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(A) 미분화 줄기 세포에 신경 계통 세포에서 특이적으로 발현되는 마커 유전자를 형질전환하는 단계;(B) 3차원 배양하여 세포 응집체를 형성하는 단계;(C) 마커 유전자를 발현하는 세포 응집체를 선별하는 단계; 및(D) 선별한 세포 응집체를 2차원 배양하는 단계를 포함하는 신경줄기세포(neural stem cells, NSC)를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 줄기세포는 만능 줄기 세포(Pluripotent stem cells, PSCs)인, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 줄기세포는 배아 줄기세포(Embryonic Stem Cell, ESC), 유도만능줄기세포(induced pluripotent stem cells, iPSCs), 배아 생식세포, 배아 종양세포 및 성체 줄기세포로 이루어진 군으로부터 선택되는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 마커 유전자는 Sox1(Sry-related-HMG box 1), Olig2 및 Sox2로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 마커 유전자에 검출가능한 표지를 추가로 포함하는 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 5항에 있어서, 검출가능한 표지는 형광 표지, 프로브, 발광성 물질(luminescent material), 광색성 화합물, 단백질성 형광 표지, 자기 표지, 방사성표지, 택(tag) 및 합텐으로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 3차원 배양은 세포가 하이드로겔 내부에서 배양되는 것인, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 7항에 있어서, 하이드로겔은 세포 외 기질 물질 또는 세포 외 기질 유사 물질을 포함하는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 8항에 있어서, 세포 외 기질 유사 물질은 젤라틴, 폴리에틸렌글라이콜, 콜라겐, 알지네이트, 키토산, 히알루론산, 덱스트란, 피브린, 셀룰로스, 피브로인, 피브로넥틴, 라미닌, 코드로이틴 설페이트, 마트리젤(matrigel) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 7항에 있어서, 3차원 배양은:(a) 마커 유전자를 형질전환한 미분화 줄기 세포를 단일 세포로 분리하는 단계;(b) 분리한 단일세포와 하이드로겔을 혼합한 뒤 경화시키는 단계; 및(c) 만능 줄기 세포 배지로 배양하는 단계를 포함하는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 10항에 있어서, 졸-겔 상변이를 통해 경화되는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 세포 응집체는 초기 신경계 세포로 분화된 세포의 응집체인, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 3차원 배양은 8 내지 14일 동안 수행되는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 2차원 배양은 세포 응집체를 하이드로겔 표면 상에서 배양하는 것인, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 2차원 배양은 3 내지 7일 동안 수행되는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 2차원 배양은 신경줄기세포 증식(expand) 배지로 배양하는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 단계 (D)에서 2차원 배양하여 증식된(expanded) 세포 응집체를 단일 세포로 분리하여 계대배양하는 단계를 추가로 포함하는, 신경줄기세포를 제조하는 방법
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제 1항의 방법으로 제조된 신경줄기세포
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제 18항에 있어서, Nestin, Sox2, N-Cadherin 또는 Musashi를 발현하는, 신경줄기세포
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제 18항에 있어서, 신경세포, 성상교세포 및 희돌기교세포로 분화 가능한, 신경줄기세포
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제 18항의 신경줄기세포를 유효성분으로 포함하는 척수손상 치료용 조성물
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제 18항의 신경줄기세포를 유효성분으로 포함하는 퇴행성 신경질환 치료용 조성물
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