| 1 |
1
목적 단백질을 코딩하는 핵산 서열 및 가용성-향상 이중-기능성 융합 태그(solubility-enhancing bifunctional fusion tag)를 코딩하는 핵산 서열이 접목된 핵산 서열을 포함하는, 벡터
|
| 2 |
2
제 1항에 있어서,상기 가용성-향상 이중-기능성 융합 태그(solubility-enhancing bifunctional fusion tag)는 융합 파트너 및 스플릿 인테인(split intein)을 포함하는, 벡터
|
| 3 |
3
제 2항에 있어서,상기 스플릿 인테인은 노스톡 펑티포르메(Nostoc punctiforme) 유래 DnaE 단백질의 카르복시 말단(Ic)을 코딩하는 핵산 서열을 포함하는, 벡터
|
| 4 |
4
제 1항에 있어서,상기 가용성-향상 이중-기능성 융합 태그(solubility-enhancing bifunctional fusion tag)는 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진, 벡터
|
| 5 |
5
제 2항에 있어서,상기 융합 파트너는 말토오스 결합 단백질(Maltose binding protein; MBP), 글루타치온-S-전이효소(Glutathione-S-transferase; GST), 티오레독신(Thioredoxin; Trx), NusA(N-utilization substance protein A), SUMO(Small Ubiquitin-like modifier)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상인, 벡터
|
| 6 |
6
제 1항에 있어서,상기 목적 단백질은 호르몬류 및 이의 수용체, 생물학적반응 조절물질(biological response modifier) 및 이의 수용체, 사이토카인류 및 이의 수용체, 효소류, 항체류, 항체 단편류를 포함하는 생리활성 단백질인, 벡터
|
| 7 |
7
제 6항에 있어서,상기 목적 단백질은 섬유아세포 성장인자(fibroblast growth factor, FGF), 인간 성장 호르몬(hGH), 인슐린, 난포자극호르몬(follicle-stimulating hormone, FSH), 인간 융모성 성선자극호르몬(human chorionic gonadotropin), 부갑상선호르몬(parathyroid hormone, PTH), 적혈구 촉진인자(EPO), 혈소판생성 촉진인자(TPO), 과립구 콜로니 자극인자(G-CSF), 과립구 대식세포 콜로니 자극인자(GM-CSF), 인터페론 알파, 인터페론 베타, 인터페론 감마, 인터루킨, 대식세포 (marophage) 활성화 인자, 종양괴사인자(tumor necrosis factor), 조직플라스미노겐 활성체(tissue plasminogen activator), 혈액응고인자 Ⅶ/Ⅶa, hBMP2 (human bone morphogenic protein 2), KGF(keratinocyte growth factor), PDGF (platelet-derived growth factor), 알파-갈락토시다제 A(α-galactosidase A), 이두로네이트-2-설파타제(iduronate-2-sulfatase), 락타제(lactase), 아데노신 데아미나제(adenosine deaminase), 부티릴콜린에스터라제(butyrylcholinesterase), 키티나제(chitinase), 글루타메이트 디카복실라제(glutamate decarboxylase), 이미글루세라제(imiglucerase), 리파제(lipase), 유리카제(uricase), 혈소판-활성인자 아세틸하이드롤라제(platelet-activating factor acetylhydrolase), 중성 엔도펩티다제(neutral endopeptidase), 유로키나제, 스트렙토키나제, 마이엘로퍼옥시다제 (myeloperoxidase), 수퍼옥사이드디스뮤타제(superoxide dismutase), 보톨리늄 독소, 콜라게나제, 히알루로니다제 (hyaluronidase), L-아스파라기나제(L-asparaginase), 단일클론항체, 다클론항체, scFv, Fab, Fab', F(ab')2, Fd 및 이들의 단편으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 또는 둘 이상인, 벡터
|
| 8 |
8
제 8항에 있어서,상기 목적 단백질은 서열번호 8 내지 서열번호 12로 이루어진 군에서 선택되는 아미노산 서열로 이루어진, 벡터
|
| 9 |
9
목적 단백질을 코딩하는 핵산 서열 및 가용성-향상 이중-기능성 융합 태그(solubility-enhancing bifunctional fusion tag)를 코딩하는 핵산 서열이 접목된 핵산 서열을 포함하는 벡터를 제작하는 단계;상기 벡터를 숙주 세포에 형질전환하여 형질전환체를 제조하는 단계;상기 형질전환체를 배양하여 가용성-향상 이중-기능성 융합 태그가 접목된 재조합 융합 단백질을 수득하는 단계;를 포함하는, 가용성이 향상된 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
| 10 |
10
제 9항에 있어서,상기 가용성-향상 이중-기능성 융합 태그(solubility-enhancing bifunctional fusion tag)는 융합 파트너 및 스플릿 인테인(split intein)을 포함하는, 가용성이 향상된 재조합 융합 단백질의 제조방법
|
| 11 |
11
제 9항에 있어서,상기 숙주 세포는 에스케리치아 속(Escherichia sp
|
| 12 |
12
제 9항 내지 제 11항 중 어느 한 항의 제조방법으로 제조된, 가용성이 향상된 재조합 융합 단백질
|
| 13 |
13
제 9항 내지 제 11항 중 어느 한 항의 제조방법으로 가용성이 향상된 재조합 융합 단백질을 제조하는 단계; 및노스톡 펑티포르메(Nostoc punctiforme) 유래 DnaE 단백질의 아미노 말단(IN) 펩타이드를 첨가하는 단계;를 포함하는, 목적 단백질의 정제방법
|
| 14 |
14
제 13항에 있어서,상기 노스톡 펑티포르메(Nostoc punctiforme) 유래 DnaE 단백질의 아미노 말단(IN) 펩타이드의 서열은 PCR 증폭시 부반응의 방지를 위해 아미노산 돌연변이를 포함하는, 목적 단백질의 정제방법
|
| 15 |
15
제 14항에 있어서,상기 아미노산 돌연변이는 아미노 말단 1번 위치의 시스테인(Cystein)을 치환하는 것인, 목적 단백질의 정제방법
|
