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(1) 목적 단백질의 발현 또는 활성에 유용할 것으로 예측되는 후보 단백질을 각각 무세포 단백질 합성하는 단계;(2) 상기 단계 (1)에서 합성된 각각의 후보 단백질을 포함하는 반응물을, 각각 정용여과(diafiltration)하여 무세포 단백질 합성에 의해 생성된 부산물을 제거한 후, 무세포 단백질 합성에 필요한 반응물을 보충하는 단계;(3) 상기 단계 (2) 이후에, 목적 단백질을 코딩하는 유전자 주형을 첨가하고, 목적 단백질의 무세포 단백질 합성을 수행하는 단계; 및(4) 상기 단계 (3)에서 합성한 목적 단백질의 발현 또는 활성 분석을 통해 목적 단백질의 발현 또는 활성 증진에 적합한 단백질을 선별하는 단계;를 포함하는 단백질의 발현 또는 활성 증진 단백질을 스크리닝하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 목적 단백질의 발현 또는 활성에 유용할 것으로 예측되는 후보 단백질은 전사인자, 번역인자, 아실화티알엔에이합성효소(aminoacyl tRNA synthetase), ATP 재생인자, mRNA안정화 인자 및 폴딩 보조인자 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 단백질의 발현 또는 활성 증진 단백질을 스크리닝하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 폴딩 보조인자는 샤페론(chaperone) 또는 폴다아제(foldase)인 것을 특징으로 하는 단백질의 발현 또는 활성 증진 단백질을 스크리닝하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (1)에서 후보단백질의 무세포 단백질 합성에서 사용되는 유전자 주형은 선형의 DNA 또는 mRNA인 것을 특징으로 하는 단백질의 발현 또는 활성 증진 단백질을 스크리닝하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (1)에서 후보단백질의 무세포 단백질 합성에서 사용되는 유전자 주형은 PCR 기법으로 합성된 터미네이터를 포함하지 않는 선형의 DNA인 것을 특징으로 하는 단백질의 발현 또는 활성 증진 단백질을 스크리닝하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (1)에서 후보단백질의 무세포 단백질 합성에서 사용되는 유전자 주형은 2단계 오버랩 연장 PCR(two-step overlap extension PCR)을 이용하여 제조되거나, 절단-라이게이션(digestion-ligation) 방법으로 제조된 것을 특징으로 하는 단백질의 발현 또는 활성 증진 단백질을 스크리닝하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (3)의 무세포 단백질 합성에서 사용되는 유전자 주형은 플라스미드 형태인 것을 특징으로 하는 단백질의 발현 또는 활성 증진 단백질을 스크리닝하는 방법
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(1) 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 단백질의 발현 또는 활성 증진 단백질을 스크리닝하는 방법을 통해 채택된 단백질을 무세포 단백질 합성하는 단계;(2) 상기 단계 (1)에서 합성된 단백질을 포함하는 반응물을 정용여과(diafiltration)하여 무세포 단백질 합성에 의해 생성된 부산물을 제거한 후, 무세포 단백질 합성에 필요한 반응물을 보충하는 단계; 및(3) 상기 단계 (2) 이후에, 목적 단백질을 코딩하는 유전자 주형을 첨가하고, 목적 단백질의 무세포 단백질 합성을 수행하는 단계;를 포함하는 무세포 단백질의 합성 방법
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