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핵산 검출 방법

  • 기술번호 : KST2022017566
  • 담당센터 : 광주기술혁신센터
  • 전화번호 : 062-360-4654
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 RPA 방법으로 표적 유전자를 증폭하고 이를 새로운 형광 뉴클레오티드 dUrkTP를 이용한 형광 DNA 탐지체-GO 시스템에 적용한 유전자 진단 기술에 관한 것으로, 본 발명의 rkDNA-GO 시스템은 짧은 시간 내에 정확한 서열의 합성 형광 DNA를 제작할 수 있고, 소광된 rkDNA-GO에 rkDNA와 상보적인 서열의 표적 핵산이 결합되면 형광이 회복되어 빠른 시간 내에 (30분 이내) 경제적이고 쉽게 유전서열에 대한 진단이 가능하며, 이를 유전자의 등온증폭방법과 함께 사용함으로써 이중-선택 과정 (RPA 반응 단계 및 rkDNA-GO 단계)에 의한 높은 민감도 및 선택성을 나타내므로, 이를 간단하고 신속한 진단 시스템으로 이용할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/6844 (2018.01.01) C12Q 1/70 (2006.01.01)
CPC C12Q 1/6844(2013.01) C12Q 1/70(2013.01) C12Q 2563/107(2013.01) C12Q 2527/101(2013.01) C12Q 2527/125(2013.01)
출원번호/일자 1020210028198 (2021.03.03)
출원인 전북대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2022-0124494 (2022.09.14) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2021.03.03)
심사청구항수 20

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 전북대학교산학협력단 대한민국 전라북도 전주시 덕진구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 서영준 전라북도 전주시 완산구
2 최문혁 전라북도 전주시 덕진구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 다해 대한민국 서울시 서초구 서운로**, ***호(서초동, 중앙로얄오피스텔)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2021.03.03 수리 (Accepted) 1-1-2021-0251629-35
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2021.07.19 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 특허고객번호 정보변경(경정)신고서·정정신고서
2021.07.22 수리 (Accepted) 4-1-2021-5199350-79
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2021.09.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2021-0215669-32
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번호 청구항
1 1
표적 핵산의 적어도 일부에 상보적인 프라이머, 형광 몰폴린 나프탈이미드 데옥시우리딘 뉴클레오타이드(fluorescent morpholine naphthalimide deoxyuridine nucleotide, dUrkTP), dATP, dCTP, dGTP, 중합효소(polymerase), 엑소뉴클리에이즈(exonuclease) 및 그래핀 옥사이드(graphene oxide, GO)를 포함하는, 핵산 검출용 조성물
2 2
제 1항에 있어서, 표적 핵산의 적어도 일부에 상보적인 RPA(recombinase polymerase amplification) 프라이머 세트, dNTP 및 SSB(single-strand DNA binding protein) 및 재조합효소(Recombinase)를 추가로 포함하는, 핵산 검출용 조성물
3 3
제 1항에 있어서, 중합효소는 엑소뉴클리에이즈 기능이 없고 DNA 치환 기능을 가지는 DNA 중합효소인, 핵산 검출용 조성물
4 4
제 3항에 있어서, 중합효소는 Vent (exo-) DNA 중합효소, Bst 중합효소, Klenow 절편(fragment) 및 Bsu DNA 중합효소로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인, 핵산 검출용 조성물
5 5
코로나-19 바이러스에 특이적인 rkDNA 및 그래핀 옥사이드를 포함하는, 코로나-19 바이러스 검출용 조성물
6 6
제 5항에 있어서, 코로나-19 바이러스는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는, 코로나-19 바이러스 검출용 조성물
7 7
제 5항에 있어서, 코로나-19 바이러스에 특이적인 rkDNA는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는, 코로나-19 바이러스 검출용 조성물
8 8
제 5항에 있어서, 코로나-19 바이러스(SARS-CoV-2)의 적어도 일부에 상보적인 RPA 프라이머 세트, dNTP, SSB 및 재조합효소를 추가로 포함하는, 코로나-19 바이러스 검출용 조성물
9 9
제 8항에 있어서, 코로나-19 바이러스의 적어도 일부에 상보적인 RPA 프라이머 세트는 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머 및 서열번호 4의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머를 포함하는, 코로나-19 바이러스 검출용 조성물
10 10
제 5항의 코로나-19 바이러스 검출용 조성물을 포함하는 코로나-19 바이러스 검출 키트
11 11
a) 표적 핵산을 등온 증폭하는 단계;b) 엑소뉴클리에이즈를 처리하여 단일가닥 핵산으로 만드는 단계;c) 표적 핵산에 특이적인 rkDNA-GO를 제작하는 단계; 및d) 단계 b)의 단일가닥 핵산을 rkDNA-GO에 처리하는 단계를 포함하는, 핵산 검출 방법
12 12
제 11항에 있어서, 등온 증폭은 RPA 방법으로 수행되는, 핵산 검출 방법
13 13
제 11항에 있어서, 등온 증폭을 20분 내지 60분 수행하는, 핵산 검출 방법
14 14
제 11항에 있어서, rkDNA-GO는 하기의 단계를 포함하는 방법으로 제작하는, 핵산 검출 방법:ⅰ) 표적 핵산의 적어도 일부에 상보적인 프라이머와 표적 핵산을 결합시키는 단계;ⅱ) dUrkTP, dATP, dCTP, dGTP 및 중합효소를 이용하여 반응시키는 단계;ⅲ) 엑소뉴클리에이즈를 처리하는 단계; ⅳ) rkDNA를 정제하는 단계; 및ⅴ) rkDNA에 그래핀 옥사이드를 혼합하는 단계
15 15
제 14항에 있어서, 중합효소는 엑소뉴클리에이즈 기능이 없고 DNA 치환 기능을 가지는 DNA 중합효소인, 핵산 검출 방법
16 16
제 14항에 있어서, 단계 ⅴ)에서 rkDNA 1 μM 당 0
17 17
a) 코로나-19 바이러스를 등온 증폭하는 단계;b) 엑소뉴클리에이즈를 처리하여 단일가닥 핵산으로 만드는 단계;c) 코로나-19 바이러스에 특이적인 rkDNA-GO를 제작하는 단계; 및d) 단계 b)의 단일가닥 핵산을 rkDNA-GO에 처리하는 단계를 포함하는, 코로나-19 바이러스를 검출하는 방법
18 18
제 17항에 있어서, 코로나-19 바이러스에 특이적인 rkDNA-GO는 하기의 단계를 포함하는 방법으로 제작하는, 코로나-19 바이러스를 검출하는 방법:ⅰ) 코로나-19 바이러스의 적어도 일부에 상보적인 프라이머와 표적 핵산을 결합시키는 단계;ⅱ) dUrkTP, dATP, dCTP, dGTP 및 중합효소를 이용하여 반응시키는 단계;ⅲ) 엑소뉴클리에이즈를 처리하는 단계; ⅳ) rkDNA를 정제하는 단계; 및ⅴ) rkDNA에 그래핀 옥사이드를 혼합하는 단계
19 19
제 18항에 있어서, rkDNA는 서열번호 2의 염기서열을 포함하는, 코로나-19 바이러스를 검출하는 방법
20 20
a) 검체로부터 분리된 시료를 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 정방향 프라이머 및 서열번호 4의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머를 이용하여 RPA 방법으로 등온 증폭하는 단계;b) 엑소뉴클리에이즈를 처리하여 단일가닥 핵산으로 만드는 단계; 및c) 단계 b)의 단일가닥 핵산을 코로나-19 바이러스에 특이적인 rkDNA-GO에 처리하여 형광을 확인하는 단계를 포함하는, 코로나-19 바이러스 감염증 진단에 관한 정보를 제공하는 방법
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1 과학기술정보통신부 전북대학교 산학협력단 중견연구 PCR을 사용하지 않는 새로운 바이러스 유전자 진단 방법의 개발