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1) 인간 전분화능 줄기세포(human pluripotent stem cell, hPSC)를 완전 내배엽 세포(definitive endoderm, DE)로 분화시키는 단계;2) 상기 단계 1)의 완전 내배엽 세포를 간 내배엽 세포(hepatic endoderm, HE)로 분화시키는 단계;3) 상기 단계 2)의 간 내배엽 세포를 간 내배엽 오가노이드(hepatic endoderm organoid, hHEO)로 분화시키는 단계;4) 상기 단계 3)의 간 내배엽 오가노이드를 철 이온을 포함하는 배지에서 간 오가노이드(hepatic organoid, hHO)로 분화시키는 단계; 를 포함하는, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 철 이온을 포함하는 배지는 구연산 철(ferric citrate, FC), 염화철(FeCl3), 황산철(Fe2SO4), 황산제이철(Fe2(SO4)3), 질산철(Fe(NO3)3) 및 펜타카보닐철(Fe(CO)5)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나를 포함하는 배지인 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 인간 전분화능 줄기세포는 인간 배아줄기세포(human embryonic stem cell, hESC) 또는 인간 유도 만능 줄기세포(induced pluripotent stem cell, iPSC)인, 간 오가노이드의 제조방법
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제2항에 있어서, 상기 구연산 철은 10 내지 30μM의 농도로 포함되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 3)의 간 내배엽 오가노이드는 물방울 형태(droplet) 또는 현탁 상태(suspension)인 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 3)의 분화는 발생 단계(generation stage) 및 확장 단계(expansion stage)로 이루어지는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제6항에 있어서, 상기 발생 단계는 R spondin-1, Noggin 및 EGF가 포함되지 않은 배지에서 배양되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제6항에 있어서, 상기 발생 단계는 10일 내지 18일 동안 수행되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제6항에 있어서, 상기 확장 단계는 R spondin-1 및 EGF가 포함되지 않은 배지에서 배양되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제6항에 있어서, 상기 확장 단계는 3일 내지 7일 동안 수행되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 3)의 분화는 13 내지 25일 동안 수행되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 4)의 간 오가노이드는 물방울 형태(droplet) 또는 현탁 상태(suspension)인 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 4)의 분화는 간 내배엽 오가노이드를 계대 배양하는 단계 및 간 내배엽 오가노이드를 간 오가노이드로 분화시키는 단계로 구성되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제13항에 있어서, 상기 간 내배엽 오가노이드를 계대 배양하는 단계는 R spondin-1 및 EGF가 포함되지 않은 배지에서 배양되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제13항에 있어서, 상기 간 내배엽 오가노이드를 간 오가노이드로 분화시키는 단계는 EGF가 포함되지 않은 배지에서 배양되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제13항에 있어서, 상기 간 내배엽 오가노이드를 계대 배양하는 단계는 3일 내지 7일 동안 수행되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제13항에 있어서, 상기 간 내배엽 오가노이드를 간 오가노이드로 분화시키는 단계는 10일 내지 20일 동안 수행되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 4)의 분화는 13일 내지 27일 동안 수행되는 것인, 간 오가노이드의 제조방법
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제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 간 오가노이드의 제조방법에 의해 제조된 약물 대사 능력이 증진된 간 오가노이드
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제19항에 있어서, 상기 간 오가노이드는 시토크롬 P450(cytochrome P450, CYP450)을 발현하는 것인, 간 오가노이드
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제20항에 있어서, 상기 시토크롬 P4560은 CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 및 CYP3A4로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것인, 간 오가노이드
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제19항에 있어서, 상기 간 오가노이드는 약물에 의한 독성 평가에 사용되는것인, 간 오가노이드
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제19항에 있어서, 상기 간 오가노이드는 약물에 의한 심장 독성 평가에 사용되는 것인, 간 오가노이드
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