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I) 리프로그래밍 인자(Reprogramming Factor) 또는 II) 리프로그래밍 인자(Reprogramming Factor) 및 CAR(Chimeric Antigen Receptor) 유전자가 도입된 분리된 세포를 a) 성장인자, 사이토카인 및 GSK3β(Glycogen Synthase Kinase 3 beta) 저해제(Inhibitor)를 포함하는 제 1 배지; 및 b) (1) 성장인자, 사이토카인 및 AHR(Aryl Hydrocarbon Receptor) 작용제(Agonist), 또는 (2) 성장인자, 사이토카인 및 항-CD3 항체를 포함하는 제 2 배지;에서 순차적으로 배양하여 NKT 세포로 직접 리프로그래밍 시키는 단계를 포함하는, iNKT(induced Natural Killer T) 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 성장인자는 SCF(Stem Cell Factor), FLT3(FMS-like Tyrosine Kinase) 및 이들의 조합으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 사이토카인은 IL(Interleukin)-3, IL-6, IL-2, IL-7, IL-15 및 이들의 조합으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 a)의 제 1 배지는 SCF, FLT3, IL-3, IL-6 및 CHIR99021를 포함하는 배지인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 b)의 제 2 배지는 (1) SCF, FLT3, IL-2, IL-7, IL-15, OKT3 및 UCHT1를 포함하는 배지, 또는 (2) SCF, FLT3, IL-2, IL-7, IL-15, FICZ 및 비오카닌 A를 포함하는 배지 중 선택되는 어느 하나인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 a)의 제 1 배지 또는 b)의 제 2 배지는 FBS(Fetal Bovine Serum), 항생제 및 이들의 조합으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 추가로 포함하는 것인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 리프로그래밍 인자가 도입된 분리된 세포는 상기 a)의 제 1 배지에서 4 내지 8 일 동안 배양한 후, 상기 b)의 제 2 배지에서 12 일 이상 배양하는 것인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 리프로그래밍 인자는 Lin28, Asc11, Pitx3, Nurr1, Lmx1a, Nanog, Oct4, Oct3, Sox2, Klf4, Myc 및 이들의 조합으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, iNKT 세포 제조방법
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제8항에 있어서, 상기 리프로그래밍 인자는 Oct4, Sox2, Klf4 및 Myc인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 리프로그래밍 인자가 도입되는 분리된 세포는 NKT 세포를 제외한 체세포인 것인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 CAR 유전자는 상기 리프로그래밍 인자 도입시, 상기 a)의 제 1 배지에서 배양시 또는 상기 b)의 제 2 배지에서 배양시 중 선택되는 어느 하나의 시점에서 상기 분리된 세포에 도입되는 것인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 CAR 유전자는 i) CD8 리더(Leader), CD19 scFv, CD8 힌지(Hinge), CD8 막 관통 도메인 및 Fc-γ 수용체를 포함하는 CAR 유전자;ii) CD8 리더, CD19 scFv, CD8 힌지, CD8 막 관통 도메인, CD28 세포내 도메인, CD3ζ 및 IRES(Internal Ribosome Entry Site)를 포함하는 CAR 유전자;iii) CD8 리더, MSLN(Mesothelin) scFv, CD8 힌지, CD8 막 관통 도메인, CD28 세포내 도메인, CD3ζ 및 IRES를 포함하는 CAR 유전자; 및iV) CD8 리더, HER2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2) scFv, CD8 힌지, CD8 막 관통 도메인, CD28 세포내 도메인, CD3ζ 및 IRES를 포함하는 CAR 유전자;로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인, iNKT 세포 제조방법
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제12항에 있어서, 상기 CAR 유전자는 GFP(Green Fluorescent Protein)를 추가로 포함하는 것인, iNKT 세포 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 제조된 iNKT 세포는 CD56+, CD3+ 및 이들의 조합으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상을 발현하는 것인, iNKT 세포 제조방법
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제1항 내지 제14항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 iNKT 세포
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제1항 내지 제14항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 iNKT 세포를 유효성분으로 포함하는, 암 예방 또는 치료용 세포치료제 조성물
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제1항 내지 제14항 중 어느 한 항의 방법에 따라 제조된 iNKT 세포를 유효성분으로 포함하는, 암 예방 또는 치료용 약학 조성물
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제17항에 있어서, 상기 암은 췌장암, 폐암, 난소암, 유방암, 대장암, 골수암, 간암, 뇌암, 전립선암, 위암, 결장암, 신경교종, 흑색종, 림프종, 직장암, 혈액암 및 이들의 조합으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인, 암 치료용 약학 조성물
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a) 성장인자, 사이토카인 및 GSK3β 저해제를 포함하는 제 1 배지를 함유하는 제 1 용기; 및 b) (1) 성장인자, 사이토카인 및 AHR 작용제, 또는 (2) 성장인자, 사이토카인 및 항-CD3 항체를 포함하는 제 2 배지를 함유하는 제 2 용기;를 포함하는 iNKT 세포 제조용 직접 리프로그래밍 배지 키트
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