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리포터 유전자 분석 시스템을 이용한 PPARγ 활성물질의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2021010678
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 리포터 유전자 분석 시스템을 이용한 PPARγ 활성물질의 스크리닝 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 CV-1 세포에서 PPARγ 단백질에 반응하는 물질을 스크리닝할 수 있는 PPARγ 리포터-유전자 분석 시스템 및 이를 이용한 스크리닝 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 PPARγ 리포터 유전자 분석 시스템은 종래 시스템과 비교해 PPARγ가 발현되지 않는 CV-1 세포를 이용하여 반응성이 보다 민감하게 나타나고 반응 프로파일에 있어서도 차이를 보이는바, 보다 정확한 PPARγ에 대한 활성물질 스크리닝이 가능하며, 나아가 상기 시스템을 활용해 유해 화학물질의 PPARγ 작용유해성 평가하기 위한 용도로써 in vivo 실험 전에 후보물질을 선별하는 사전 스크리닝 방법으로 활용이 가능할 것으로 기대된다.
Int. CL C12Q 1/6816 (2018.01.01) C12N 15/85 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020210009144 (2021.01.22)
출원인 경희대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2021-0102066 (2021.08.19) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020200015730   |   2020.02.10
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2021.01.22)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 경희대학교 산학협력단 대한민국 경기도 용인시 기흥구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김은영 서울특별시 용산구
2 송우선 서울특별시 영등포구
3 고동희 서울특별시 도봉구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인(유한)아이시스 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로**길 **, 인화빌딩 *층 (삼성동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2021.01.22 수리 (Accepted) 1-1-2021-0086281-13
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번호 청구항
1 1
(i) GAL4 DNA 결합 도메인-PPARγ(Peroxisome proliferator-activated receptor gamma) 리간드 결합 도메인(GAL4 DBD-PPARγ LBD) 융합단백질을 암호화하는 뉴클레오티드를 포함하는 제 1 플라스미드 벡터 및 (ii) GAL4가 결합하는 UAS(upstream activation sequence) 영역 및 리포터 유전자를 포함하는 제 2 플라스미드 벡터가 도입된 CV-1(Normal African Green Monkey Kidney Fibroblast Cells) 세포를 포함하는, PPARγ 활성물질의 스크리닝 시스템
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제1항에 있어서,상기 리포터 유전자는 각각 녹색 형광 단백질(GFP), 변형된 녹색 형광 단백질(modified green fluorescent protein), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced green fluorescent protein; EGFP), 적색 형광 단백질(RFP), 증강된 적색 형광 단백질(ERFP), 청색 형광 단백질(BFP), 증강된 청색 형광 단백질(EBFP), 황색 형광단백질(YFP), 증강된 황색 형광 단백질(EYFP), 남색 형광 단백질(CFP), 증강된 남색 형광 단백질(ECFP), DsRed, 레닐라 루시퍼라제(Renila luciferase) 및 파이어플라이 루시퍼라제(Firefly luciferase)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 스크리닝 시스템
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제1항에 있어서,GAL4 DBD-PPARγ LBD 융합단백질을 암호화하는 뉴클레오티드는 서열번호 5의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 스크리닝 시스템
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제1항에 있어서,상기 GAL4 DBD-PPARγ LBD에서 GAL4 DBD와 PPARγ LBD는 IgA 링커로 연결된 것을 특징으로 하는, 스크리닝 시스템
5 5
제1항에 있어서,상기 활성물질은 PPARγ에 작용하는 작용제(agonist) 또는 길항제(antagonist)인 것을 특징으로 하는, 스크리닝 시스템
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하기의 단계를 포함하는, PPARγ(Peroxisome proliferator-activated receptor gamma) 활성물질의 스크리닝 방법:(a) 제1항의 CV-1 세포에 시험물질을 처리하는 단계; 및(b) 상기 시험물질이 처리된 세포로부터 형광 신호를 측정하는 단계
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 환경부 경희대학교 산학협력단 생활공감 환경보건기술개발사업 흡입독성 AOP를 활용한 in-silico 및 in-vitro 대체시험법 개발