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유전자 침묵 활성이 증가된 핵산 분자 및 이의 이용

  • 기술번호 : KST2022003249
  • 담당센터 : 인천기술혁신센터
  • 전화번호 : 032-420-3580
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 유전자 침묵 활성이 증가된 핵산 분자 및 이의 이용에 관한 것으로, 특정 위치에서 화학적으로 변형된 뉴클레오티드를 포함하는 이중가닥 핵산 분자 또는 방사형으로 핵산 분자는 효과적으로 타겟 유전자에 대한 유전자 침묵활성 및 생체 내 안정성이 증가된 것일 수 있다.
Int. CL C12N 15/113 (2010.01.01)
CPC C12N 15/1137(2013.01) C12N 2310/321(2013.01) C12N 2310/14(2013.01)
출원번호/일자 1020200179036 (2020.12.18)
출원인 이화여자대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-2379204-0000 (2022.03.22)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20220324) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.12.18)
심사청구항수 25

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이혁진 서울특별시 서초구
2 장보라 서울특별시 구
3 김현숙 서울특별시 양천구
4 장혜진 경상남도 창원시 의창구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 유미특허법인 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 서림빌딩 **층 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 서울특별시 서대문구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2020.12.18 수리 (Accepted) 1-1-2020-1383474-51
2 [우선심사신청]심사청구서·우선심사신청서
 2021.04.27 수리 (Accepted) 1-1-2021-0493687-82
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2021.05.17 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2021.06.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2021-0102617-52
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2021.06.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2021-0458432-38
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견서·답변서·소명서
 2021.07.30 수리 (Accepted) 1-1-2021-0886114-50
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2021.07.30 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2021-0886115-06
8 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2021.10.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2021-0852827-01
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견서·답변서·소명서
 2021.12.29 수리 (Accepted) 1-1-2021-1523820-31
10 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2021.12.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2021-1523821-87
11 등록결정서
Decision to grant		 2022.02.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2022-0148069-64
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
23 내지 30nt 길이의 센스 가닥 및 상기 센스 가닥에 상보적인 서열을 포함하는 25 내지 35nt 길이의 안티센스 가닥을 포함하고,상기 센스 가닥은 5’말단으로부터 1, 4, 5, 7, 및 14번째로 이루어진 군으로부터 선택된 4종 이상의 위치에 화학적으로 변형(chemical modification)된 뉴클레오티드를 포함하고,상기 센스 가닥은 5' 말단으로부터 9번째의 위치에 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드를 포함하고,상기 안티센스 가닥은 상기 센스 가닥의 5’ 말단으로부터 7번째 위치에 존재하는 뉴클레오티드와 상보적으로 결합하는 위치에, 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드를 포함하고,상기 안티센스 가닥은 상기 센스 가닥의 5' 말단으로부터 2, 3, 6, 8, 및 10 내지 13번째의 위치에 존재하는 뉴클레오티드와 상보적으로 결합하는 위치에 화학적으로 변형된 뉴클레오티드를 포함하는,이중가닥 핵산 분자
2 2
제 1항에 있어서, 상기 센스 가닥은 5’ 말단으로부터 1번째 위치에 화학적으로 변형된 뉴클레오티드를 포함하는 것인, 이중가닥 핵산 분자
3 3
제1항에 있어서, 상기 센스 가닥은 5’ 말단으로부터 1번째 위치에 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드를 포함하는 것인, 이중가닥 핵산 분자
4 4
제1항에 있어서, 상기 화학적으로 변형된 뉴클레오티드는 당의 잔기가 2'-O-메틸, 2'-메톡시에톡시, 2'-플루오로, 2'-알릴, 2'-O-[2-(메틸아미노)-2-옥소에틸], 4'-티오, 4'-CH2-O-2'-브리지(bridge), 4'-(CH2)2-O-2'-브리지, 2'-LNA, 2'-아미노, 및 2'-O-(N-메틸카르바메이트)(methlycarbamate)로 구성된 그룹으로부터 선택되는 1종 이상으로 변형된 것인, 이중가닥 핵산 분자
5 5
제 1항에 있어서, 상기 센스 가닥은 5’말단으로부터 2, 3, 6, 8 내지 13, 및 15 내지 30번째로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 위치에, 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드를 포함하는 것인, 이중가닥 핵산 분자
6 6
제1항에 있어서, 상기 안티센스 가닥은 상기 센스 가닥의 5’ 말단으로부터 1, 4, 5, 9, 및 14 내지 30번째로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 위치에 존재하는 뉴클레오티드와 상보적으로 결합하는 위치에, 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드를 포함하는 것인, 이중가닥 핵산 분자
7 7
제1항에 있어서, 다이서(dicer)에 의해 내생적으로 절단될 수 있는 것인, 이중가닥 핵산 분자
8 8
제1항에 있어서, 상기 센스 가닥의 3’말단 및 상기 안티센스 가닥의 5’ 말단은 블런트 말단(blunt end)를 형성하는, 이중가닥 핵산 분자
9 9
제1항에 있어서, 상기 센스 가닥 또는 상기 안티센스 가닥의 3’ 말단, 5’ 말단, 또는 양쪽 말단에 1 내지 5 nt 길이의 돌출부(overhang)를 갖는 것인, 이중가닥 핵산 분자
10 10
제9항에 있어서, 상기 돌출부(overhang)에 존재하는 뉴클레오티드는 화학적으로 변형되지 않은 것인, 이중가닥 핵산 분자
11 11
제1항에 있어서, 상기 이중가닥 핵산 분자는 단일 가닥 뉴클레오티드가 헤어핀(hairpin)을 형성한 것인, 이중가닥 핵산 분자
12 12
제 1 항에 있어서, 상기 안티센스 가닥은 타겟 유전자의 전체 또는 일부의 서열과 상보적인 서열을 포함하는 것인, 이중가닥 핵산 분자
13 13
제12항에 있어서, 상기 타겟 유전자의 발현을 조절하는, 이중가닥 핵산 분자
14 14
제 12 항에 있어서, 상기 타겟 유전자는 단백질 코딩 유전자, 원종양유전자, 종양유전자, 종양 억제인자 유전자, 및 세포 신호전달 유전자에서 선택되는 것인, 이중가닥 핵산 분자
15 15
제1항에 있어서, 상기 센스 가닥의 3’말단에 1 내지 30nt의 폴리뉴클레오티드를 추가적으로 포함하고, 상기 안티센스 가닥의 5’말단에 1 내지 30nt의 폴리뉴클레오티드를 추가적으로 포함하는, 이중가닥 핵산분자
16 16
제15항에 있어서,상기 센스가닥의 3’말단에서 연장된 폴리뉴클레오티드와 상기 안티센스 가닥의 5’에서 연장된 폴리뉴클레오티드는 서로 상보적으로 결합하지 않는 것인, 이중가닥 핵산 분자
17 17
제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 이중가닥 핵산 분자를 2 내지 4개 포함하는, 방사형 핵산 분자
18 18
제17항에 있어서, 상기 이중가닥 핵산 분자를 2개 포함하고,제1 이중가닥 핵산 분자의 센스 가닥의 3’말단과 제2 이중가닥 핵산 분자의 안티센스 가닥의 5’말단이 연결되거나,제1 이중가닥 핵산 분자의 안티센스 가닥의 5’말단과 제2 이중가닥 핵산 분자의 센스 가닥의 3’말단이 연결되거나, 이의 조합인, 방사형 핵산 분자
19 19
제17항에 있어서, 상기 이중가닥 핵산 분자를 3개 포함하고, 하기 (i) 내지 (iii)으로 이루어지는 군에서 선택된 2종 이상의 특징을 포함하는 것인, 방사형 핵산 분자:(i) 제1 이중가닥 핵산 분자의 센스 가닥의 3’말단과 제2 이중가닥 핵산 분자의 안티센스 가닥의 5’말단이 연결;(ii) 제1 이중가닥 핵산 분자의 안티센스 가닥의 5’말단과 제3 이중가닥 핵산 분자의 센스 가닥의 3’말단이 연결; 및(iii) 제2 이중가닥 핵산 분자의 센스 가닥의 3’말단과 제3 이중가닥 핵산 분자의 안티센스 가닥의 5’말단이 연결
20 20
제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 이중가닥 핵산 분자; 상기 이중가닥 핵산 분자를 2 내지 4개 포함하는 방사형 핵산 분자; 또는 이의 조합을 포함하는, 유전자 발현 억제용 조성물
21 21
제20항에 있어서, 상기 유전자는 단백질 코딩 유전자, 원종양유전자, 종양유전자, 종양 억제인자 유전자, 및 세포 신호전달 유전자에서 선택되는 것인, 유전자 발현 억제용 조성물
22 22
(1) 제n 타겟 유전자의 전체 또는 일부와 동일한 서열을 포함하는 23 내지 30nt 길이의 센스 영역((n-S) 영역), 제 m 타겟 유전자의 전체 또는 일부와 상보적인 서열을 포함하는 25 내지 35nt 길이의 안티센스 영역((m-AS) 영역), 또는 이의 조합을 포함하는 폴리뉴클레오티드 가닥을 x개 합성하는 단계로서, 상기 (n-S) 영역은 5’말단으로부터 1, 4, 5, 7, 및 14번째로 이루어진 군으로부터 선택된 4종 이상의 위치에 화학적으로 변형된 뉴클레오티드를 포함하고,상기 (n-S) 영역은 5' 말단으로부터 9번째의 위치에 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드를 포함하고,상기 (m-AS) 영역은 다른 폴리뉴클레오티드 가닥의 센스 영역 (m-S)과 상보적으로 결합하고,상기 (m-AS) 영역은 상기 (m-S) 영역의 5’ 말단으로부터 7번째 위치에 존재하는 뉴클레오티드와 상보적으로 결합하는 위치에, 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드를 포함하고,상기 (m-AS) 영역은 상기 (m-S) 영역의 5' 말단으로부터 2, 3, 6, 8, 및 10 내지 13번째의 위치에 존재하는 뉴클레오티드와 상보적으로 결합하는 위치에 화학적으로 변형된 뉴클레오티드를 포함하고,상기 x는 1 내지 5에서 선택된 정수이고,상기 n과 m은 1 내지 5에서 선택된 정수인,x개의 폴리뉴클레오티드 가닥을 합성하는 단계; 및 (2) 상기 단계에서 제조한 x개의 폴리뉴클레오티드 가닥을 90 내지 100℃에서 1 내지 10℃로 온도를 감소시키는 조건에서 반응시켜 혼성화시키는 단계를 포함하는,증가된 생체 내 안정성을 갖는 핵산 분자의 제조방법
23 23
제22항에 있어서, 상기 (n-S) 영역은 5’ 말단으로부터 1번째 위치에 화학적으로 변형된 뉴클레오티드를 포함하는 것인, 제조방법
24 24
제22항에 있어서, 상기 (n-S) 영역은 5’ 말단으로부터 1번째 위치에 화학적으로 변형되지 않은 뉴클레오티드를 포함하는 것인, 제조방법
25 25
제22항에 있어서, 상기 화학적으로 변형된 뉴클레오티드는 당의 잔기가 2'-O-메틸, 2'-메톡시에톡시, 2'-플루오로, 2'-알릴, 2'-O-[2-(메틸아미노)-2-옥소에틸], 4'-티오, 4'-CH2-O-2'-브리지(bridge), 4'-(CH2)2-O-2'-브리지, 2'-LNA, 2'-아미노, 및 2'-O-(N-메틸카르바메이트)(methlycarbamate)로 구성된 그룹으로부터 선택되는 1종 이상으로 변형된 것인, 제조방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 이화여자대학교 집단연구지원(R＆D) 섬유화질환 제어 연구센터
2 과학기술정보통신부 이화여자대학교 바이오.의료기술개발(R＆D) 세포 표면 나노코팅 및 세포 내 소기관 강화 기술을 기반으로 한 차세대 베타세포 치료제 개발
3 과학기술정보통신부 이화여자대학교 개인기초연구(과기정통부)(R＆D) 기질 리보핵산 구조 연구를 통한 혁신적 유전자치료제 개발