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(a) 개체의 혈액시료를 수득하는 단계;(b) 상기 혈액시료로부터 피콜농도 구배법(Ficoll gradient)에 의해 버피코트(buffy coat)층을 분리 및 수득하여 혈장 및 적혈구를 제거하는 단계;(c) 상기 (b)단계에서 수득된 혈액을 3차원 배양시키는 단계; 및(d) 상기 배양된 시료로부터 혈중암세포(circulating tumor cells: CTC)를 분리하는 단계를 포함하는, 혈중암세포의 분리 및 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 (c)단계의 배양은 EGF(epidermal growth factor), 인슐린(insulin), 하이드로코르티손(hydrocortisone), 에탄올아민(ethanolamine), 포스포에탄올아민(phosphoethanolamine), BPE(bovine pituitary extract), 트랜스페린(transferrin), 트리요오드티로닌(triiodothyronine), 아셀렌산나트륨(sodium selenite) 및 FBS(fetal bovine serum)으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상을 포함하는 배지에 의한 것인, 혈중암세포의 분리 및 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 (c)단계의 배양은 세포부착억제 배양용기에 1x101 내지 1x108 cells/200ul의 밀도로 파종하여 배양하는 것인, 혈중암세포의 분리 및 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 (c)단계의 배양은 30 내지 40℃의 온도, 1 내지 10% CO2 조건에서 1일 내지 21일간 배양하는 것인, 혈중암세포의 분리 및 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 (c)단계의 배양은 단핵구세포(PBMC) 수의 감소 대비 혈중암세포의 수의 증가에 따라 3차원 배양된 배양액 내의 단핵구세포 대비 혈중암세포의 비율이 증가하게 되는 것인, 혈중암세포의 분리 및 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 (d)단계의 혈중암세포의 분리는 혈중암세포의 표면 마커에 의한 것인, 혈중암세포의 분리 및 배양방법
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제6항에 있어서, 상기 마커는 상피마커(epithelial markers), 간엽마커 (mesenchymal markers), be-ta-catenin, cadherin-11, GSK-3 beta, MMP2, SUMO2, Twist-1, ZEB1 및 CD45로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것인, 혈중암세포의 분리 및 배양방법
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제1항 내지 7항 중 어느 한 항의 방법에 의하여 분리 및 배양된 혈중암세포
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제8항의 분리 및 배양된 혈중암세포를 분석하는 단계를 포함하는, 폐암의 진단을 위한 정보의 제공방법
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제9항에 있어서, 상기 혈중암세포의 분석은 CTC의 수준; 및 eCTC (epithelial CTC), emCTC (epithelial/mesenchymal CTC) 또는 mCTC (mesenchymal CTC)의 수준을 측정하는 방법에 의한 것인, 폐암의 진단을 위한 정보의 제공방법
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제9항에 있어서, 상기 혈중암세포의 분석은 CTC, eCTC, emCTC, mCTC의 수준을 측정하는 방법에 추가적으로 CTC의 형태학적 분석을 포함하여 이루어지는 것인, 폐암의 진단을 위한 정보의 제공방법
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제9항에 있어서, 상기 폐암은 소세포폐암, 비소세포암 또는 혼합성 대소세포암인 것인, 폐암의 진단을 위한 정보의 제공방법
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제8항의 분리 및 배양된 혈중암세포를 분석하는 단계를 포함하는, 폐암의 재발 또는 전이를 예측하는 방법
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