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HER2에 특이적으로 결합하는 단일 가닥 가변 단편(scFv)을 코딩하는 염기서열;담배 식각 바이러스 부위(TEV site)를 코딩하는 염기서열;공간자를 코딩하는 염기서열; 및말토오스 결합 단백질(MBP)을 코딩하는 염기서열;이 작동가능하게 연결된 핵산분자 플랫폼
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제1항에 있어서, 상기 HER2에 특이적으로 결합하는 단일 가닥 가변 단편(scFv)은 서열번호 1, 서열번호 2 및 서열번호 3의 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 핵산분자 플랫폼
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제1항에 있어서, 상기 담배 식각 바이러스 부위(TEV site)는 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 핵산분자 플랫폼
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4
제1항에 있어서,상기 공간자는 서열번호 5의 서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 핵산분자 플랫폼
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제1항에 있어서, 상기 핵산분자는 말토오스 결합 단백질(MBP)-공간자(spacer)-담배 식각 바이러스 부위(TEV site)-단일 가닥 가변 단편(scFv)으로 작동가능하게 연결되고, 상기 핵산분자는 서열번호 6의 아미노산서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 핵산분자 플랫폼
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제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 핵산분자 플랫폼을 포함하는 재조합 발현 벡터
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7
제6항에 있어서,상기 재조합 발현 벡터는 서열번호 16의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 재조합 발현 벡터
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8
제6항의 재조합 발현 벡터를 숙주세포에 형질전환시키는 단계를 포함하는, 핵산분자 플랫폼의 생산방법
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9
제8항에 있어서,(a) 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 재조합 발현 벡터를 숙주세포에 형질전환시키는 단계;(b) 상기 형질전환된 숙주세포를 배양한 후, 단일 콜로니를 암피실린이 포함된 배지에서 종자배양하는 단계;(c) 상기 종자 배양물을 성장시킨 후 암피실린이 첨가된 배지에 옮겨 배양하는 단계;(d) IPTG, Triton X-100 및 Tween 20을 첨가하여 과발현과 세포외 방출을 유도하는 단계; 및(e) 배양 종료후, 원심분리하여 얻은 상등액을 여과한 다음, 크로마토그래피하여 정제하는 단계를 포함하는, 핵산분자 플랫폼의 생산방법
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10
제8항에 있어서,상기 숙주세포는 대장균인 것을 특징으로 하는 핵산분자 플랫폼의 생산방법
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제8항에 있어서, 상기 핵산분자는 말토오스 결합 단백질(MBP)-공간자-담배 식각 바이러스 부위(TEV site)-단일 가닥 가변 단편(scFv)으로 작동가능하게 연결되고, 상기 핵산분자는 서열번호 6의 아미노산서열로 이루어진 것을 특징으로 하는 핵산분자 플랫폼의 생산방법
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(a) 제8항의 방법에 의해 생산된 핵산분자 플랫폼을 담배 식각 바이러스 부위(TEV site) 단백질분해효소와 혼합하고, 반응시키는 단계; 및(b) 상기 반응 종료후 정치시키는 단계를 포함하는, HER2에 특이적으로 결합하는 단일 가닥 가변 단편(scFv)의 정제방법
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제12항에 있어서,상기 혼합은 상기 핵산분자 플랫폼을 상기 담배 식각 바이러스 부위(TEV site) 단백질분해효소와 0
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제12항에 있어서,상기 반응은 20~25℃에서 15~25시간 동안 수행하는 것을 특징으로 하는, HER2에 특이적으로 결합하는 단일 가닥 가변 단편(scFv)의 정제방법
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제12항에 있어서,상기 정치는 15~25시간 동안 수행하는 것을 특징으로 하는, HER2에 특이적으로 결합하는 단일 가닥 가변 단편(scFv)의 정제방법
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제12항의 방법에 의해 정제된 HER2에 특이적으로 결합하는 단일 가닥 가변 단편(scFv)을 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물
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제16항에 있어서,상기 암은 유방암, 난소암, 위암, 직장암, 췌장암 및 자궁내막암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는 약학 조성물
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