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서열번호 10으로 표시되는 아미노산 서열 중 85번째 아미노산인 알라닌(alanine, A)이 다른 아미노산으로 치환된 CRP 변이체
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제1항에 있어서,상기 85번째 아미노산이 세린(serine, S)으로 치환된 것인, CRP 변이체
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서열번호 12로 표시되는 아미노산 서열 중 247번째 아미노산인 알라닌(alanine, A)이 다른 아미노산으로 치환된 transaldolase B 변이체
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제3항에 있어서,상기 247번째 아미노산이 발린(valine, V)으로 치환된 것인, transaldolase B 변이체
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5
i) pfkA 및 pfkB 유전자가 결실되고,ii) gntR 유전자가 돌연변이되거나; 또는 edd 및 eda 유전자가 도입되며,iii) galR 유전자가 돌연변이되거나; 또는 galP 유전자가 도입된, 형질전환 대장균
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6
제5항에 있어서,상기 gntR 유전자 돌연변이는 서열번호 3으로 표시되는 염기서열 중 422번째 염기인 사이토신(cytosine)이 아데닌(adenine)으로 치환된 것인, 형질전환 대장균
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7
제5항에 있어서,상기 galR 유전자 돌연변이는 서열번호 6으로 표시되는 염기서열 중 812번째 염기인 구아닌(guanin)이 아데닌(adenine)으로 치환된 것인, 형질전환 대장균
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8
제5항에 있어서,상기 형질전환 대장균은 ugd-gnd-wbbl-2, ptsG, crp, talB 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 유전자가 추가적으로 돌연변이된 것인, 형질전환 대장균
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9
제8항에 있어서,상기 ugd-gnd-wbbl-2 유전자 돌연변이는 ugd-gnd-wbbl-2 유전자가 결실된 것인, 형질전환 대장균
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10
제8항에 있어서, 상기 ptsG 유전자 돌연변이는 ptsG 유전자가 결실되거나, 외래 유전자가 삽입된 것인, 형질전환 대장균
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11
제10항에 있어서, 상기 외래 유전자가 삽입된 ptsG 유전자 돌연변이는 서열번호 14로 표시되는 염기서열을 포함하는 것인, 형질전환 대장균
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12
제8항에 있어서,상기 crp 유전자 돌연변이는 서열번호 9로 표시되는 염기서열 중 253번째 염기인 구아닌(guanin)이 티민(thymine)으로 치환된 것인, 형질전환 대장균
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13
제8항에 있어서,상기 talB 유전자 돌연변이는 서열번호 11으로 표시되는 염기서열 중 740번째 염기인 사이토신(cytosine)이 티민(thymine)으로 치환된 것인, 형질전환 대장균
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제5항의 형질전환 대장균에 accDABC 유전자 및 mcrC 및 mcrN 유전자가 도입된, 3-히드록시프로피온산을 생산하는 형질전환 대장균
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15
i) 제5항의 형질전환 대장균에 accDABC 유전자를 포함하는 발현벡터, mcrC 및 mcrN 유전자를 포함하는 발현벡터 및 IPTG-유도성 프로모터, gnd 및 gntR 유전자를 포함하는 발현벡터를 삽입시키는 단계; ii) 상기 형질전환 대장균을 배양하는 단계;iii) 테트라사이클린 및 IPTG를 처리한 후, 상기 형질전환 대장균 배양하는 단계; 및 iv) 상기 형질전환 대장균으로부터 생산되는 3-히드록시프로피온산을 수득하는 단계를 포함하는, 3-히드록시프로피온산의 생산방법
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제15항에 있어서,상기 배양은 글루코스 존재 하에 형질전환 대장균을 배양하는 것을 특징으로 하는 것인, 3-히드록시프로피온산의 생산방법
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17
제5항의 형질전환 대장균에 crtE, crtI, crtB 및 ipiHp1 유전자가 도입된, 라이코펜을 생산하는 형질전환 대장균
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i) 제5항의 형질전환 대장균에 crtE, crtI, crtB 및 ipiHp1 유전자를 포함하는 발현벡터를 삽입시키는 단계; ii) 상기 형질전환 대장균을 배양하는 단계;iii) IPTG를 처리한 후, 상기 형질전환 대장균 배양하는 단계; 및 iv) 상기 형질전환 대장균으로부터 생산되는 라이코펜을 수득하는 단계를 포함하는, 라이코펜의 생산방법
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제18항에 있어서, 상기 라이코펜의 생산방법은 i) 단계에서 gnd 및 gntR 유전자를 포함하는 발현벡터를 삽입시키는 단계를 추가적으로 더 포함하는 것인, 라이코펜의 생산방법
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20
i) 야생형 대장균의 pfkA 및 pfkB 유전자를 결실시키는 단계; 및 ii) 상기 대장균을 글루코스 최소 배지에서 적어도 30회 이상 계대배양하는 단계를 포함하는, 야생형 대장균으로부터 엠덴-마이어호프-파르나스 경로(embden-meyerhof-parnas pathway)가 불활성화되고, 글루코스를 이용할 수 있는 진화된 대장균 균주를 제조하는 방법
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제20항에 있어서, 상기 글루코스 최소 배지가 2 mM MgSO4, 0
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제20항의 방법으로 제조된, 진화된 대장균 균주
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제22항의 진화된 대장균 균주에 accDABC 유전자 및 mcrC 및 mcrN 유전자가 도입된, 3-히드록시프로피온산을 생산하는 형질전환 대장균
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i) 제22항의 진화된 대장균 균주에 accDABC 유전자를 포함하는 발현벡터, mcrC 및 mcrN 유전자를 포함하는 발현벡터 및 IPTG-유도성 프로모터, gnd 및 gntR 유전자를 포함하는 발현벡터를 삽입시키는 단계; ii) 상기 형질전환된 대장균을 배양하는 단계;iii) 테트라사이클린 및 IPTG를 처리한 후, 상기 형질전환된 대장균을 배양하는 단계; 및 iv) 상기 형질전환된 대장균으로부터 생산되는 3-히드록시프로피온산을 수득하는 단계를 포함하는, 3-히드록시프로피온산의 생산방법
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제22항의 진화된 대장균 균주에 crtE, crtI, crtB 및 ipiHp1 유전자가 도입된, 라이코펜을 생산하는 형질전환 대장균
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i) 제22항의 진화된 대장균 균주에 crtE, crtI, crtB 및 ipiHp1 유전자를 포함하는 발현벡터를 삽입시키는 단계; ii) 상기 형질전환된 대장균을 배양하는 단계;iii) IPTG를 처리한 후, 상기 형질전환된 대장균을 배양하는 단계; 및 iv) 상기 형질전환된 대장균으로부터 생산되는 라이코펜을 수득하는 단계를 포함하는, 라이코펜의 생산방법
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제26항에 있어서, 상기 라이코펜의 생산방법은 i) 단계에서 gnd 및 gntR 유전자를 포함하는 발현벡터를 삽입시키는 단계를 추가적으로 더 포함하는 것인, 라이코펜의 생산방법
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