| 1 |
1
형광단백질로 표지된 사이토크롬 P450 (cytochrome P450)으로 형질전환된 것을 특징으로 하는 AHR(aryl hydrocarbon receptor) 조절제 스크리닝용 인간 유도만능 줄기세포주(human induced pluripotent stem cell line; hiPSC line)
|
| 2 |
2
제1항에 있어서,상기 인간 유도만능 줄기세포주는 수탁번호 KCTC 14186BP로 기탁된 것을 특징으로 하는, 인간 유도만능 줄기세포주
|
| 3 |
3
제1항에 있어서, 상기 형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescence protein, GFP), 청색형광단백질(CFP), 황색형광단백질(YFP) 및 적색형광단백질(DsRed)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 인간 유도만능 줄기세포주
|
| 4 |
4
제1항에 있어서,상기 형광단백질은 mCherry인 것을 특징으로 하는, 인간 유도만능 줄기세포주
|
| 5 |
5
제1항에 있어서,상기 사이토크롬 P450은 CYP1A1, CYP1A2 및 CYP1B1로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 인간 유도만능 줄기 세포주
|
| 6 |
6
제1항에 있어서,상기 인간 유도만능 줄기세포주는 서열번호 1 내지 3으로 표시되는 유전자를 표적으로 하는 sgRNA로 mCherry를 삽입한 벡터로 형질감염하여 제조된 것을 특징으로 하는, 인간 유도만능 줄기세포주
|
| 7 |
7
제1항에 있어서,상기 인간 유도만능 줄기세포주는 표적화 벡터로 pMCDT-A 벡터를 이용하여 형질감염하여 제조된 것을 특징으로 하는, 인간 유도만능 줄기세포주
|
| 8 |
8
제1항에 있어서,상기 인간 유도만능 줄기세포주는 NANOG, OCT4, SOX2, TRA-1-60 및 TRA-1-81 마커가 발현되는 것을 특징으로 하는, 인간 유도만능 줄기세포주
|
| 9 |
9
제1항에 있어서,상기 인간 유도만능 줄기세포주는 삼배엽으로 분화시 Pax6, Otx2, alpha-SMA, EOMES, Brachyury, FOXA2, GATA4 및 Sox17이 발현되는 것을 특징으로 하는, 인간 유도만능 줄기세포주
|
| 10 |
10
1) 제1항의 형광단백질로 표지된 사이토크롬 P450 단백질(cytochrome P450)로 형질전환된 인간 유도만능 줄기세포주(human induced pluripotent stem cell line; hiPSC line)에 시험물질을 접촉시키는 단계; 2) 상기 시험물질을 접촉한 형광단백질로 표지된 사이토크롬 P450 단백질로 형질전환된 인간 유도만능 줄기세포주에서 형광단백질의 신호 세기를 측정하는 단계; 및 3) 대조구 시료와 비교하여 상기 형광단백질의 신호 세기가 변화된 시험물질을 선별하는 단계를 포함하는 AHR 조절제 스크리닝 방법
|
| 11 |
11
제10항에 있어서, 단계 3)의 대조구 시료는 BaP 또는 TCDD인 것을 특징으로 하는, AHR 조절제 스크리닝 방법
|
| 12 |
12
제1항의 형광단백질로 표지된 사이토크롬 P450 단백질로 형질전환된 인간 유도만능 줄기세포주를 이용하여 대량분석시스템(High Content Screening; HCS)에서 수행하는 AHR 조절제 스크리닝 방법
|
| 13 |
13
제12항에 있어서,상기 스크리닝 방법은 세포가 살아있는 상태에서 수행되는 것을 특징으로 하는, AHR 조절제 스크리닝 방법
|
| 14 |
14
제10항 또는 제12항에 있어서,상기 AHR 조절제는 파파베린 하이드로클로라이드(papaverine hydrochloride), 노르디하이드로구아이아레트 산(nordihydroguaiaretic acid), 글라페닌(glafenine), 양오닌(yangonin) 및 데스메톡시양오닌(desmethoxyyangonin)으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, AHR 조절제 스크리닝 방법
|
