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세포를 배양 기질에서 배양하는 단계; 및상기 배양된 세포의 배양 형상을 확인하는 단계;를 포함하는 장 오가노이드(intestinal organoid) 제작 방법
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제 1항에 있어서,상기 세포는 정상인 또는 환자 유래의 세포인 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 세포는 유도만능 줄기세포 또는 장 상피세포인 것인, 방법
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제 3항에 있어서, 상기 유도만능 줄기세포는, 정상인 또는 환자의 PBMC(peripheral blood mononuclear cell)로부터 분화된 것인, 방법
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제 1항에 있어서,상기 배양 형상은, Villus, Crypts, Spheroid, Duct 및 Acinar로 이루어진 군에서 선택된 것인, 방법
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제 1항에 있어서, 상기 배양 기질은 마트리겔(Matrigel) 및 K-SFM 혼합 기질인 것인, 방법
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제 6항에 있어서, 상기 마트리겔 및 K-SFM은 2 : 1의 중량비로 혼합되는 것인, 방법
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제 1항에 있어서,상기 배양 기질은 상피세포 성장 인자(Epidermal Growth Factor), 소 뇌하수체 추출물(Bovine pituitary extract), 염화 칼슘(Calcium chloride), R-Spondin1, Noggin, DMEM/F12, L-glutamin, Hepes, N2 supplement, B27 supplement 및 Pen/Strep으로 이루어진 군에서 선택된 인자를 더 포함하는 것인 방법
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제 1항에 있어서,상기 장 오가노이드는, 장세포 특이적 마커인 CGA, CDX2, LYZ, ECAD, KLF5 및 MUC2로 이루어진 군에서 선택된 마커를 발현하는 것인, 방법
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제 1항에 있어서,상기 장 오가노이드는, 장세포 특이적 단백질인 Ki67, VIL, LGR5, SOX9, VIM 및 SMA로 이루어진 군에서 선택된 단백질을 발현하는 것인, 방법
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제 1항의 방법으로 제작된 마이크로바이옴 기능 평가용 장 오가노이드(intestinal organoid)
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1) 세포를 배양 기질에서 배양하여 장 오가노이드(intestinal organoid)를 제작하는 단계;2) 상기 제작된 장 오가노이드에, 후보 마이크로바이옴을 처리하는 단계; 및3) 후보 마이크로바이옴이 처리된 장 오가노이드의 반응성을 평가하는 단계;를 포함하는, 마이크로바이옴 균주 스크리닝 방법
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제 12항에 있어서,상기 세포는 정상인 또는 환자 유래의 세포인 것인, 방법
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제 12항에 있어서, 상기 세포는 유도만능 줄기세포 또는 장 상피세포인 것인, 방법
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제 14항에 있어서, 상기 유도만능 줄기세포는, 정상인 또는 환자 유래의 PBMC(peripheral blood mononuclear cell)로부터 분화된 것인, 방법
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제 12항에 있어서,상기 마이크로바이옴은, 장 오가노이드의 증식을 촉진시키는 것인, 방법
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제 16항에 있어서,상기 장 오가노이드의 증식은, 장 오가노이드의 Crypt 구조로의 증식 또는 villus 형상으로의 분화를 촉진시키는 것인, 방법
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제 12항에 있어서,상기 마이크로바이옴은, 장 오가노이드의 기능을 조절하는 것인, 방법
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제 18항에 있어서,상기 장 오가노이드의 기능 조절은, 항염증성 사이토카인인 IL-10의 발현을 증가시키는 것인, 방법
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제 18항에 있어서,상기 장 오가노이드의 기능 조절은 췌장 분화 조절 단백질인 REG3A의 발현을 증가시키는 것인, 방법
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제 12항에 있어서,상기 마이크로바이옴은, 장보호 효과를 가지는 것인, 방법
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제 21항에 있어서,상기 장보호 효과는 라이소자임(Lysozyme), E-cadherin 또는 크로모그레닌 A(Chromogranin A)의 발현을 증가시키는 것인, 방법
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1) 세포를 배양 기질에서 배양하여 장 오가노이드(intestinal organoid)를 제작하는 단계;2) 상기 제작된 장 오가노이드에, 후보 마이크로바이옴을 처리하는 단계; 및3) 후보 마이크로바이옴이 처리된 장 오가노이드의 반응성을 평가하는 단계;를 포함하는, 마이크로바이옴의 기능 평가 방법
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제 23항에 있어서,상기 세포는 정상인 또는 환자 유래의 세포인 것인, 방법
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