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각각 상하로 관통되는 제1포트홀과 제2포트홀을 포함하고, 상기 제1포트홀과 제2포트홀은 각각 제1기밀덮개와 제2기밀덮개로 밀폐되는 제1블록;상기 제1포트홀 및 제2포트홀과 각각 연통되는 제1홀 및 제2홀이 상하로 관통되며, 상기 제1블록의 하부에 결합되는 제2블록;상기 제2블록의 하부에 결합되며, 상기 제1홀 하부와 제2홀의 하부를 서로 연결하는 연결홈을 포함하는 제3블록; 및상기 제1포트홀 또는 상기 제1홀 내부에 위치하는 동물세포가 접종된 다공성 멤브레인을 포함하고,상기 다공성 멤브레인의 상부는 혐기 분위기이고, 하부는 호기 분위기인 것을 특징으로 하는 세포 공배양장치
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제1항에 있어서,상기 다공성 멤브레인은 상기 제1포트홀과 상기 제1홀 사이에 위치하는 것을 특징으로 하는 세포 공배양장치
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제1항에 있어서,상기 제1기밀덮개와 제2기밀덮개가 밀폐되는 둘레,상기 제1블록의 제1포트홀과 제2포트홀의 하부 둘레,상기 제2블록의 제1홀과 제2홀의 상부 둘레, 및상기 제3블록이 상기 제2블록과 결합하는 상부 둘레에 위치하는 기밀유지부를 더 포함하는 세포 공배양장치
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제1항에 있어서,상기 제1블록, 제2블록 및 제3블록은,폴리카보네이트 재질인 것을 특징으로 하는 세포 공배양장치
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5 |
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제1항에 있어서,상기 다공성 멤브레인은,니트로셀룰로오스(Nitrocellulose), 폴리카보네이트 또는 폴리에스터인 것을 특징으로 하는 세포 공배양장치
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6 |
6
제1항에 있어서,상기 다공성 멤브레인의 평균 기공크기는 0
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7
제1항에 있어서,상기 동물세포는 장 상피세포인 것을 특징으로 하는 세포 공배양장치
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8
제1항에 있어서,상기 다공성 멤브레인의 상부 공간에 혐기성 미생물이 배양되고, 하부 공간에 면역세포가 배양되는 것을 특징으로 하는 세포 공배양장치
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9
제8항에 있어서,상기 상부 공간과 상기 하부 공간 각각에 혐기성 미생물 배양액과 면역세포 배양액이 추가로 더 구비되는 것을 특징으로 하는 세포 공배양장치
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10
제1항에 있어서,상기 다공성 멤브레인의 상부 공간은 혐기성 세포가 접종되고, 하부 공간은 호기성 세포가 접종되되,상기 상부 공간과 상기 하부 공간은 각각 혐기성 세포 배양액과 호기성 세포 배양액이 추가로 더 구비되는 것을 특징으로 하는 세포 공배양장치
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상하로 관통되는 제1포트홀과 제2포트홀을 포함하는 제1블록;상기 제1포트홀 및 제2포트홀과 각각 연통되는 제1홀 및 제2홀이 상하로 관통되며, 상기 제1블록의 하부에 결합되는 제2블록;상기 제2블록의 하부에 결합되며, 상기 제1홀 하부와 제2홀의 하부를 서로 연결하는 연결홈을 포함하는 제3블록; 및상기 제1포트홀 또는 상기 제1홀 내부에 위치하는 다공성 멤브레인을 포함하는 세포 공배양장치를 이용하는 세포 공배양방법으로서,a) 상기 제1블록, 제2블록, 제3블록, 및 다공성 멤브레인을 각각 결합하는 단계;b) 상기 다공성 멤브레인 상부에 동물세포를 접종하여 배양하는 단계;c) 호기성 세포 배양액을 상기 제2포트홀을 통해 상기 다공성 멤브레인의 하부 공간에 주입하고, 상기 제2포트홀을 제2기밀덮개로 밀폐한 후 혐기 챔버에 거치하는 단계;d) 상기 혐기 챔버 내에서 상기 다공성 멤브레인 상부 공간이 혐기로 된 때에 혐기성 세포 배양액을 상기 제1포트홀을 통해 상기 다공성 멤브레인의 상부 공간에 주입하고, 상기 제1포트홀을 제1기밀덮개로 밀폐한 후 세포를 공배양하는 단계를 포함하는 세포 공배양방법
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제11항에 있어서,상기 a)단계 이후에 상기 세포 공배양장치를 멸균처리하는 단계를 더 포함하는 세포 공배양방법
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제11항에 있어서,상기 b)단계 이후에 세포 공배양장치의 내부를 멸균된 인산 완충용액으로 세척하는 단계를 더 포함하는 세포 공배양방법
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제11항에 있어서,상기 호기성 세포 배양액과 혐기성 세포 배양액의 부피비는 6 내지 7 : 1인 것을 특징으로 하는 세포 공배양방법
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제11항에 있어서,상기 b)의 배양 단계는,CO2 배양기의 온도를 35 내지 38℃로 하고, 4 내지 6% CO2 환경에서 7일간 배양하는 것을 특징으로 하는 세포 공배양방법
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제11항에 있어서,상기 d)의 공배양 단계는,혐기 챔버의 온도를 35 내지 38℃로 하고, 90% N2, 5% CO2, 5% H2 환경에서 10 내지 13시간 배양하는 것을 특징으로 하는 세포 공배양방법
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제11항에 있어서,상기 세포 공배양장치는 상기 제1포트홀과 연통되는 혐기 챔버 외부의 제1 연동 펌프 및 상기 제2포트홀과 연통되는 혐기 챔버 외부의 제2 연동 펌프를 더 포함하고,상기 세포 공배양장치를 이용하는 세포 공배양 시간은,상기 제1 연동 펌프를 통해 혐기성 세포 배양액을 추가하거나, 또는 상기 제2 연동 펌프를 통해 호기성 세포 배양액을 추가하여 증가시킬 수 있는 것을 특징으로 하는 세포 공배양방법
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제11항에 있어서,상기 c) 단계에서 상기 다공성 멤브레인의 하부 공간에 면역세포 또는 대식세포를 추가로 주입하거나, 상기 d) 단계에서 상기 다공성 멤브레인의 상부 공간에 유산균 또는 의약제를 추가로 주입하는 것을 특징으로 하는 세포 공배양방법
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