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코리네박테리움 글루타미쿰(Corynebacterium glutamicum) 또는 아조토박터 비네란디(Azotobacter vinelandii) 유래의 단량체 이소시트레이트 디하이드로게나아제(isocitrate dehydrogenase, IDH) 단량체를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는, NADPH 재생용 재조합 발현 벡터
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제 1항에 있어서,상기 재조합 발현 벡터는 NADPH 의존적 효소를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 더 포함하는, NADPH 재생용 재조합 발현 벡터
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제 1항에 있어서,상기 코리네박테리움 글루타미쿰 유래의 이소시트레이트 디하이드로게나아제는 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어지고, 상기 아조토박터 비네란디 유래의 이소시트레이트 디하이드로게나아제는 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어지는 것인, NADPH 재생용 재조합 발현 벡터
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제 2항에 있어서,상기 NADPH 의존적 효소는 디하이드로게나아제(dehydrogenase), 리덕타아제(reductase), 옥시도리덕타아제(oxidoreductase), 트랜스하이드로게나아제(transhydrogenase), 퍼옥시다아제(peroxidase), 옥시게나아제(oxygenase), 모노옥시게나아제(monooxygenase), 플라보독신(flavodoxin) 및 디할로게나아제(dehalogenase)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상인, NADPH 재생용 재조합 발현 벡터
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제 4항에 있어서,상기 NADPH 의존적 효소는 서열번호 1의 아미노산 서열 또는 서열번호 2의 아미노산 서열에 재조합되어 융합되거나, 화학적 링커의 첨가에 의해 연결되는 것인, NADPH 재생용 재조합 발현 벡터
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제 5항에 있어서,상기 화학적 링커는 BS(PEG)5(PEGylated bis(sulfosuccinimidyl) suberate), BS(PEG)9(PEGylated bis(sulfosuccinimidyl) suberate), BS2G-d0(bis(sulfosuccinimidyl) glutarate-d0), BS2G-d4(bis(sulfosuccinimidyl) 2,2,4,4-glutarate-d4), DSBU(disuccinimidyl dibutyric urea), DFDNB(1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzene), DMP(dimethyl pimelimidate), DMS(dimethyl suberimidate), DSG(disuccinimidyl glutarate), DSP(dithiobis(succinimidyl) propionate), DSS(disuccinimidyl suberate), DSSO(disuccinimidyl sulfoxide), DST(disuccinimidyl tartarate), DTBP(dimethyl-3,3-dithiobis propionimidate), EGS(ethylene glycol bis(succinimidyl) succinate), TSAT(tris-(succinimidyl) aminotriacetate) 및 EDC(1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide)로 이루어진 군에서 선택되는 것인, NADPH 재생용 재조합 발현 벡터
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제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항의 NADPH 재생용 재조합 발현 벡터로 형질전환된, 형질전환체
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제 7항에 있어서,상기 형질전환체는 대장균(Escherichia coli)인, 형질전환체
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제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항의 NADPH 재생용 재조합 발현 벡터를 제작하는 단계;상기 재조합 발현 벡터를 형질전환하여 형질전환체를 제작하는 단계;상기 형질전환체를 배양하여 코리네박테리움 글루타미쿰 유래의 이소시트레이트 디하이드로게나아제 또는 아조토박터 비네란디 유래의 이소시트레이트 디하이드로게나아제를 과발현하는 단계; 및과발현된 재조합 단백질을 회수하는 단계를 포함하는, 재조합 단백질의 제조방법
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제 9항에 있어서,상기 배양은 28 내지 32℃에서 수행되는 것인, 재조합 단백질의 제조방법
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제 9항의 재조합 단백질의 제조방법을 통해 제조된, 재조합 단백질
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제 11항에 있어서,상기 재조합 단백질은 단량체 형태로 가용성 발현되며, NADPH 의존적 효소와 함께 사용 가능한 것인, 재조합 단백질
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제 12항에 있어서,상기 NADPH 의존적 효소는 디하이드로게나아제, 리덕타아제, 옥시도리덕타아제, 트랜스하이드로게나아제, 퍼옥시다아제, 옥시게나아제, 모노옥시게나아제, 플라보독신 및 디할로게나아제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 둘 이상인, 재조합 단백질
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제 13항에 있어서,상기 NADPH 의존적 효소는 서열번호 1의 아미노산 서열 또는 서열번호 2의 아미노산 서열에 재조합되어 융합되거나, 화학적 링커에 의해 연결되는 것인, 재조합 단백질
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제 14항에 있어서,상기 화학적 링커는 BS(PEG)5, BS(PEG)9, BS2G-d0, BS2G-d4, DSBU, DFDNB, DMP, DMS, DSG, DSP, DSS, DSSO, DST, DTBP, EGS, TSAT 및 EDC로 이루어진 군에서 선택되는 것인, 재조합 단백질
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제 11항의 재조합 단백질을 포함하는, NADPH 재생용 조성물
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제 11항의 재조합 단백질을 NADPH 의존적 효소 반응계에 첨가하여 NADPH를 재생하는 단계를 포함하는, NADPH 재생방법
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제 11항의 재조합 단백질을 포함하는, NADPH 재생용 키트
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제 11항의 재조합 단백질; 및시토크롬 P450(cytochrome P450) 단백질을 포함하는,기질 하이드록실화용 조성물
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제 19항에 있어서,상기 기질은 오메프라졸, 오메프라졸 설파이드, 에톡시쿠마린 및 니트로페놀로 이루어지는 군에서 선택되는 것인, 기질 하이드록실화용 조성물
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제 19항의 기질 하이드록실화용 조성물을 처리하는 단계를 포함하는, 시험관 내(in vitro) 독성검사 방법
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제 11항의 재조합 단백질과 NADPH 의존적 효소를 동시 발현 또는 융합 발현하여, 목적 기질을 전환하는 방법
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