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이온화 아텔로콜라겐 함유 수화젤을 이용하여 인슐린 생성세포의 분화 유도 방법으로서,(1) 인간 유도만능줄기세포(iPSC)를 액티빈 A(activin A), CHIR99021 및 Y-27632를 포함하는 배지에 배양하여 내배엽(definitive endoderm)으로 분화를 유도하는 단계;(2) 상기 (1) 단계에서 분화가 유도된 내배엽을 B27, 돌소몰핀(Dorsomorphin), 레티논산(Retinoic acid), SB431542, 및 SANT1을 포함하는 배지에 배양하여 췌장 전구세포(pancreatic progenitor cell)로 분화를 유도하는 단계; 및(3) 상기 (2) 단계에서 분화가 유도된 췌장 전구세포를 B27, 덱사메타손(dexamethasone), 니코틴아미드(nicotinamide), 포스콜린(forskolin) 및 Exendin-4를 포함하는 이온화 아텔로콜라겐 함유 수화젤에 봉입하여 배양하여 췌장 내분비 세포(pancreatic endocrine cell)로 분화를 유도하는 단계;를 포함하는 인슐린 생성세포의 분화 유도 방법
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제1항에 있어서, 상기 배지는 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium), MEM(Minimal Essential Medium), 임프루브드 MEM(improved MEM), BME(Basal Medium Eagle), RPMI 1640(Roswell Park Memorial Institute medium 1640), 어드밴스드 RPMI 1640(Advanced RPMI1640), F-10, F-12, DMEM-F12, α -MEM(α -Minimal Essential Medium), G-MEM(Glasgow's Minimal Essential Medium) 및 IMDM(Iscove's Modified Dulbecco's Medium)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 인슐린 생성세포의 분화 유도 방법
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제1항에 있어서, 상기 (1) 단계는 인간 유도만능줄기세포(iPSC)를 10 ~ 400 ng/mL 액티빈 A(activin A), 1 ~ 5 μM CHIR99021, 및 5 ~ 50 μM Y-27632이 포함된 배지에서 배양하여 내배엽으로 분화를 유도하고,상기 (2) 단계는 내배엽을 1 ~ 5% B27, 1 ~ 10 μM 돌소몰핀(Dorsomorphin), 1 ~ 5 μM 레티논산(Retinoic acid), 2 ~ 20 μM SB431542, 및 0
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제1항에 있어서, 상기 (3) 단계는,(3-1) 분화가 유도된 췌장 전구세포를 오목한 마이크로웰(concave micro-well)에서 B27, 덱사메타손(dexamethasone), 니코틴아미드(nicotinamide), 포스콜린(forskolin) 및 Exendin-4를 포함하는 배지에 배양하여 췌장 전구세포(pancreatic progenitor cell)의 세포 구상체(spheroid)를 제조하는 단계; 및(3-2) 상기 (3-1) 단계에서 제조된 세포 구상체(spheroid)를 B27, 덱사메타손(dexamethasone), 니코틴아미드(nicotinamide), 및 Exendin-4를 포함하는 이온화 아텔로콜라겐 함유 수화젤에 봉입하여 배양하는 단계;를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 인슐린 생성세포의 분화 유도 방법
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제1항에 있어서, 상기 이온화 아텔로콜라겐 함유 수화젤은 양이온화 아텔로콜라겐을 0
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제1항에 있어서, 상기 이온화 아텔로콜라겐 함유 수화젤은 전단율(shear rate) 1 s-1에서 1 Pa
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제1항에 있어서, 상기 이온화 아텔로콜라겐 함유 수화젤은 나노섬유 네트워크(nanofibrous network)를 형성하는 것을 특징으로 하는 인슐린 생성세포의 분화 유도 방법
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제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 인슐린 생성세포의 분화 유도 방법에 따라 제조된 인슐린 생성세포
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제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 인슐린 생성세포의 분화 유도 방법에 따라 제조된 인슐린 생성세포를 포함하는 인공 췌장
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