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말과동물 양막에서 세포를 단리하는 단계;단리한 세포를 배지에서 배양하는 단계; 및배양된 세포를 회수하는 단계를 포함하여,다음과 같은 특성을 나타내는 말과동물 양막-유래 다분화능 줄기세포의 제조방법:(a) Oct4, c-Myc, Klf4, PAX6, ALCAM, Integrin β1, Endoglin, 및 HCAM 유전자를 발현함;(b) CD14, CD34, CD45, 및 ELA-Ⅱ에 대하여 모두 음성의 면역학적 특성을 나타내고, CD44, CD90, 및 CD105에 대하여 모두 양성의 면역학적 특성을 나타냄;(c) 미분화 상태로 14 계대 이상 배양되는 능력을 가짐
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청구항 1에 있어서, 상기 배지는 저농도 글루코스 DMEM(low-glucose Dulbecco's Modified Eagle Medium)인 것인 다분화능 줄기세포의 제조방법
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청구항 2에 있어서, 상기 배지는 8 내지 12 w/v% 소태아혈청(FBS)을 더 포함하는 것인 다분화능 줄기세포의 제조방법
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청구항 1에 있어서, 상기 배지에서 배양하는 단계는 부착배양하는 것인 다분화능 줄기세포의 제조방법
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청구항 1에 있어서, 상기 배양은 배양 접시의 표면적 6
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청구항 1에 있어서, 상기 배양은 배양 접시의 표면적 9
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청구항 1에 있어서, 상기 말과동물 양막-유래 다분화능 줄기세포는 미분화된 상태로 24 계대 이상 배양되는 능력을 갖는 것인 다분화능 줄기세포의 제조방법
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청구항 1에 있어서, 상기 Klf4, PAX6, 및 Endoglin 유전자가 과발현하는 것인 다분화능 줄기세포의 제조방법
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청구항 8에 있어서, 상기 과발현은 동일한 개체의 섬유아세포 대비 3 배 이상 과발현하는 것인 다분화능 줄기세포의 제조방법
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다음과 같은 특성을 갖는 말과동물 양막-유래 다분화능 줄기세포:(a) Oct4, c-Myc, Klf4, PAX6, ALCAM, Integrin β1, Endoglin, 및 HCAM 유전자를 발현함;(b) CD14, CD34, CD45, 및 ELA-Ⅱ에 대하여 음성의 면역학적 특성을 나타내고, CD44, CD90, 및 CD105에 대하여 양성의 면역학적 특성을 나타냄;(c) 미분화 상태로 14 계대 이상 배양되는 능력을 가짐
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청구항 1 내지 9 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 다분화능 줄기세포, 또는 청구항 10의 다분화능 줄기세포, 이로부터 분화된 세포, 또는 이들의 조합을 유효성분으로 포함하는 세포 치료제
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청구항 11에 있어서, 상기 다분화능 줄기세포를 5x106 내지 1x107 세포수로 포함하는 것인 세포 치료제
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청구항 11에 있어서, FBS를 포함하는 PBS 완충액을 담체로서 포함하는 것인 세포 치료제
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청구항 11에 있어서, 상기 세포 치료제는 말과동물의 골관절염 치료용, 말과동물의 골 결실 질환 치료용, 말과동물의 지방 조직 형성용, 말과동물의 힘줄 조직 형성용 또는 말과동물의 근육 조직 형성용인 것인 세포 치료제
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