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반응성 및 안정성 그리고 항체회수가 향상된 Z-도메인 및 칼시퀘스트린 융합단백질을 코딩하는 핵산으로, 상기 칼시퀘스트린은 서열번호 5 또는 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는 것인, 핵산
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제1항에 있어서,상기 Z 도메인은 Z 도메인이 반복된 형태인 Zn (상기 n은 1 이상의 정수이다)을 포함하는 것을 특징으로 하는 것인, 핵산
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제2항에 있어서,상기 Z-도메인은 서열번호 13의 아미노산 서열로 이루어지고, 1개 내지 5개의 반복된 형태를 갖는 것을 특징을 하는 것인, 핵산
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제1항에 있어서,상기 Z 도메인은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 ZZ 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 Z6G 도메인 또는 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 ZL4G인 것을 특징으로 하는 것인, 핵산
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제1항에 있어서, 상기 Z 도메인과 칼시퀘스트린은 서열번호 7 내지 10으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 또는 그 이상의 아미노산 서열로 이루어진 링커(linker)를 통해 융합된 것을 특징으로 하는 것인, 핵산
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제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 핵산을 포함하는 재조합 발현 벡터
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7
제6항에 따른 재조합 발현 벡터로 형질전환된 형질전환체
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A) Z 도메인 및 칼시퀘스트린 융합단백질을 코딩하는 핵산을 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계;B) 상기 재조합 벡터를 숙주세포에 형질도입하여 형질전환체를 얻는 단계;C) 상기 형질전환체로부터 Z-칼시퀘스트린 단백질을 발현시키는 단계; 및D) 칼슘을 이용하여 상기 발현된 형질전환체로부터 Z-칼시퀘스트린 단백질 결합된 항체를 분리하는 단계를 포함하고, 상기 칼시퀘스트린은 서열번호 5 또는 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어지는 것을 특징으로 하는 것인, 반응성 및 안정성 그리고 항체회수가 향상된 항체의 분리 및 정제 방법
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제7항에 있어서,상기 Z 도메인은 Z 도메인이 반복된 형태인 Zn (상기 n은 1 이상의 정수이다)을 포함하는 것을 특징으로 하는 것인, 반응성 및 안정성 그리고 항체회수가 향상된 항체의 분리 및 정제 방법
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10
제8항에 있어서,상기 Z 도메인은 상기 Z 도메인은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 ZZ 도메인, 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 Z6G 도메인 또는 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 ZL4G인 것을 특징으로 하는 것인, 반응성 및 안정성 그리고 항체회수가 향상된 항체의 분리 및 정제 방법
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제8항에 있어서, 상기 Z 도메인과 칼시퀘스트린은 서열번호 7 내지 10으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 또는 그 이상의 아미노산 서열로 이루어진 링커(linker)를 통해 융합된 것을 특징으로 하는 것인, 반응성 및 안정성 그리고 항체회수가 향상된 항체의 분리 및 정제 방법
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제8항에 있어서, 상기 단계 (D)는 pH 3
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제8항에 있어서, 상기 (D) 칼슘을 이용하여 Z-칼시퀘스트린 단백질 결합된 항체를 분리하는 단계는:(d-1) 칼슘을 이용하여 Z-칼시퀘스트린 단백질에 결합된 항체를 침전시키는 단계; 및(d-2) 원심분리 또는 여과를 통해 침전물을 제거하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 것인, 반응성 및 안정성 그리고 항체회수가 향상된 항체의 분리 및 정제 방법
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