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페닐피루브산에 대한 기질선호도가 증진된 D형-젖산 탈수소효소

  • 기술번호 : KST2021000198
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명의 효소는 페디오코쿠스 애시딜락티시(Pediococcus acidilactici) 유래 D형-젖산 탈수소효소의 51번 아미노산 타이로신을 여러 잔기로 치환한 변이효소 및 그 유전자에 관한 것으로, D형-3-페닐젖산에 대한 활성이 야생형에 비해 촉매효율(catalytic efficiency, kcat/KM) 기준으로 최고 약 138배 증가하였다. 기존 야생형 D형-젖산 탈수소효소와는 달리 피루브산보다 페닐피루브산에 대해 높은 선호도를 보이며, in vitro 조건에서 야생형은 최대 56%의 전환율을 보인 반면, 본 발명을 통해 개발된 페디오코쿠스 애시딜락티시 유래 D형-젖산 탈수소효소 변이주는 페닐피루브산으로부터 D형-3-페닐젖산을 98% 이상 전환율로 생산할 수 있음을 확인하였다.
Int. CL C12N 9/04 (2006.01.01) C12P 7/56 (2006.01.01)
CPC C12N 9/0006(2013.01) C12P 7/56(2013.01) C12Y 101/01028(2013.01)
출원번호/일자 1020190136773 (2019.10.30)
출원인 서강대학교산학협력단
등록번호/일자 10-2200050-0000 (2021.01.04)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20210108) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2019.12.27)
심사청구항수 9

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서강대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 마포구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이회석 강원도 강릉시 지변길
2 박지수 강원도 강릉시 지변길
3 유영제 서울특별시 성북구
4 연영주 서울특별시 동작구
5 이진원 서울특별시 송파구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 윤대웅 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****(봉천동), ***호(제니스특허법률사무소)
2 공병욱 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****(봉천동), ***호(제니스특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 서강대학교산학협력단 서울특별시 마포구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2019.10.30 수리 (Accepted) 1-1-2019-1113145-11
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2019.12.27 수리 (Accepted) 1-1-2019-1346804-00
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2020.04.08 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2020.05.14 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2020-0123963-36
5 등록결정서
Decision to grant
2020.11.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2020-0778641-56
6 [명세서등 보정]보정서(심사관 직권보정)
2021.01.06 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2021-5000379-34
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번호 청구항
1 1
서열번호 1의 아미노산 서열의 N-말단으로부터 51번째 아미노산이 류신(Leucine), 알라닌(Alanine), 세린(Serine), 메티오닌(Methionine), 페닐알라닌(Phenylalanine), 이소류신(Isoleucine), 발린(Valine), 글리신(Glycine) 및 트립토판(Tryptophan)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나로 치환된, 아미노산 서열을 포함하는 D형-젖산 탈수소효소(D-lactate dehydrogenase)
2 2
제1항에 있어서, 상기 서열번호 1의 아미노산 서열은 페디오코쿠스 애시딜락티시(Pediococcus acidilactici)에서 유래한 것인, D형-젖산 탈수소효소
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제1항에 있어서, 상기 서열번호 1의 아미노산 서열 중 51번째 아미노산이 치환된 D형-젖산 탈수소효소는, 서열번호 1의 아미노산을 포함하는 D형-젖산 탈수소효소에 대비하여 페닐피루브산(Phenylpyruvic acid, PPA) 또는 2-케톤산(2-oxo acid)에 대한 기질선호도가 증진된 것인, D형-젖산 탈수소효소
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서열번호 2의 핵산 서열 중 151 내지 153번째 핵산 서열이 GGC(서열번호 3 내), GCA(서열번호 5 내), GTA(서열번호 7 내), CTA(서열번호 9 내), ATC(서열번호 11 내), ATG(서열번호 13 내), TTC(서열번호 15 내), TCC(서열번호 17 내) 및 TGG(서열번호 19 내)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나로 치환된, 핵산 서열을 포함하는 유전자
5 5
서열번호 2의 핵산 서열 중 151 내지 153번째 핵산 서열이 GGC(서열번호 3 내), GCA(서열번호 5 내), GTA(서열번호 7 내), CTA(서열번호 9 내), ATC(서열번호 11 내), ATG(서열번호 13 내), TTC(서열번호 15 내), TCC(서열번호 17 내) 및 TGG(서열번호 19 내)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나로 치환된, 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터
6 6
서열번호 2의 핵산 서열 중 151 내지 153번째 핵산 서열이 GGC(서열번호 3 내), GCA(서열번호 5 내), GTA(서열번호 7 내), CTA(서열번호 9 내), ATC(서열번호 11 내), ATG(서열번호 13 내), TTC(서열번호 15 내), TCC(서열번호 17 내) 및 TGG(서열번호 19 내)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나로 치환된, 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 미생물
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제6항에 있어서, 상기 미생물은 대장균(Escherichia coli)인 것인, 미생물
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서열번호 2의 핵산 서열 중 151 내지 153번째 핵산 서열이 GGC(서열번호 3 내), GCA(서열번호 5 내), GTA(서열번호 7 내), CTA(서열번호 9 내), ATC(서열번호 11 내), ATG(서열번호 13 내), TTC(서열번호 15 내), TCC(서열번호 17 내) 및 TGG(서열번호 19 내)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나로 치환된, 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 미생물을 배양하는 배양 단계를 포함하는 D형-젖산 탈수소효소(D-lactate dehydrogenase)의 생산방법
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다음의 단계를 포함하는 D형-3-페닐젖산(D-3-phenyllactic acid, D-PLA)의 생산방법:서열번호 2의 핵산 서열 중 151 내지 153번째 핵산 서열이 GGC(서열번호 3 내), GCA(서열번호 5 내), GTA(서열번호 7 내), CTA(서열번호 9 내), ATC(서열번호 11 내), ATG(서열번호 13 내), TTC(서열번호 15 내), TCC(서열번호 17 내) 및 TGG(서열번호 19 내)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나로 치환된, 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터로 형질전환된 미생물을 배양하는 배양 단계; 및상기 미생물이 생산한 효소를 페닐피루브산(Phenylpyruvic acid, PPA)에 접촉시켜 D형-3-페닐젖산으로 전환시키는 전환 단계
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 서강대학교 C1가스리파이너리사업 C1 가스 전환 기술 공통시험 연구