-1-2020-0580346-13
7 등록결정서
Decision to grant		 2020.09.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0637148-30
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번호 청구항
1 1
자일로스를 유일 탄소원으로 하는 최소배지에서 계대배양된 적응진화(adaptive evolution) 균주이고,자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자 및 자일룰로스 인산화효소 (Xylulokinase)를 코딩하는 유전자를 포함하며, 상기 자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자는 서열번호 1의 염기서열로 표현되는 xylA3*이고 상기 자일룰로스 인산화효소를 코딩하는 유전자는 서열번호 2의 염기서열로 표현되는 ylXK(xylulokinase)이며,상기 적응진화 균주는 YALI0_D07634g 유전자에서 495_500delCAACTT 돌연변이를 포함하는, 야로위아 리폴리티카(Yarrowia lipolytica)의 형질전환 효모균주
2 2
제1항에 있어서, 상기 적응진화 균주는 YALI0_A00374g, YALI0_A00935g, YALI0_A02497g, YALI0_A02937g, YALI0_A15642g, YALI0_A15796g, YALI0_A17578g, YALI0_A17776g, YALI0_A17853g, YALI0_A18744g, YALI0_A19646g, YALI0_B00748g, YALI0_B05676g, YALI0_B18194g, YALI0_C07722g, YALI0_C08327g, YALI0_C08349g, YALI0_C08473g, YALI0_C09031g, YALI0_C09614g, YALI0_C13002g, YALI0_C13728g, YALI0_C13970g, YALI0_C15532g, YALI0_C15741g, YALI0_C16148g, YALI0_C16247g, YALI0_D00627g, YALI0_D09647g, YALI0_D14542g, YALI0_D15752g, YALI0_D17820g, YALI0_D18678g, YALI0_D19360g, YALI0_D20064g, YALI0_D20526g, YALI0_D20790g, YALI0_D24849g, YALI0_D25058g, YALI0_D26972g, YALI0_E07832g, YALI0_E08008g, YALI0_E13948g, YALI0_E18766g, YALI0_E19767g, YALI0_E20053g, YALI0_E20449g, YALI0_E23969g, YALI0_E29623g, YALI0_E31999g, YALI0_E33891g, YALI0_E34089g, YALI0_E35046g, YALI0_F12573g, YALI0_F12771g, YALI0_F12793g, YALI0_F18568g, 및 YALI0_F19030g 유전자로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 유전자에서 하기의 돌연변이를 더 포함하는, 형질전환 효모균주:YALI0_A00374g 유전자에서 597_598insGGCTCCGCTGCCGCCTCC 돌연변이;YALI0_A00935g 유전자에서 202_203insGCTC 돌연변이;YALI0_A02497g 유전자에서 427_429dupAAC 돌연변이;YALI0_A02937g 유전자에서 20_21insGGAGACCGTGGGGGAGACCGTGGA 돌연변이;YALI0_A15642g 유전자에서 147G003e#A 돌연변이;YALI0_A15796g 유전자에서 576T003e#G 돌연변이 및 567_568insACA 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_A17578g 유전자에서 434_435insGGACCCGCC 돌연변이;YALI0_A17776g 유전자에서 1810_1811insACAACAACACCC 돌연변이 및 959_960insACAGCAGAT 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_A17853g 유전자에서 1940_1942delAGG 돌연변이 및 1990_1991insAGGAGGAGGCTAAGAAGA 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_A18744g 유전자에서 2512_2513insCTGGAGGGGGTGGAAGCG 돌연변이;YALI0_A19646g 유전자에서 1467delA 돌연변이;YALI0_B00748g 유전자에서 522_523insAACTCC 돌연변이;YALI0_B05676g 유전자에서 1369_1370insCAGCAGCGT 돌연변이;YALI0_B18194g 유전자에서 1695_1697delCGG 돌연변이;YALI0_C07722g 유전자에서 1553C003e#T 돌연변이 및 1552A003e#G 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_C08327g 유전자에서 1221_1250delTCCTCACGTGCAGCCTCCTCATGCGCAGCC 돌연변이;YALI0_C08349g 유전자에서 2455_2456insCTCCCATCTCCTCCT 돌연변이 및 2471_2472insTCCCATCTCCTCCGA 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_C08473g 유전자에서 1326_1327insGCACCTGCGACTTCTTCG 돌연변이;YALI0_C09031g 유전자에서 1789_1790insCTCCCGAGTCCTCTGCTGAGCCTACCAGCGAAGAGACTTCTTCCG 돌연변이;YALI0_C09614g 유전자에서 1617_1622delACAACA 돌연변이;YALI0_C13002g 유전자에서 815_816insTCTAA 돌연변이;YALI0_C13728g 유전자에서 99_100insAAAAAGTGGCCGAAAGAGTGGCCA 돌연변이 및 129_130insTGGCCGAAAAAGTGGCCAAAA 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_C13970g 유전자에서 1587_1588insGCT 돌연변이;YALI0_C15532g 유전자에서 1611_1616delCAGCTT 돌연변이;YALI0_C15741g 유전자에서 198_209delCTATTCAAACGA 돌연변이;YALI0_C16148g 유전자에서 957_968delCAGCAGCAGCAG 돌연변이;YALI0_C16247g 유전자에서 1292A003e#G 돌연변이, 1412T003e#A 돌연변이, 1441G003e#A 돌연변이, 1513A003e#G 돌연변이, 1534A003e#C 돌연변이, 1544T003e#A 돌연변이, 및1847C003e#T 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_D00627g 유전자에서 2603A003e#C 돌연변이;YALI0_D09647g 유전자에서 491_492insAAAGCAGCAGCAGCA 돌연변이;YALI0_D14542g 유전자에서 80_81insC 돌연변이;YALI0_D15752g 유전자에서 1038_1039insCAG 돌연변이 및 1038_1039insCGGCAG 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_D17820g 유전자에서 615_616insCCCCACCACCCGCAA 돌연변이 및 641_642insGCAAACCTACCACCA 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_D18678g 유전자에서 1300_1323delACCCAGAACCAGACCCAGAACCAG 돌연변이;YALI0_D19360g 유전자에서 2132_2155delGGAGTGAGAGTGGGAGTGAGAGTG 돌연변이;YALI0_D20064g 유전자에서 69_70delCT 돌연변이;YALI0_D20526g 유전자에서 355_356insCCACCGGCG 돌연변이;YALI0_D20790g 유전자에서 39_40insCGTGAAAGGAGCCGAACC 돌연변이;YALI0_D24849g 유전자에서 103G003e#A 돌연변이;YALI0_D25058g 유전자에서 592_594dupAAG 돌연변이;YALI0_D26972g 유전자에서 36_41delACAGCA 돌연변이;YALI0_E07832g 유전자에서 499_500insCCAAGCCCCCCGCTTCCAAGCCCACCGCTT 돌연변이;YALI0_E08008g 유전자에서 794_795insCTCTTCCTCTTCCTCTTCCTCTTCCTCTTC 돌연변이;YALI0_E13948g 유전자에서 825_830delCAGCAA 돌연변이;YALI0_E18766g 유전자에서 1100_1101insTTCTGCCGCTTA 돌연변이;YALI0_E19767g 유전자에서 2699A003e#G 돌연변이;YALI0_E20053g 유전자에서 533_534insGGCCGAGGAGGC 돌연변이;YALI0_E20449g 유전자에서 902_903insGGCCAA 돌연변이;YALI0_E23969g 유전자에서 480_481insTCCGCTACCACCGAG 돌연변이 및 497A003e#C 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_E29623g 유전자에서 10A003e#G 돌연변이;YALI0_E31999g 유전자에서 269_270insTGTGTATATATGCAGAAAAAAAAAAA 돌연변이;YALI0_E33891g 유전자에서 237C003e#A 돌연변이, 및 239G003e#C 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_E34089g 유전자에서 72_73insCG 돌연변이;YALI0_E35046g 유전자에서 1926T003e#C 돌연변이;YALI0_F12573g 유전자에서 75_76insTCCCCG 돌연변이;YALI0_F12771g 유전자에서 1019_1021delAGT 돌연변이;YALI0_F12793g 유전자에서 1855_1860delTCTTCT 돌연변이 및 4102_4103insTAGCCG 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이;YALI0_F18568g 유전자에서 718_723delCAGCAG 돌연변이;YALI0_F19030g 유전자에서 2099C003e#A 돌연변이, 2098A003e#G 돌연변이, 2065T003e#A 돌연변이, 및 1344_1345insCCTACTCCCTCCGAGGTT 돌연변이 중 하나 이상의 돌연변이
3 3
삭제
4 4
삭제
5 5
제1항에 있어서, 상기 균주는 자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자를 포함하는 제1벡터, 및 자일룰로스 인산화효소를 코딩하는 유전자를 포함하는 제2벡터; 또는 자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자 및 자일룰로스 인산화효소를 코딩하는 유전자를 포함하는 제3벡터를 도입한 것인, 형질전환 효모균주
6 6
제5항에 있어서, 상기 제1벡터, 제2벡터 및 제3벡터에 도입된 유전자가 유전체 DNA(genomic DNA)에 삽입되거나 또는 플라스미드 형태로 발현된, 형질전환 효모균주
7 7
제5항에 있어서, 상기 제1벡터는 UAS1B 증폭자(enhancer), TEF(Translational elongation factor) 프로모터, 및 자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자를 포함하는, 형질전환 효모균주
8 8
제5항에 있어서, 상기 제2벡터는 UAS1B 증폭자(enhancer), TEF(Translational elongation factor) 프로모터, 및 자일룰로스 인산화효소를 코딩하는 유전자를 포함하는, 형질전환 효모균주
9 9
제5항에 있어서, 상기 제3벡터는 UAS1B 증폭자(enhancer), TEF(Translational elongation factor) 프로모터, 자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자 및 자일룰로스 인산화효소를 코딩하는 유전자를 포함하는, 형질전환 효모균주
10 10
제7항에 있어서, 상기 제1벡터는 서열번호 3의 염기서열로 이루어지는, 형질전환 효모균주
11 11
제8항에 있어서, 상기 제2벡터는 서열번호 4의 염기서열로 이루어지는, 형질전환 효모균주
12 12
제9항에 있어서, 상기 제3벡터는 서열번호 5의 염기서열로 이루어지는, 형질전환 효모균주
13 13
제1항에 있어서, 상기 균주는 다이아실글리세롤 아실 전이효소 (Diacylglycerol acyltransferase)가 과발현된 균주인, 형질전환 효모균주
14 14
제13항에 있어서, 상기 균주는 퍼옥시좀형성인자 10(peroxisomal biogenesis factor 10)을 결실시키고, 다이아실글리세롤 아실 전이효소(Diacylglycerol acyltransferase)를 과발현시킨 것인, 형질전환 효모균주
15 15
제1항에 있어서, 상기 형질전환하는 야로위아 리폴리티카의 모균주는 야생형 야로위아 리폴리티카인, 형질전환 효모균주
16 16
제15항에 있어서, 상기 야생형 야로위아 리폴리티카 균주는 수탁번호 ATCC MYA-2613인, 형질전환 효모균주
17 17
제1항에 있어서, 상기 적응진화 균주는 수탁번호 KCTC 13911BP인, 형질전환 효모균주
18 18
제1항, 제2항 및 제5항 내지 제17항 중 어느 한 항에 따른 형질전환 효모균주의 배양물
19 19
제1항, 제2항 및 제5항 내지 제17항 중 어느 한 항에 따른 형질전환 효모균주의 제조방법으로, 야생형 야로위아 리폴리티카(Yarrowia lipolytica)를 모균주로 하여, 자일로스를 유일 탄소원으로 하는 최소배지에서 계대배양하여 적응진화(adaptive evolution)시키는 단계; 및상기 적응진화된 균주에 자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자 및 자일룰로스 인산화효소를 코딩하는 유전자를 삽입하는 단계를 포함하는, 제조방법
20 20
제19항에 있어서, 상기 적응진화시키는 단계는,야생형 야로위아 리폴리티카(Yarrowia lipolytica)에 자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자 및 자일룰로스 인산화효소를 코딩하는 유전자를 삽입하는 단계; 상기 삽입된 균주를 자일로스를 유일 탄소원으로 하는 최소배지에서 계대배양하는 단계; 및상기 계대배양된 균주에서 자일로스 이성화효소를 코딩하는 유전자 및 자일룰로스 인산화효소를 코딩하는 유전자를 제거하는 단계;를 포함하는, 제조방법
21 21
제19항에 있어서, 상기 유전자의 삽입은 CRISPR/Cas9를 이용하거나 플라스미드를 도입함으로서 이루어지는 것인, 제조방법
22 22
제19항에 있어서, 상기 방법은 다이아실글리세롤 아실 전이효소 (Diacylglycerol acyltransferase)를 과발현시키는 단계를 더 포함하는, 제조방법
23 23
제22항에 있어서, 상기 단계는 퍼옥시좀형성인자 10(peroxisomal biogenesis factor 10)을 결실시키고, 다이아실글리세롤 아실 전이효소(Diacylglycerol acyltransferase)를 과발현시키는 것을 포함하는, 제조방법
24 24
제1항, 제2항 및 제5항 내지 제17항 중 어느 한 항에 따른 형질전환 효모균주를 자일로스를 유일 탄소원으로 포함하는 배지, 또는 글루코스 및 자일로스를 탄소원으로 포함하는 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 바이오 오일 생산방법
25 25
제24항에 있어서, 상기 바이오 오일을 지질을 포함하는, 바이오 오일 생산방법
26 26
제24항에 있어서, 상기 배지는 목질계 바이오매스를 포함하고, 상기 균주를 배지에서 배양하는 단계 이전에 상기 목질계 바이오매스를 분해하여 글루코스 및 자일로스 중 하나 이상을 생산하는 단계를 더 포함하는, 바이오 오일 생산방법
27 27
제24항에 있어서, 상기 배양 단계에서 얻은 지질을 트랜스에스테르화하여 바이오디젤을 수득하는 단계를 더 포함하는, 바이오 오일 생산방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.