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서열번호 1의 아미노산 서열에서 S193A/H251Q/F264L, S193A/T257A/F264L 및 S193A/H251Q/T257A 중 선택되는 어느 하나로 치환이 일어난 아미노산 서열로 이루어진 G-계열 유기인 신경작용제를 분해하는 재조합 파라옥소나제1(recombinant paraoxonase1) 돌연변이 단백질; 및서열번호 2의 아미노산 서열에서 K159E/T117A, K77A/K159E/T177A 및 K159E/T173N/T177A 중 선택되는 어느 하나로 치환이 일어난 아미노산 서열로 이루어진 V-계열 유기인 신경작용제를 분해하는 세균성 유기인 화합물 가수분해효소(bacterial organophosphorus hydrolase) 돌연변이 단백질을 결합시킨 것을 특징으로 하는 재조합 PON1-OPH 융합체
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제1항에 있어서,상기 재조합 파라옥소나제1 돌연변이 단백질 및 상기 세균성 유기인 화합물 가수분해효소 돌연변이 단백질 사이가 링커 서열로 연결된 것을 특징으로 하는 재조합 PON1-OPH 융합체
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제2항에 있어서,상기 링커 서열은 서열번호 3으로 나타내는 아미노산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는 재조합 PON1-OPH 융합체
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(a) 인간 유래 파라옥소나아제1 유전자에 돌연변이를 유발시켜 조작된 재조합 파라옥소나제1 돌연변이 클론을 제조하는 단계;(b) 세균성 유기인 화합물 가수분해효소 유전자에 돌연변이를 유발시켜 조작된 세균성 유기인 화합물 가수분해효소 돌연변이 클론을 제조하는 단계;(c) 상기 재조합 파라옥소나제1 돌연변이 클론과 상기 세균성 유기인 화합물 가수분해효소 돌연변이 클론이 결합하여 이루어진 재조합 PON1-OPH 융합체 유전자를 함유하는 재조합 발현벡터를 제조하는 단계;(d) 상기 재조합 발현벡터를 이용하여 재조합 PON1-OPH 융합체 유전자를 목적 단백질 발현 숙주세포에 도입하여 형질전환하는 단계;(e) 상기 (d) 단계에서 형질전환된 목적 단백질 발현 숙주세포를 배양하는 단계; 및(f) 상기 (e) 단계의 배양액으로부터 발현된 목적 단백질인 재조합 PON1-OPH 융합체를 회수하는 단계를 포함하며,상기 재조합 PON1-OPH 융합체는,서열번호 1의 아미노산 서열에서 S193A/H251Q/F264L, S193A/T257A/F264L 및 S193A/H251Q/T257A 중 선택되는 어느 하나로 치환이 일어난 아미노산 서열로 이루어진 재조합 파라옥소나제1 돌연변이 단백질; 및 서열번호 2의 아미노산 서열에서 K159E/T117A, K77A/K159E/T177A 및 K159E/T173N/T177A 중 선택되는 어느 하나로 치환이 일어난 아미노산 서열로 이루어진 세균성 유기인 화합물 가수분해효소 돌연변이 단백질;이 결합하여 이루어진 것을 특징으로 하는 재조합 PON1-OPH 융합체 제조방법
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제6항에 있어서,상기 (c) 단계는,상기 재조합 파라옥소나제1 돌연변이 클론이 링커 서열을 통해 상기 세균성 유기인 화합물 가수분해효소 돌연변이 클론과 연결되도록 이루어진 재조합 PON1-OPH 융합체 유전자를 함유하는 재조합 발현벡터를 제조하는 것을 특징으로 하는 재조합 PON1-OPH 융합체 제조방법
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제6항에 있어서,상기 목적 단백질 발현 숙주세포는 박테리아, 곰팡이 및 효모로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 재조합 PON1-OPH 융합체 제조방법
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제6항에 있어서,상기 (f) 단계는,상기 재조합 PON1-OPH 융합체를 컬럼 크로마토그래피를 통해 배양액으로부터 회수하는 것을 특징으로 하는 재조합 PON1-OPH 융합체 제조방법
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