1 |
1
세포 내에서 자기조립하여 나노입자를 형성할 수 있는 단백질의 표면에 메탄산화효소의 제1활성 부위와 제2활성 부위가 융합·발현된, 메탄산화효소 (MMO) 활성을 가지는 효소 나노입자
|
2 |
2
제1항에 있어서, 상기 단백질은 페리틴(ferritin), 페리틴 유사 단백질 (ferritin-like protein), 마그네토좀(magnetosome) 구성 단백질, 대장균 DNA 결합 단백질(Escherichia coli DNA binding protein), 인간 α-토코페롤 전달 단백질(Human α-Tocopherol transfer protein), 인간 PERK 샤페론(Human PERK chaperone) 또는 B형 간염 바이러스 캡시드 단백질(Hepatitis B virus capsid), 프로테아좀(proteasome), 담배 모자이크 바이러스 코트 단백질(Tobacco mosaic virus coat protein)인 것을 특징으로 하는 효소 나노입자
|
3 |
3
제1항에 있어서, 상기 단백질은 페리틴 중쇄 단백질인 것을 특징으로 하는 효소 나노입자
|
4 |
4
제1항에 있어서, 상기 메탄산화효소의 제1활성 부위 및 제2활성 부위는 pmoB1 또는 이의 변이체 및 pmoB2 또는 이의 변이체로 구성된 군에서 선택되고, 제1활성 부위 및 제2활성 부위는 서로 상이한 것을 특징으로 하는 효소 나노입자
|
5 |
5
제1항에 있어서, 상기 메탄산화효소의 제1활성 부위는 서열번호 2의 서열을 포함하고, 제2활성 부위는 서열번호 3의 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 효소 나노입자
|
6 |
6
제4항에 있어서, 상기 변이체는 H33N, E135Q, H137A, H139A, H48N, H72N로 구성된 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 효소 나노입자
|
7 |
7
세포 내에서 자기조립하여 나노입자를 형성할 수 있는 단백질의 표면에 메탄산화효소의 제1활성 부위와 제2활성 부위가 융합·발현된, MMO 활성을 가지는 나노입자를 생성하는 단계; 및 상기 생성된 나노입자를 회수하는 단계를 포함하는 효소 나노입자의 제조방법
|
8 |
8
i) 세포 내에서 자기조립하여 나노입자를 형성할 수 있는 단백질을 코딩하는 핵산; ii) 메탄산화효소의 제1활성 부위를 코딩하는 핵산; 및iii) 메탄산화효소의 제2활성 부위를 코딩하는 핵산이 도입되어 있고, 상기 나노입자 단백질의 표면에 상기 제1활성 부위와 상기 제2활성 부위를 융합·발현시켜, 메탄산화효소 (MMO) 활성을 나타내는 효소 나노입자 생성능을 가지는 재조합 미생물
|
9 |
9
제8항에 있어서, 상기 단백질은 페리틴(ferritin), 페리틴 유사 단백질 (ferritin-like protein), 마그네토좀(magnetosome) 구성 단백질, 대장균 DNA 결합 단백질(Escherichia coli DNA binding protein), 인간 α-토코페롤 전달 단백질(Human α-Tocopherol transfer protein), 인간 PERK 샤페론(Human PERK chaperone) 또는 B형 간염 바이러스 캡시드 단백질(Hepatitis B virus capsid), 프로테아좀(proteasome), 담배 모자이크 바이러스 코트 단백질(Tobacco mosaic virus coat protein)인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
10 |
10
제8항에 있어서, 상기 단백질은 페리틴 중쇄 단백질인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
11 |
11
제8항에 있어서, 상기 메탄산화효소의 제1활성 부위 및 제2활성 부위는 pmoB1 또는 이의 변이체 및 pmoB2 또는 이의 변이체로 구성된 군에서 선택되고, 제1활성 부위 및 제2활성 부위는 서로 상이한 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
12 |
12
제8항에 있어서, 상기 메탄산화효소의 제1활성 부위는 서열번호 2의 서열을 포함하고, 제2활성 부위는 서열번호 3의 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
13 |
13
제11항에 있어서, 상기 변이체는 H33N, E135Q, H137A, H139A, H48N, H72N로 구성된 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
14 |
14
제8항에 있어서, i) 세포 내에서 자기조립하여 나노입자를 형성할 수 있는 단백질을 코딩하는 핵산; ii) 메탄산화효소의 제1활성 부위를 코딩하는 핵산; 및 iii) 메탄산화효소의 제2활성 부위를 코딩하는 핵산이 작동 가능하게 연결된 벡터가 도입된 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
15 |
15
제8항에 있어서, (a) i) 세포 내에서 자기조립하여 나노입자를 형성할 수 있는 단백질을 코딩하는 핵산 및 ii) 메탄산화효소의 제1활성 부위를 코딩하는 핵산이 작동 가능하게 연결된 제1벡터; 및 (b) i) 세포 내에서 자기조립하여 나노입자를 형성할 수 있는 단백질을 코딩하는 핵산 및 iii) 메탄산화효소의 제2활성 부위를 코딩하는 핵산이 작동 가능하게 연결된 제2벡터가 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
16 |
16
제14항 또는 제15항에 있어서, i) 세포 내에서 자기조립하여 나노입자를 형성할 수 있는 단백질을 코딩하는 핵산 및 ii) 메탄산화효소의 제1활성 부위를 코딩하는 핵산 사이; 또는 ii) 메탄산화효소의 제1활성 부위를 코딩하는 핵산 및 iii) 메탄산화효소의 제2활성 부위를 코딩하는 핵산 사이에, 펩타이드 링커를 코딩하는 핵산을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
17 |
17
제14항에 있어서, 상기 단백질을 코딩하는 핵산의 상류에 태그를 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
18 |
18
제15항에 있어서, 상기 제1 벡터 또는 제2벡터 중 단백질을 코딩하는 핵산의 상류에 태그를 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
|
19 |
19
제1항의 효소 나노입자가 담체에 담지된 고정화 효소 나노입자
|
20 |
20
제19항에 있어서, 상기 담체는 키토산, 젤라틴, 콜라겐, 폴리-L-라이신, 폴리-L-히스티딘, 폴리-L-아르기닌, 히알루론산, 폴리감마글루탐산, 알지네이트, 카르복시메틸셀룰로오즈, 글리코겐, 아밀로오즈, 덱스트란, 폴리아크릴산, 폴리아크릴아마이드, 폴리메타아크릴산, 폴리 하이드록시에틸 메타크릴레이드 플루란, 베타글루칸, 스타치, 히드록시에틸셀룰로오즈, 카르복시메틸셀룰로오즈, 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐피론리돈공중합체, 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐알콜, 폴리비닐알킬에테르, 폴리디메틸아미노에틸메타아크릴레이트, 폴리N,N-에틸아미노에틸 메타크릴레이트, 폴리락틱산, 글리글리콜산, 폴리락틱글리콜산 또는 폴리카프로락톤인 것을 특징으로 하는 효소 나노입자
|
21 |
21
제1항의 효소 나노입자, 제8항의 재조합 미생물, 또는 제19항의 고정화 효소 나노입자를 이용하여 메탄을 메탄올로 전환하는 방법
|