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직접 리프로그래밍을 통한 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법

  • 기술번호 : KST2021003092
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 성체세포로부터 직접 리프로그래밍을 통하여 유도 도파민성 신경세포 전구체를 제조하는 방법과 이를 통하여 제조된 유도 도파민성 신경세포 전구체 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명에 의해 제조된 유도 도파민성 신경세포 전구체는 성체세포로부터 직접 리프로그래밍 되므로 종양원성의 위험 없이 생체 내 이식이 가능하며, 증식능 및 도파민성 신경세포로의 분화능이 우수하여 파킨슨병의 세포 치료제로서 유용하게 활용될 것이다.
Int. CL C12N 5/0793 (2010.01.01) A61K 35/30 (2015.01.01) A61P 25/16 (2006.01.01) G01N 33/50 (2017.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020200121802 (2020.09.21)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2021-0034535 (2021.03.30) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020190116258   |   2019.09.20
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.09.21)
심사청구항수 30

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김장환 대전광역시 유성구
2 이민형 대전광역시 유성구
3 손미영 대전광역시 유성구
4 전영주 대전광역시 유성구
5 백아름 대전광역시 유성구
6 이영전 대전광역시 유성구
7 서진철 대전광역시 유성구
8 정초록 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 제일특허법인(유) 대한민국 서울특별시 서초구 마방로 ** (양재동, 동원F&B빌딩)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2020.09.21 수리 (Accepted) 1-1-2020-1003053-31
2 [우선심사신청]심사청구서·우선심사신청서
2021.02.08 수리 (Accepted) 1-1-2021-0161148-42
3 [우선심사신청]선행기술조사의뢰서
[Request for Preferential Examination] Request for Prior Art Search
2021.02.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 [우선심사신청]선행기술조사보고서
[Request for Preferential Examination] Report of Prior Art Search
2021.03.03 수리 (Accepted) 9-1-2021-0003064-08
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번호 청구항
1 1
다음 단계를 포함하는 유도 도파민성 신경세포 전구체(induced dopaminergic neuronal progenitors, iDPs)의 제조방법:a) 성체세포에 Oct4, Sox2, Klf4 및 Myc로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 유전자를 도입하는 단계;b) 상기 세포를 EGF 및 FGF2를 포함하는 배지에서 배양하는 단계; 및c) 상기 세포를 FGF8, SHH, Wnt 신호전달 작용제 및 TGF-β 억제제를 포함하는 배지에서 배양하는 단계
2 2
제1항에 있어서,상기 성체세포는 섬유아세포, 말초 혈액 단핵 세포(peripheral blood mononuclear cell, PBMC) 또는 중간엽 줄기세포(mesenchymal stem cell, MSC)인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
3 3
제1항에 있어서,상기 성체세포는 인간 유래인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 Wnt 신호전달 작용제는i) Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt4, Wnt5a, Wnt5b, Wnt6, Wnt7a, Wnt7b, Wnt8a, Wnt8b, Wnt9a, Wnt9b, Wnt10a, Wnt10b, Wnt11 및 Wnt16b; ii) GSK3 억제제인 리튬, LiCl, 이가 아연, BIO, SB216763, SB415286, CHIR99021, CHIR98014, QS11 수화물, TWS119, 켄폴론, 알스터폴론, 인디루빈-3-옥심, TDZD-8 및 Ro 31-8220 메탄설폰산염; iii) Axin 억제제;iv) APC 억제제;v) 노린; vi) R-스폰딘 2; 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 TGF-β 억제제는 A83-01, SB431542, RepSox, LY364947, SB525334 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
6 6
제1항에 있어서,상기 b)단계 배양 후, ROCK(Rho-associated protein kinase) 억제제인 Y-27632를 첨가하여 배양하는 단계를 더 포함하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
7 7
제1항에 있어서,상기 b)단계의 배지는 Wnt 신호전달 작용제, TGF-β 억제제, 2-포스포-L-아스코르브산 및 부티르산 나르튬(Sodium butyrate; NaB)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 화합물을 추가적으로 포함하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
8 8
제1항에 있어서,상기 b)단계의 배지는 Wnt 신호전달 작용제 및 TGF-β 억제제를 추가로 포함하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
9 9
제1항에 있어서,상기 c)단계의 배지는 2-포스포-L-아스코르브산를 추가적으로 포함하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
10 10
제1항에 있어서,상기 b)단계의 배지는 1 ng/㎖ 내지 100 ng/㎖의 EGF 및 1 ng/㎖ 내지 100 ng/㎖의 FGF2를 포함하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
11 11
제1항에 있어서,상기 c)단계의 배지는 10 ng/㎖ 내지 1000 ng/㎖의 FGF8, 100 ng/㎖ 내지 2000 ng/㎖의 SHH, 0
12 12
제1항에 있어서, 상기 a)단계는 12시간 내지 36시간 동안 수행하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
13 13
제1항에 있어서, 상기 b)단계는 5일 내지 9일 동안 수행하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
14 14
제1항에 있어서, 상기 c)단계는 10일 내지 18일 동안 수행하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
15 15
제1항에 있어서,성체세포로부터 유도 도파민성 신경세포 전구체를 직접 리프로그래밍 하는 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체의 제조방법
16 16
제1항의 제조방법으로 제조된 유도 도파민성 신경세포 전구체
17 17
제16항에 있어서,상기 유도 도파민성 신경세포 전구체는 증식 가능한 것인, 유도 도파민성 신경세포 전구체
18 18
(i) CORIN, FOXA2 및 LMX1A로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자가 만능 줄기세포 유래 도파민성 신경세포 전구체와 비교하여 감소된 발현을 나타내거나,(ii) EN1, PAX2, PAX5, PAX8 및 SPRY1로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자가 만능 줄기세포 유래 도파민성 신경세포 전구체와 비교하여 증가된 발현을 나타내거나, 또는 (iii) 상기 (i)의 감소된 발현 및 상기 (ii)의 증가된 발현을 나타내는, 유도 도파민성 신경세포 전구체
19 19
제18항에 있어서, (i) CORIN, FOXA2 및 LMX1A로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 유전자가 만능 줄기세포 유래 도파민성 신경세포 전구체와 비교하여 1,000배 내지 100,000배 감소된 발현을 나타내는, 유도 도파민성 신경세포 전구체
20 20
제18항에 있어서, (ii) EN1, PAX2, PAX5, PAX8 및 SPRY1로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자가 만능 줄기세포 유래 도파민성 신경세포 전구체와 비교하여 3배 내지 300배 증가된 발현을 나타내는, 유도 도파민성 신경세포 전구체
21 21
제18항에 있어서,HOXB1을 발현하지 않는, 유도 도파민성 신경세포 전구체
22 22
제18항에 있어서,내인성 Oct4 및 NANOG는 유도 만능 줄기세포와 비교하여 감소된 발현을 나타내는, 유도 도파민성 신경세포 전구체
23 23
제18항에 있어서,PAX6은 유도 신경 줄기세포와 비교하여 감소된 발현을 나타내며,EN1, LMX1A 및 FOXA2은 유도 신경 줄기세포와 비교하여 증가된 발현을 나타내는, 유도 도파민성 신경세포 전구체
24 24
제16항 내지 제23항 중 어느 하나의 항에 기재된 유도 도파민성 신경세포 전구체를 유효성분으로 포함하는 파킨슨병 예방 또는 치료용 약학적 조성물
25 25
제16항 내지 제23항 중 어느 하나의 항에 기재된 유도 도파민성 신경세포 전구체에 파킨슨병 예방 또는 치료제 후보 물질을 처리하는 단계; 및후보 물질을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 상기 유도 도파민성 신경세포 전구체의 증식력, 활성 또는 도파민성 신경세포로의 분화능을 측정하는 단계를 포함하는 파킨슨병 예방 또는 치료제 스크리닝 방법
26 26
Oct4, Sox2, Klf4 및 Myc로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 유전자가 도입된 인간 성체세포, EGF, FGF2, Wnt 신호전달 작용제 및 TGF-β 억제제를 포함하는 유도 도파민성 신경세포 전구체 제조용 혼합물
27 27
유도 도파민성 신경세포 전구체, FGF8, SHH, Wnt 신호전달 작용제 및 TGF-β 억제제를 포함하는 혼합물
28 28
EGF, FGF2, Wnt 신호전달 작용제 및 TGF-β 억제제를 포함하는 유도 도파민성 전구체 제조용 배지 조성물
29 29
FGF8, SHH, Wnt 신호전달 작용제 및 TGF-β 억제제를 포함하는 유도 도파민성 전구체 제조 또는 유지용 배지 조성물
30 30
제16항 내지 제23항 중 어느 하나의 항에 기재된 유도 도파민성 신경세포 전구체를 신경세포 분화 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 도파민성 신경세포의 제조방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 한국생명공학연구원 한국생명공학연구원연구운영비지원(R&D)(주요사업비) 생체모사 인공실험체(NOCS)기반 개인 맞춤질환모델 개발
2 과학기술정보통신부 한국생명공학연구원 국가간협력기반조성(R&D) 아시아인을 위한 신경계 질환 치료용 줄기세포 개발 및 활용기술 개발
3 과학기술정보통신부 한국생명공학연구원 바이오.의료기술개발 직접교차분화기술을 통한 도파민성 신경전구세포의 제작과 파킨슨병 세포유전자체료제 개발을 위한 응용 기술 개발
4 과학기술정보통신부 한국생명공학연구원 바이오.의료기술개발(R&D) 신경계 질환의 신약 스크리닝을 위한 인간줄기세포 기반의 플랫폼 개발