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미토콘드리아 DNA를 내부 기준 시료로 사용하는 마이코플라즈마 검출 방법

  • 기술번호 : KST2020014756
  • 담당센터 : 부산기술혁신센터
  • 전화번호 : 051-606-6561
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 마이코플라즈마가 감염된 숙주 세포를 파쇄하여 추출한 DNA, 및 숙주 세포의 세포질 내 미토콘드리아 유래 DNA를 동시에 증폭하는 것을 통해, 세포 내 마이코플라즈마의 감염 여부를 직접적으로 확인할 수 있는, 마이코플라즈마 검출 방법을 제공한다. 본 발명의 방법에 따르면, 숙주 세포 내의 DNA를 직접 이용하여, 숙주 세포의 핵 주변에 결합되어 있는 마이코플라즈마의 DNA를 직접적으로 증폭 대상으로서 사용할 수 있어 검출 민감도가 증가할 수 있다. 또한, 숙주 세포 내의 미토콘드리아 DNA를 내부 기준 시료(internal control sample)의 증폭 대상으로 하기 때문에, 시료가 적정량 채취되었는지 간단하게 확인할 수 있을 뿐 아니라, 내부 기준 시료와 마이코플라즈마 DNA간의 밴드 양을 비교하여 마이코플라즈마의 감염 수준을 정량적으로 확인할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/6851 (2018.01.01) C12Q 1/6888 (2018.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020207028122 (2019.05.17)
출원인 재단법인 아산사회복지재단, 울산대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2020-0123246 (2020.10.28) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자 PCT/KR2019/005898 (2019.05.17)
국제공개번호/일자 WO2019221537 (2019.11.21)
우선권정보 대한민국  |   1020180057283   |   2018.05.18
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국제출원
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.09.28)
심사청구항수 12

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 재단법인 아산사회복지재단 대한민국 서울특별시 송파구
2 울산대학교 산학협력단 대한민국 울산광역시 남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 강은주 경기도 성남시 수정구
2 이연미 서울특별시 송파구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인이룸리온 대한민국 서울특별시 서초구 사평대로 ***, *층 (반포동)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허법 제203조에 따른 서면
[Patent Application] Document according to the Article 203 of Patent Act
2020.09.28 수리 (Accepted) 1-1-2020-1035602-92
2 수리안내서
Notice of Acceptance
2020.10.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2020-0157310-52
3 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2020.10.27 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2020-1138370-21
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번호 청구항
1 1
i) 마이코플라즈마에 감염된 것으로 의심되는 대상으로부터 분리된 숙주세포로부터 DNA를 추출하는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 추출한 DNA를 주형으로 하여 중합효소연쇄반응(PCR)을 수행하는 단계; 및iii) 상기 단계 ii)에서 수행한 PCR 반응 산물을 전기영동하여 DNA 밴드를 확인하는 단계;를 포함하는, 마이코플라즈마 검출 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 단계 i)의 숙주세포는 인간 유래의 세포인 것을 특징으로 하는, 마이코플라즈마 검출 방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 단계 ii)의 PCR 반응은 마이코플라즈마 DNA 증폭용 프라이머세트; 및 숙주세포의 미토콘드리아 DNA 증폭용 프라이머세트;를 사용하여 표적 서열을 증폭하는 것을 특징으로 하는, 마이코플라즈마 검출 방법
4 4
제3항에 있어서, 상기 마이코플라즈마 DNA 증폭용 프라이머 세트는,서열번호 1의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 2의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 3의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 4의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 5의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 6의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 7의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;서열번호 8의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머; 및서열번호 9의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;를 포함하는 것을 특징으로 하는, 마이코플라즈마 검출 방법
5 5
제3항에 있어서, 상기 숙주세포의 미토콘드리아 DNA 증폭용 프라이머 세트는, 서열번호 10의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머; 및 서열번호 11의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;를 포함하는 것을 특징으로 하는, 마이코플라즈마 검출 방법
6 6
i) 마이코플라즈마에 감염된 것으로 의심되는 대상으로부터 분리한 숙주세포로부터 DNA를 추출하는 단계;ii) 상기 단계 i)에서 추출한 DNA를 주형으로 하여 중합효소연쇄반응(PCR)을 수행하는 단계; 및iii) 상기 단계 ii)의 PCR 반응에서 마이코플라즈마 DNA의 증폭이 확인되는 경우, 마이코플라즈마에 감염된 것으로 판단하는 단계;를 포함하는,마이코플라즈마 감염 진단을 위한 정보를 제공하는 방법
7 7
제6항에 있어서, 상기 단계 ii)의 PCR 반응은,서열번호 1의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 2의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 3의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 4의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 5의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 6의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 7의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;서열번호 8의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;서열번호 9의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;서열번호 10의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머; 및서열번호 11의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;를 이용하여 수행하는 것을 특징으로 하는, 방법
8 8
제6항에 있어서, 상기 단계 iii)의 마이코플라즈마 DNA의 증폭이 확인되는 것은 500 bp 크기의 DNA가 증폭된 것으로 확인되는 것임을 특징으로 하는, 방법
9 9
a) 세포 용해 완충용액(cell lysis buffer);b) 마이코플라즈마 DNA 증폭용 프라이머 세트; 및c) 숙주세포의 미토콘드리아 DNA 증폭용 프라이머 세트;를 포함하는, 마이코플라즈마 검출용 키트
10 10
제9항에 있어서, 상기 b) 마이코플라즈마 DNA 증폭용 프라이머 세트는,서열번호 1의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 2의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 3의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 4의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 5의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 6의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 7의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;서열번호 8의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머; 및서열번호 9의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;를 포함하는 것을 특징으로 하는, 마이코플라즈마 검출용 키트
11 11
제9항에 있어서, 상기 c) 숙주세포의 미토콘드리아 DNA 증폭용 프라이머 세트는, 서열번호 10의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머; 및 서열번호 11의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;를 포함하는 것을 특징으로 하는, 마이코플라즈마 검출용 키트
12 12
서열번호 1의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 2의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 3의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 4의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 5의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 6의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 7의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;서열번호 8의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머; 및서열번호 9의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;를 포함하는 마이코플라즈마 감염 진단용 조성물
13 13
서열번호 1의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 2의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 3의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 4의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 5의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 6의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머;서열번호 7의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;서열번호 8의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머; 및서열번호 9의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머;를 포함하는 프라이머 세트를 마이코플라즈마 검출 또는 마이코플라즈마 감염 진단에 사용하기 위한 용도
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 서울아산병원 동북아RND허브기반구축사업/해외우수연구기관유치사업 아산-미네소타 이식 이노베이션 센터