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지질다당류(lipopolysaccharide: LPS)에 의한 카스파제(caspase) 활성 저해제를 스크리닝하는 방법으로서,형광물질로 표지된 카스파제 CARD(caspase activation and recruitment domain) 도메인을 포함하는 폴리펩티드, 지질다당류(lipopolysaccharide: LPS), 및 피검물질을 포함하는 혼합물을 인큐베이션하는 단계;혼합물의 형광 편광(Fluorescence polarization: FP) 값을 측정하는 단계; 및측정된 형광 편광 값이 피검물질을 처리하지 않은 음성 대조군에 비해 감소한 경우, 피검물질을 CARD와 LPS의 결합 저해제로 선별하는 단계를 포함하는 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 카스파제는 카스파제-1, 카스파제-2, 카스파제-4, 카스파제-5, 카스파제-9, 카스파제-11, 카스파제-12, 카스파제-13, 및 카스파제-14로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 방법
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청구항 1에 있어서, CARD 도메인은 시스테인(cysteine: Cys)이 삽입된 CARD 변이체인 것인 방법
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청구항 3에 있어서, 시스테인이 CARD 도메인의 N-말단에 삽입된 것인 방법
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청구항 3에 있어서, 시스테인이 펩티드 태그의 C-말단 및 CARD 도메인의 N-말단에 삽입된 것인 방법
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청구항 3에 있어서, 형광물질은 시스테인을 통해 접합된 것인 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 혼합물은 BSA(bovine serum albumin), 계면활성제, 2가 양이온, 또는 이들의 조합을 포함하지 않는 것인 방법
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8
청구항 1에 있어서, 상기 혼합물의 pH는 5
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청구항 1에 있어서, 혼합물을 인큐베이션하는 단계는 0℃ 내지 40℃에서 수행되는 것인 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 혼합물은 0%(w/v) 내지 10%(w/v)의 디메틸 술폭시드(Dimethyl sulfoxid: DMSO)를 포함하는 것인 방법
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청구항 1에 있어서, 측정된 형광 편광 값으로부터 CARD 도메인과 LPS의 결합 저해율을 산출하는 단계를 더 포함하는 것인 방법
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청구항 1에 있어서, 상기 방법은카스파제를 발현하는 세포에 LPS 및 피검물질을 가하는 단계;세포의 카스파제 활성을 측정하는 단계; 및측정된 카스파제 활성이 피검물질을 처리하지 않은 음성 대조군에 비해 감소하는 경우, LPS에 의한 카스파제 활성 저해제로 선별하는 단계를 더 포함하는 것인 방법
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염증성 질환 또는 패혈증의 치료제를 스크리닝하는 방법으로서,형광물질로 표지된 카스파제 CARD(caspase activation and recruitment domain) 도메인을 포함하는 폴리펩티드, 지질다당류(lipopolysaccharide: LPS), 및 피검물질을 포함하는 혼합물을 인큐베이션하는 단계;혼합물의 형광 편광(Fluorescence polarization: FP) 값을 측정하는 단계; 및측정된 형광 편광 값이 피검물질을 처리하지 않은 음성 대조군에 비해 감소한 경우, 피검물질을 염증성 질환 또는 패혈증의 치료제 후보물질로 선별하는 단계를 포함하는 방법
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청구항 13에 있어서, 염증성 질환은 염증성 장질환, 다발성 경화증, 근위축성 측삭 경화증, 파킨슨병, 및 류마티스 관절염으로부터 선택된 것인 방법
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염증성 질환 또는 패혈증의 치료제의 모니터링 방법으로서,염증성 질환 또는 패혈증 환자 시료에 형광물질로 표지된 카스파제 CARD(caspase activation and recruitment domain) 도메인을 포함하는 폴리펩티드 및 염증성 질환 또는 패혈증 치료제를 처리하는 단계;상기 혼합물의 형광 편광(Fluorescence polarization: FP) 값을 측정하는 단계를 포함하는 방법
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형광물질로 표지된 카스파제 CARD(caspase activation and recruitment domain) 도메인을 포함하는 폴리펩티드를 포함하는, 지질다당류(lipopolysaccharide: LPS)에 의한 카스파제(caspase) 활성 저해제의 스크리닝용 조성물
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청구항 16에 있어서, CARD 도메인은 시스테인(cysteine: Cys)이 삽입된 CARD 변이체인 것인 방법
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청구항 17에 있어서, 시스테인이 CARD 도메인의 N-말단; 펩티드 태그의 C-말단 및 CARD 도메인의 N-말단; 또는 CARD 도메인의 C-말단에 삽입된 것인 방법
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청구항 17에 있어서, 시스테인이 펩티드 태그의 C-말단 및 CARD 도메인의 N-말단에 삽입된 것인 방법
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청구항 16에 있어서, 형광물질은 시스테인을 통해 접합된 것인 방법
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