1 |
1
폴리 하이드록시알카노에이트 (Polyhydroxyalkanoate, PHA) 합성 유전자 클러스터, 3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소 (3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase) 및 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소를 코딩하는 유전자를 포함하는, 3-하이드록시부티레이트-4-하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 재조합 벡터
|
2 |
2
제 1항에 있어서,상기 폴리 하이드록시알카노에이트(Polyhydroxyalkanoate, PHA) 합성 유전자 클러스터는 β-케토티올라아제, 아세토아세틸-CoA 환원효소 및 PHB 신타아제의 조합이며,상기 β-케토티올라아제는 아세틸 CoA를 아세토아세틸-CoA 로 전환하는 효소이고,상기 아세토아세틸-CoA 환원효소는 아세토아세틸-CoA를 3-하이드록시부틸 CoA로 전환하는 효소이며,상기 PHB 신타아제는 3-하이드록시부틸 CoA를 PHB로 중합하는 효소인, 3-하이드록시부티레이트-4-하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 재조합 벡터
|
3 |
3
제 1항에 있어서, 상기 하이드록시알카노에이트 (Polyhydroxyalkanoate, PHA) 합성 클러스터를 코딩하는 유전자 phaABC는 서열번호 1의 염기서열로 표시된 것을 특징으로 하는, 3-하이드록시부티레이트-4-하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 재조합 벡터
|
4 |
4
제 1항에 있어서, 상기 3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소는 3-하이드록시부틸릴 CoA로부터 crotonyl CoA의 전환을 촉매하는 효소인, 3-하이드록시부티레이트-4-하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 재조합 벡터
|
5 |
5
제 1항에 있어서, 3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소 코딩하는 유전자 CroR는 서열번호 2 또는 3의 염기서열로 표시된 것을 특징으로 하는, 3-하이드록시부티레이트-4-하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 재조합 벡터
|
6 |
6
제 1항에 있어서, 상기 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소는 crotonyl CoA로부터 4-하이드록시부틸릴 CoA의 전환을 촉매하는 효소인, 3-하이드록시부티레이트-4-하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 재조합 벡터
|
7 |
7
제 1항에 있어서, 상기 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소를 코딩하는 유전자 abfD는 서열번호 4, 5 또는 6의 염기서열로 표시된 것을 특징으로 하는, 3-하이드록시부티레이트-4-하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 재조합 벡터
|
8 |
8
3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소 (3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase) 및 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소를 코딩하는 유전자를 포함하는, 3-하이드록시부티레이트-4-하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 재조합 벡터
|
9 |
9
crotonyl-CoA carboxylase/reductase의 유전자를 녹아웃 (knockout)시킨 것을 특징으로 하는, 유전자 제거용 벡터
|
10 |
10
제9항에 있어서,상기 crotonyl-CoA carboxylase/reductase를 코딩하는 유전자는 서열번호 7의 염기서열로 표시되는 것을 특징으로 하는, 유전자 제거용 벡터
|
11 |
11
crotonyl-CoA carboxylase/reductase의 유전자를 녹아웃 (knockout)시킨 것을 특징으로 하는, 유전자 제거 및 삽입용 벡터에서,상기 crotonyl-CoA carboxylase/reductase 제거용 벡터는 추가로 glyoxylate shunt 관련 유전자 이소시트레이트 리아제와 말산 신타아제를 삽입한 것을 특징으로 하는, 유전자 제거 및 삽입용 벡터
|
12 |
12
제 11항에 있어서, 상기 이소시트레이트 리아제를 코딩하는 유전자는 서열번호 7의 염기서열로 표시되는 것을 특징으로 하고, 말산 신타아제를 코딩하는 유전자는 서열번호 8의 염기서열로 표시되는 것을 특징으로 하고, 유전자 제거 및 삽입용 벡터
|
13 |
13
제 1항에 있어서, 폴리 하이드록시알카노에이트 (Polyhydroxyalkanoate, PHA) 합성 유전자 클러스터, 3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소 (3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase) 및 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소를 코딩하는 유전자가 도입된, 4-하이드록시부틸릴-CoA 또는 3-하이드록시부틸레이트 4하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 형질전환 대장균
|
14 |
14
제 8항에 있어서, 3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소 (3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase) 및 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소를 코딩하는 유전자가 도입된, 4-하이드록시부틸릴-CoA 또는 3-하이드록시부티레이트 4하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 형질전환 라스토니아 유트로파 (Ralstonia eutropha)
|
15 |
15
제 1항에 있어서, 폴리 하이드록시알카노에이트(Polyhydroxyalkanoate, PHA) 합성 유전자 클러스터, 3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소 (3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase) 및 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소를 코딩하는 유전자가 도입된, 4-하이드록시부틸릴-CoA 또는 3-하이드록시부티레이트 4하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 형질전환 type I 형질전환 메탄자화균
|
16 |
16
제 8항에 있어서, 3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소 (3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase) 및 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소를 코딩하는 유전자가 도입된, 4-하이드록시부틸릴-CoA 또는 3-하이드록시부티레이트 4하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 형질전환 type II 형질전환 메탄자화균
|
17 |
17
제15 내지 16항에 있어서, 상기 메탄자화균은 메틸로모나스 속(Methylomonas), 메틸로박터 속(Methylobacter), 메틸로코커스 속(Methylococcus), 메틸로스페라 속(Methylosphaera), 메틸로칼덤 속(Methylocaldum), 메틸로글로버스 속(Methyloglobus), 메틸로사르시나 속(Methylosarcina), 메틸로프로펀더스 속(Methyloprofundus), 메틸로썰머스 속(Methylothermus), 메틸로할로비우스 속(Methylohalobius), 메틸로게아 속(Methylogaea), 메틸로마리넘 속(Methylomarinum), 메틸로벌럼 속(Methylovulum), 메틸로마리노범 속(Methylomarinovum), 메틸로러브럼 속(Methylorubrum), 메틸로파라코커스 속(Methyloparacoccus), 메틸로시스티스 속(Methylocystis), 메틸로셀라 속(Methylocella), 메틸로캡사 속(Methylocapsa), 메틸로퍼룰라 속(Methylofurula), 메틸아시디필럼 속(Methylacidiphilum), 메틸아시디마이크로븀 속(Methylacidimicrobium), 메틸로마이크로븀(Methylomicrobium) 속 또는 메틸로시 너스 속(Methylosinus) 균주인, 형질전환 메탄자화균
|
18 |
18
제15항에 있어서,상기 메탄자화균은 메틸로마이크로븀 알칼리필리엄(Methylomicrobium alcaliphilum) 20Z인, 형질전환 메탄자화균
|
19 |
19
제16항에 있어서,상기 메탄자화균은 메틸로시너스 트리코스포륨(Methylosinus trichosporium) OB3b인, 형질전환 메탄자화균
|
20 |
20
제19항에 있어서, 상기 형질전환 메탄자화균은 추가로 크락토닐 CoA 카르복실라아제/환원효소의 내재된 활성을 약화 또는 제거하고 그 위치에 이소시트레이트리아제 (isocitrate lyase, ICL) and 말산 신타아제 (malate synthase, MS) 유전자를 도입한 3-하이드록시부티레이트 4하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 형질전환 메탄자화균
|
21 |
21
제20항에 있어서,상기 형질전환 메탄자화균은 β-케토티올라아제, 아세토아세틸-CoA 환원효소, PHB 신타아제 유전자를 도입한, 3-하이드록시부티레이트 4하이드록시부티레이트 공중합체 생산용 형질전환 메탄자화균
|
22 |
22
제1항 내지 제8항 또는 제13 내지 제16항 중 어느 한 항의 형질전환 미생물을 포함하는, 3-하이드록시부티레이트 4하이드록시부티레이트 공중합체 제조 방법
|
23 |
23
폴리 하이드록시알카노에이트 (Polyhydroxyalkanoate, PHA) 합성 유전자 클러스터, 3-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소 (3-hydroxybutyryl-CoA dehydratase) 및 4-하이드록시부틸릴 CoA 탈수 효소를 코딩하는 유전자를 이용한 3-하이드록시부티레이트 4하이드록시부티레이트 공중합체 제조방법
|