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목적 단백질; 및상기 목적 단백질의 N-말단에 융합된 번역 속도 조절용 램프 태그(ramp tag);를 포함하는 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질로서,상기 목적 단백질은 N-말단의 신호 서열(signal sequence)에 변이가 가해진 것인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 1항에 있어서,상기 목적 단백질은 하이드로포빈인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 2항에 있어서,상기 목적 단백질은 클래스 I 하이드로포빈인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 3항에 있어서,상기 목적 단백질은 DewA인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 1항에 있어서,상기 목적 단백질의 야생형은 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 1항에 있어서,상기 목적 단백질은 서열번호 8 또는 서열번호 10의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 1항에 있어서,상기 램프 태그는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 1항에 있어서,상기 신호 서열은 서열번호 3의 염기서열로 이루어진 것인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 1항에 있어서,상기 변이는 신호 서열의 일부 또는 전체 아미노산의 치환, 결실, 및 신규 아미노산의 추가로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상인 것인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질
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제 1항 내지 제 9항 중 어느 한 항의 재조합 융합 단백질을 코딩하는 염기서열
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제 10항의 염기서열이 도입된 단백질의 가용성 발현용 벡터
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제11항의 벡터로 형질전환된, 재조합 융합 단백질의 가용성 발현용 형질전환체
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a) 목적 단백질; 및 상기 목적 단백질의 N-말단에 융합된 번역 속도 조절용 램프 태그를 포함하는 재조합 융합 단백질을 코딩하는 염기서열을 도입한 벡터를 인간을 제외한 숙주 세포에 형질전환하여 재조합 융합 단백질을 가용성으로 발현시키는 단계; 및b) 상기 발현된 재조합 융합 단백질을 정제하는 단계;를 포함하는, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 13항에 있어서,상기 b) 단계는,b1) 상기 형질전환체 세포를 현탁 후 파쇄하고 원심분리하여 제 1 상등액을 얻는 단계;b2) 상기 제 1 상등액에 제 1 용매를 첨가하여 얻은 제 1 혼합물을 진탕 후 원심분리하여 제 2 상등액을 얻는 단계; 및b3) 상기 제 2 상등액에 제 2 용매를 첨가하여 얻은 제 2 혼합물을 진탕 후 원심분리하여 목적 단백질을 회수하는 단계;를 포함하는, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 13항에 있어서,상기 목적 단백질은 하이드로포빈인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 15항에 있어서,상기 목적 단백질은 클래스 I 하이드로포빈인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 16항에 있어서,상기 목적 단백질은 DewA인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 13항에 있어서,상기 목적 단백질의 야생형은 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 13항에 있어서,상기 목적 단백질은 서열번호 8 또는 서열번호 10의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 가용성으로 발현되는 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 13항에 있어서,상기 램프 태그는 숙주 세포의 희귀 코돈(rare codon)의 수집을 통해 얻는 것인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 13항에 있어서,상기 숙주 세포는 에스케리치아 속(Escehreichia sp
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제 14항에 있어서,상기 제 1 용매 및 제 2 용매는 각각 이소프로필 알코올인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 22항에 있어서,상기 제 1 상등액에 혼합하는 이소프로필 알코올의 부피비는 1:2 내지 1:3인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 20항에 있어서,상기 램프 태그는 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 20항에 있어서,상기 희귀 코돈의 수집은 코돈의 빈도수 및 이소수용체(isoacceptor) tRNA 유전자 수를 분석하여 이루어지는 것인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 25항에 있어서,상기 코돈의 빈도 수는 0
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제 24항에 있어서,상기 이소수용체 tRNA 유전자 수는 0 내지 2개인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 13항에 있어서,상기 목적 단백질은 호르몬류 및 이의 수용체, 생물학적반응 조절물질(biological response modifier) 및 이의 수용체, 사이토카인류 및 이의 수용체, 효소류, 항체류, 항체 단편류를 포함하는 생리활성 단백질인, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질의 정제 방법
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제 13항 내지 제28항 중 어느 한 항의 정제 방법을 통해 정제된, 가용성으로 발현된 재조합 융합 단백질
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