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압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법

  • 기술번호 : KST2021001446
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 정량분석방법에 관한 것으로, 타겟 인식 물질로 항체 대신에, 핵산으로 구성된 압타머를 사용하는 분석방법이다. 본 발명의 분석방법은 검출 신호가 극대화된 증폭을 통한 극미량 분석을 가능하게 하는 분석방법으로, 포획 압타머에 의해 타겟이 결합되고, 타겟의 다른 부위에 결합된 검출 압타머에 접합된 리포터 유전자를 주형으로 하는 시험관 내 발현(ALIVE) 통해 신호를 발생할 수 있는 리포터 단백질을 합성한 후, 생성된 리포터 단백질이 효소인 경우, 기질을 첨가하여 신호를 증폭함으로써 aM 수준의 극미량으로 존재하는 타겟을 검출할 수 있는 정량방법이다.
Int. CL C12Q 1/6816 (2018.01.01) C12Q 1/66 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020200075934 (2020.06.22)
출원인 충남대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2020-0145781 (2020.12.30) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020190074003   |   2019.06.21
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.06.22)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 충남대학교산학협력단 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김동명 대전광역시 서구
2 이경호 대전광역시 유성구
3 백민석 대전광역시 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 최규환 대한민국 대전광역시 서구 한밭대로 ***, **층 그린국제특허법률사무소 (둔산동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2020.06.22 수리 (Accepted) 1-1-2020-0640895-42
2 [출원서 등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2020.11.04 수리 (Accepted) 1-1-2020-1175374-15
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2020.12.09 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
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번호 청구항
1 1
(1) 타겟을 포획할 수 있는 포획 압타머를 지지체에 고정시키는 단계; (2) 상기 단계 (1) 이후에, 타겟을 포함하는 시료를 첨가하여 포획 압타머가 타겟을 포획할 수 있도록 반응시키고, 세척하여 반응하지 않은 잔여물을 제거하는 단계;(3) 상기 단계 (2)에서 포획 압타머에 의해 포획된 타겟에, 리포터 유전자가 접합된 검출 압타머를 결합시키는 단계;(4) 상기 단계 (3) 이후에, 검출 압타머에 접합된 리포터 유전자를 주형으로 하는 시험관 내 발현(ALIVE)을 통해 리포터 단백질을 합성하는 단계; 및(5) 상기 시험관 내 발현(ALIVE)으로 합성된 리포터 단백질을 분석하여 타겟의 함량을 검출하는 단계;를 포함하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 리포터 단백질이 기질의 발색 또는 발광 반응을 촉매 하는 효소인 경우, 상기 단계 (4)와 단계 (5) 사이에, 기질을 첨가하여 반응 생성물을 획득하여 검출하고자 하는 신호를 증폭시키는 단계;를 더 포함하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
3 3
제2항에 있어서, 상기 기질의 발색반응을 촉매하는 효소는 호스래디쉬 퍼옥시다아제(horseradish peroxidase), 알칼리성 인산가수분해효소(alkaline phosphatase), 글루코시다아제(glucosidase), 티로시나아제(tyrosinase) 및 GUS(β-glucuronidase) 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
4 4
제2항에 있어서, 상기 기질의 발광 반응을 촉매하는 효소는 루시퍼라아제인 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 리포터 유전자는 형광 단백질을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
6 6
제5항에 있어서, 상기 형광 단백질은 GFP(Green Fluorescent Protein), YFP(Yellow Fluorescent Protein), RFP(Red Fluorescent Protein) 및 에쿠오린(Aequorin) 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 단계 (2)에서, 시료는 혈액, 혈장, 혈청, 소변 또는 림프액 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
8 8
제1항에 있어서, 상기 단계 (1)에서 포획 압타머는 비오틴을 링커로 하여 지지체에 결합된 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
9 9
제1항에 있어서, 상기 검출 압타머와 리포터 유전자 사이에 스페이서를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
10 10
제1항에 있어서, 상기 검출 압타머에 접합된 리포터 유전자를 주형으로 하는 시험관 내 발현(ALIVE)은 반응온도가 20~40℃이며, 반응시간이 2~6시간인 조건으로 수행하는 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
11 11
제1항에 있어서, 상기 포획압타머 또는 검출 압타머는 단일가닥 또는 이중나선의 DNA이거나, 단일가닥 또는 이중나선의 RNA인 것을 특징으로 하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법
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1 과학기술정보통신부 충남대학교 개인기초연구 범용 현장진단·분석을 위한 분자컨버터 기술의 개발