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금나노입자-SELEX에 기초한 표적특이적 압타머 선별법

  • 기술번호 : KST2021002662
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 표적분자(핵산, 지질, 당, 단백질, 펩타이드 등의 생체분자나 호르몬, 저분자 화학물질, 독성물질, 이온 등을 모두 포함)를 인식하는 DNA/RNA 압타머를 선별하기 위해서는 Systematic Evolution of Ligand Exponential Enrichment (SELEX) 과정을 수반한다. 일반적으로 SELEX를 수행하기 위해서는 표적분자를 기판이나 비드 표면에 고정시키는 과정이 필수적으로 요구된다. 이는 표적물질과 결합되는 압타머와 결합하지 않는 압타머를 효과적으로 분리할 수 있기 때문이다. 그러나 이 경우 표적분자를 화학적으로 변형시키거나 tag을 붙이는 과정과 표면이나 비드에 강하게 고정화해야 하는 과정이 필수적으로 수반되어 실제 원래의 표적물질의 결합능력이 떨어지기도 한다. 또한 SELEX과정의 각 round에서 실제 압타머 라이브로리가 표적물질과 잘 결합하고 있는지에 대해 관찰할 수 있는 positive/negative 모니터링이 불가능하기 때문에 수회에 걸친 round이후 선별된 압타머를 분석함으로써 SELEX과정이 올바르게 진행되고 있는지를 간접적으로 확인하고 있다. 이러한 종래의 문제점들을 획기적으로 해결함과 동시에 보다 손쉽고 간편한 SELEX 기법을 구성하기 위해, 본 발명에서는 금나노입자를 이용한 새로운 SELEX 기법을 제시하고자 한다. 즉 표적분자의 변형없이 원래의 표적을 그대로 사용할 수 있고 압타머 라이브로리와 표적물질의 결합력이 증가되고 있는지를 SELEX 과정에서 손쉽게 관찰할 수 있다. 이러한 방법은 고분자 물질 뿐만 아니라 저분자물질에 폭넓게 활용될 수 있을 뿐만 아니라 항체생산이 어렵거나 항체사용에 제약이 있는 표적물질을 손쉽게 인식하는 센서로서 널리 응용될 수 있다.
Int. CL C12N 15/10 (2017.01.01) C12N 15/115 (2010.01.01) G01N 33/74 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020200099798 (2020.08.10)
출원인 한양대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2021-0020800 (2021.02.24) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020190099881   |   2019.08.14
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.08.10)
심사청구항수 15

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한양대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성동구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김영필 서울 강동구
2 이은송 경기도 성남시 분당구
3 김태욱 경기도 고양시 덕양구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 아이피에스 대한민국 서울특별시 서초구 반포대로**길 **, *층 (서초동)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2020.08.10 수리 (Accepted) 1-1-2020-0836898-75
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2020.09.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 [출원서 등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2021.01.14 수리 (Accepted) 1-1-2021-0049931-81
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번호 청구항
1 1
금 나노입자-단일가닥 핵산 라이브러리를 준비함;상기 금 나노입자-단일가닥 핵산 라이브러리와 타겟물질을 반응시킴;상기 반응혼합물로부터 타겟물질과 결합한 단일가닥 핵산을 분리함; 및상기 반응혼합물의 색상 지표를 통하여 추가적인 반응 진행 여부를 결정함을 포함하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
2 2
제1항에 있어,상기 금 나노입자-단일 가닥 핵산 라이브러리를 준비함은,시트르산에 의한 환원 및 안정화에 의한 15nm 내지 50nm의 평균직경을 갖는 금 나노입자를 준비함;단일가닥 핵산 라이브러리를 준비함;상기 금 나노입자와 상기 단일가닥 핵산 라이브러리를 반응시킴; 및상기 금 나노입자와 결합하지 않은 단일가닥 핵산을 제거함을 포함하는 것을 특징으로 하는 타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
3 3
제1항에 있어,상기 반응혼합물로부터 타겟물질과 결합한 단일가닥 핵산을 분리함은,상기 반응혼합물을 원심분리 한 후 상청액을 수득함을 포함하는 것을 특징으로 하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
4 4
제1항에 있어,상기 반응혼합물로부터 타겟물질과 결합한 단일가닥 핵산을 분리한 후,단일가닥 핵산과 상기 타겟물질을 떼어낸 후 상기 단일가닥 핵산을 단리함을 더 포함하는 것을 특징으로 하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
5 5
제4항에 있어,상기 단일가닥 핵산을 단리함은 에탄올 침전을 수행함을 포함하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
6 6
제1항에 있어,상기 타겟물질과 결합한 단일가닥 핵산을 분리한 후,상기 타겟물질과 결합한 단일가닥 핵산을 증폭함을 더 포함하는 것을 특징으로 하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
7 7
제1항에 있어,상기 반응 혼합물의 색상 지표를 통하여 추가적인 반응 진행 여부를 결정함은,상기 반응 혼합물의 색상 지표를 측정함;상기 반응 혼합물의 색상 지표를 기준 색상 지표와 비교함을 포함하는 것을 특징으로 하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
8 8
제7항에 있어,상기 반응 혼합물의 색상 지표를 측정함에 앞서, 상기 금 나노입자가 응집 되도록 유도함을 더 포함하는 것을 특징으로 하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
9 9
제8항에 있어,상기 금 나노입자가 응집되도록 유도함은 상기 반응혼합물에 염을 첨가함을 포함하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
10 10
제1, 7, 및 8항 중 어느 하나에 있어,상기 반응 혼합물의 색상 지표는 금나노입자가 응집되기 전 2개의 파장에서 측정한 흡광도 값들의 비율과 응집된 이후 동일한 2개의 파장에서 측정한 흡광도 값들의 비율로서 정량화하는 것을 특징으로 하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
11 11
제1항에 있어,상기 반응 혼합물의 색상 지표를 통하여 추가적인 반응 진행 여부를 결정한 후, 상기 반응혼합물로부터 타겟물질과 결합한 단일가닥 핵산을 분리함이 순차적으로 수행되는 것을 특징으로 하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
12 12
제1항에 있어,상기 타겟물질은 브라시놀리드, 또는 비스페놀 A를 포함한 금나노입자의 응집을 유도할 수 있는 저분자 물질, 이온, 단백질, 핵산, 바이러스, 미생물군을 포함하는 것을 특징으로 하는 타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
13 13
제1항에 있어,상기 반응혼합물로부터 타겟물질과 결합한 단일가닥 핵산을 분리함, 및상기 반응혼합물의 색상 지표를 통하여 추가적인 반응 진행 여부를 결정함 이후,상기 타겟물질과 결합한 단일가닥 핵산의 금 나노입자-단일가닥 핵산 라이브러리를 준비함;상기 금 나노입자-단일가닥 핵산 라이브러리와 논타겟물질을 반응시킴;상기 반응혼합물로부터 논타겟물질과 결합하지 않은 단일가닥 핵산을 분리함;을 더 포함하고,이때, 상기 타겟물질과 상기 논타겟물질은 서로 다른 것을 특징으로 하는타겟물질에 대한 결합성을 갖는 단일가닥 핵산의 선택 방법
14 14
서열번호 1, 17 및 18로부터 선택된 하나의 염기서열로 구성되고,브라시놀리드에 대한 결합성을 가지며, B-시토스테롤에 대한 결합성이 상대적으로 약한 단일가닥 핵산
15 15
서열번호 1, 17 및 18로부터 선택된 하나 이상의 염기서열로 구성된 단일가닥 핵산을 포함하는 브라시놀리드를 정제하기 위한 키트
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육부(2020Y) (재)한국연구재단 이공분야기초연구사업 / 기초연구기반구축사업 / 대학중점연구소지원사업-중점연구소지원(이공계분야) 생체모방 나노센서시스템 연구
2 교육부(2020Y) (재)한국연구재단 이공분야기초연구사업 / 기초연구기반구축사업 / 대학중점연구소지원사업-중점연구소지원(이공계분야) 기초과학융합연구소