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자성 비드를 이용한 단일세포 분석 방법

  • 기술번호 : KST2021010668
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 자성 비드를 이용한 단일세포 분석방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로 비오틴화된 세포 특이적 프라이머가 결합되어 있는 스트렙타비딘 자성 비드를 이용한 마이크로웰 기반의 단일세포 분석 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 단일세포 분석 방법(MAPS-seq)은 비오틴화된 세포 특이적 프라이머가 결합되어 있는 스트렙타비딘이 코팅된 자성 비드를 이용하여 다중 세포에서 정확성 높은 단일세포의 전사체 분석이 가능하며, 역전사 과정 전인 분석 초기 단계에서 샘플을 하나의 튜브로 한꺼번에 풀링(pooling)하기 때문에 고가의 장비나 고도의 기술적 조작 없이 분석을 수행하기 용이하고 시약의 낭비를 줄여 비용절감의 효과가 있다. 또한 구체적인 검증 실험을 통해 상기 방법으로 인간과 마우스 세포주를 각 종으로 효과적으로 분리 가능하며, 상기 방법이 약물 반응 연구에 적용될 수 있음을 구체적으로 확인하였는바, 본 발명에 따른 MAPS-seq 방법은 향상된 편리함과 우수한 비용 절감 효과를 갖는 마이크로웰 기반 분석법으로 관련 분야에서 다양한 연구에 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
Int. CL C12Q 1/6869 (2018.01.01) C12N 15/10 (2017.01.01)
CPC C12Q 1/6869(2013.01) C12N 15/1065(2013.01) C12Q 2525/173(2013.01) C12Q 2537/143(2013.01) C12Q 2565/519(2013.01) C12Q 2563/185(2013.01) C12Q 2563/143(2013.01) C12Q 2563/149(2013.01)
출원번호/일자 1020200011319 (2020.01.30)
출원인 경희대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2021-0097522 (2021.08.09) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.01.30)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 경희대학교 산학협력단 대한민국 경기도 용인시 기흥구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이지현 서울특별시 종로구
2 방두희 서울특별시 종로구
3 이동인 서울특별시 서대문구
4 박문수 전라남도 나주시 호수로 **, *

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인(유한)아이시스 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로**길 **, 인화빌딩 *층 (삼성동)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2020.01.30 수리 (Accepted) 1-1-2020-0101769-55
2 [출원서 등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2020.11.13 수리 (Accepted) 1-1-2020-1219816-15
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2021.01.18 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2021.03.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2021-0057290-70
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2021.03.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2021-0256489-47
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2021.05.27 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2021-0611872-68
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견서·답변서·소명서
 2021.05.27 수리 (Accepted) 1-1-2021-0611871-12
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번호 청구항
1 1
하기의 단계를 포함하는, 단일세포 분석 방법:(a) 세포를 각각의 단일세포로 분주하고 용해시키는 단계;(b) 비오틴화된 세포 특이적 바코드 올리고(Biotinylated cell specific barcode oligo; BCO)가 결합된 스트렙타비딘 자성 비드(Streptavidin magnetic bead)를 세포 용해물에 첨가하여 각 세포 샘플을 바코딩하는 단계;(c) 바코딩된 샘플들을 하나의 튜브로 풀링(pooling)하는 단계; 및(d) 상기 풀링된 세포 샘플들에 대하여 단일세포 RNA 서열분석을 실시하는 단계
2 2
제1항에 있어서, 상기 비오틴화된 세포 특이적 바코드 올리고는 비오틴(Biotin), 서열번호 1의 염기서열로 이루어진 올리고뉴클레오티드, 세포 특이적 바코드, 각 mRNA의 고유 분자 식별자(unique molecular identifier; UMI) 및 폴리 T(poly T) 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는, 단일세포 분석 방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 단계 (a)에서, 단일세포로 분주하는 과정은 형광표지세포분류기(Fluorescence activated cell sorter; FACS)를 이용해 수행되는 것을 특징으로 하는, 단일세포 분석 방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 단계 (a)에서, 단일세포는 96웰 플레이트의 각 웰 내로 분주되는 것을 특징으로 하는, 단일세포 분석 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 단계 (b)에서, 상기 스트렙타비딘 자성 비드는 10 내지 50μg의 농도로 처리되는 것을 특징으로 하는, 단일세포 분석 방법
6 6
제1항에 있어서,상기 단계 (d)에서, 단일세포의 RNA 서열분석은 풀링된 세포 샘플에 대하여 한번에 이루어지는 것을 특징으로 하는, 단일세포 분석 방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 단계 (d)에서, 단일세포의 RNA 서열분석 전에 mRNA의 역전사 및 cDNA를 증폭시키는 과정을 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 단일세포 분석 방법
8 8
제1항에 있어서, 상기 단계 (d)에서, 단일세포의 RNA 서열분석은 차세대 염기서열 분석(Next generation sequencing)을 통해 수행되는 것을 특징으로 하는, 단일세포 분석 방법
9 9
제1항에 있어서, 상기 단계 (d)에서, 단일세포의 RNA 서열분석 이후에 역다중화(demultiplexing)하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는, 단일세포 분석 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 경희대학교 산학협력단 개인기초연구사업 중견연구 단일 세포 빅데이터 기반 항암제 스크리닝 플랫폼 개발
2 보건복지부 경희대학교 산학협력단 포스트게놈신산업육성을위한다부처유전체사업(R＆D) 말초혈액 유래 면역세포 프로파일링을 통한 암 진단도구 개발
3 과학기술정보통신부 연세대학교 개인기초연구 종양 세포의 진화와 치료에 관한 차세대 플랫폼기술 개발