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1)베체트병(Bechet’s disease, BD) 환자 유래 유도만능 줄기세포(induced pluripotent stem cell; iPSC)를 배아체(Embryoid body)형성 및 배엽으로 분화 시키는 단계; 및2)상기 배아체의 신경 외배엽을 신경상피(Neuroepithelium)로 유도 및 뇌 오가노이드로 유도하는 단계;를 포함하는 베체트병 질환 모델의 제조방법
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제 1항에 있어서, 상기 베체트병 질환은 신경 베체트병 질환인 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 유도만능 줄기세포은 OCT4, SOX2, KLF4 및 c-MYC 유전자를 포함하는 센다이 바이러스를 도입하여 제조된 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 제 2)단계는 배아체의 신경 외배엽을 마트리겔에 삽입하여 신경 유도 배양액으로 배양하는 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 제1)단계는 DMEM/F12 및 FGF(fibroblast growth factor)가 포함된 배양액 1에서 배양하는 것인, 방법
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제 5항에 있어서, 상기 배양은 6 내지 10일 동안 2일에 한번 배양액을 교체하는 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 제2)단계의 신경상피로 유도는 비타민이 포함되지 않은 배양액에서 배양하는 것인, 방법
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제 7항에 있어서, 상기 제2)단계의 신경상피 유도 후, 뇌조직의 성장(growth) 및 팽창(expantion)을 위하여 비타민이 포함된 배양액에서 배양하는 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 베체트병 질환 모델은 (1)OCT4 마커가 발현되지 않고, (2)신경마커인 vGLUT 및 MAP2가 발현되고, (3)성상세포 마커인 GFAP가 발현되며; 및(4)염증 마커인 TNF-알파, IL-1β 및 IL-6의 발현이 증가된 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 환자 유래 유도만능 줄기세포는 베체트 병 환자의 피부세포로부터 분화시킨 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 모델은 뇌 오가노이드인 것인, 방법
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제 1항 내지 제 11항의 방법 중 어느 하나의 방법으로 제조된 베체트병 질환 모델
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제 12항에 있어서, 상기 베체트병 질환 모델은,(1)OCT4 마커가 발현되지 않고, (2)신경마커인 vGLUT 및 MAP2가 발현되고, (3)성상세포 마커인 GFAP가 발현되며; 및(4)염증 마커인 TNF-알파, IL-1β 및 IL-6의 발현이 증가된 것인, 방법
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제 12항의 베체트병 질환 모델에 후보물질을 처리하는 단계; 및상기 후보 물질이 처리된 질환 모델에서 TNF-알파, IL-1β 및 IL-6의 단백질 또는 이의 유전자의 mRNA 발현 수준을 측정하는 단계;를 포함하는 베체트병 치료약물의 스크리닝 방법
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제 14항에 있어서, TNF-알파, IL-1β 및 IL-6의 단백질 또는 이의 유전자의 mRNA 발현 수준이 후보 물질이 처리되지 않은 모델과 비교하여, 발현양이 감소하는 경우, 후보물질이 베체트병 치료제로 판정하는 단계;를 더 포함하는, 방법
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