1 |
1
기준 염기 서열 또는 상기 기준 염기 서열과 다른 변이 염기 서열을 갖는 DNA를 포함하는 샘플을 준비하는 단계;상기 기준 염기 서열에 상보 결합하는 염기 서열을 갖는 기준 PNA를 준비하는 단계;상기 변이 염기 서열과 상보 결합하는 염기 서열을 갖는 기준 R-FP(RNA forward primer)를 준비하는 단계; 및상기 샘플에 상기 기준 PNA, 상기 기준 R-FP, 및 RNase 효소를 제공하는 단계를 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출 방법
|
2 |
2
제1 항에 있어서, 상기 샘플은 상기 변이 염기 서열을 갖는 타겟 DNA를 포함하고, 상기 기준 PNA는 상기 변이 염기 서열을 갖는 상기 타겟 DNA와 비상보 결합하고, 상기 기준 R-FP에 의해, 비상보 결합된 상기 기준 PNA와 상기 타겟 DNA는 분리된 후, 상기 기준 R-FP와 상기 타겟 DNA가 상보 결합하고, 상기 RNase 효소에 의해, 상기 타겟 DNA의 상기 변이 염기 서열의 변이 염기에 대응하는 상기 기준 R-FP의 염기가 절단되어 분리된 후, 상기 타겟 DNA가 중합효소 연쇄반응으로 복제되는 것을 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출 방법
|
3 |
3
제2 항에 있어서, 상기 타겟 DNA는 64
|
4 |
4
제1 항에 있어서, 상기 샘플은 상기 기준 염기 서열을 갖는 비타겟 DNA를 포함하고, 상기 기준 PNA는 상기 기준 염기 서열을 갖는 상기 비타겟 DNA와 상보 결합하여, 상기 기준 R-FP에 의해 상보 결합된 상기 기준 PNA 및 상기 비타겟 DNA가 분리되지 않는 것을 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출 방법
|
5 |
5
제1 항에 있어서, 상기 비타겟 DNA는, 상기 RNase 효소에 의한 중합효소 연쇄반응이 발생하지 않는 것을 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출 방법
|
6 |
6
제1 항에 있어서, 상기 기준 PNA는 12 bp의 길이를 갖는 것을 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출 방법
|
7 |
7
제1 항에 있어서, 상기 샘플, 상기 기준, PNA, 상기 기준 R-FP, 및 상기 RNase 효소는 BP(backward primer)와 함께 순수에 혼합되는 것을 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출 방법
|
8 |
8
제1 항에 있어서, 상기 RNase 효소는 RNase H2 효소인 것을 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출 방법
|
9 |
9
제1 항에 따른 상기 단일 연기 서열 변이 검출 방법을 이용한 혈중 순환 암의 검출 방법
|
10 |
10
기준 PNA, 기준 R-FP, 및 RNase 효소를 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출용 시약에 있어서, 상기 기준 PNA는 기준 염기 서열에 상보 결합하는 염기 서열을 갖고, 상기 기준 R-FP는 상기 기준 염기 서열과 다른 변이 염기 서열에 상보 결합하는 염기 서열을 갖고, 상기 시약에 상기 변이 염기 서열을 갖는 타겟 DNA를 포함하는 샘플이 주입되는 경우, 상기 기준 PNA는 상기 변이 염기 서열을 갖는 상기 타겟 DNA와 비상보 결합하고, 상기 기준 R-FP에 의해, 비상보 결합된 상기 기준 PNA와 상기 타겟 DNA는 분리된 후, 상기 기준 R-FP와 상기 기준 DNA가 상보 결합하고, 상기 RNase 효소에 의해, 상기 타겟 DNA의 상기 변이 염기 서열의 변이 염기에 대응하는 상기 기준 R-FP의 염기가 절단되어 분리된 후, 상기 타겟 DNA가 중합효소 연쇄반응으로 복제되는 것을 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출용 시약
|
11 |
11
제1 항에 있어서, 상기 샘플이 주입된 상기 시약을 64
|
12 |
12
제1 항에 있어서, 상기 단일 염기 서열 변이 검출용 시약은, 상기 기준 R-FP 및 상기 기준 PNA를 포함하는 제1 베이스 시약, 및 상기 RNase 효소를 포함하는 제2 베이스 시약으로 분리되어 보관되고, 단일 염기 서열 변이 검출을 위한 사용 과정에서 상기 제1 베이스 시약 및 상기 제2 베이스 시약을 혼합하여 제조되는 것을 포함하는 단일 염기 서열 변이 검출용 시약
|