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피브리노젠 기반 세포 시트 및 이의 제조방법

  • 기술번호 : KST2022019398
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 피브리노젠을 무혈청배지에 녹여 피브리노젠 저장 용액을 제조하는 단계, 상기 피브리노젠 저장 용액을 세포 배양 배지에 분주시키는 단계, 상기 피브리노젠 분주된 세포를 배양시켜 피브린층을 형성시켜 세포 시트화시키는 단계, 및 상기 시트화된 세포 시트를 배양 배지로부터 박리시키는 단계를 포함하는 제조방법으로부터 제조된 피브리노젠을 기반으로 하되, 상기 피브리노젠으로부터 형성된 피브린층과 세포를 포함하는 세포 시트와 상기 세포 시트를 다수 개 적층시킨 것으로 이루어진 다층 구조의 세포 시트; 방향성을 가지는 세포 배양 배지를 지지체로 사용하여, 여기에 피브리노젠을 분주시켜 제조된 방향성을 가지는 세포 시트; 헤파린이 결합된 피브리노젠을 이용해 만들어지는 세포 시트에 약물이 탑재된 약물 전달체와 응용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 배양 접시에서 배양된 상태, 모양을 그대로 유지할 수 있으며, 배양된 세포는 시트화시켜 탈착되어지며 세포가 가지는 ECM을 유지하기 때문에 이식 후 세포 생존율 유지에 이점을 가지며, 생체 내 이식 시, 이식 부위로의 세포 전달에 대한 손실을 감소시켜 치료 효율의 상승을 기대할 수 있다.
Int. CL C12N 5/071 (2010.01.01) C12N 5/077 (2010.01.01) C12M 1/12 (2006.01.01) A61K 38/18 (2006.01.01) A61P 41/00 (2006.01.01) A61L 27/38 (2006.01.01) A61L 27/54 (2006.01.01)
CPC C12N 5/0697(2013.01) C12N 5/0661(2013.01) C12M 25/06(2013.01) A61K 9/7007(2013.01) A61K 38/18(2013.01) A61P 41/00(2013.01) A61L 27/3891(2013.01) A61L 27/3804(2013.01) A61L 27/225(2013.01) A61L 27/54(2013.01) A61L 27/56(2013.01) C12N 2533/56(2013.01) A61L 2300/414(2013.01)
출원번호/일자 1020210039482 (2021.03.26)
출원인 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2022-0134829 (2022.10.06) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2021.03.26)
심사청구항수 19

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 대한민국 충청남도 천안시 동남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 양희석 충청남도 천안시 동남구
2 이민석 충청남도 천안시 서북구
3 전진 전라남도 고흥군
4 임주한 경기도 수원시 영통구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 최규성 대한민국 대전광역시 유성구 테크노중앙로 ** 에이스타워 ***호(다윈 국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2021.03.26 수리 (Accepted) 1-1-2021-0357591-41
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2022.08.12 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
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번호 청구항
1 1
피브리노젠을 기반으로 하되, 상기 피브리노젠으로부터 형성된 피브린층과 세포를 포함하는 세포 시트
2 2
제 1 항에 있어서,상기 세포 시트는 피브리노젠을 배양중인 세포에 분주시켜 상기 피브리노젠이 피브린층으로 응집(aggregation) 반응을 통하여 세포를 포함하는 시트 형태로 형성되는 것인 세포 시트
3 3
제 1 항에 있어서,상기 세포 시트 내에서 피브리노젠은 200~1000㎍/㎖의 농도로 포함되는 것인 세포 시트
4 4
제 1 항에 있어서,상기 세포 시트에 포함되는 세포는 인간 섬유아세포(Fibroblast Sheet), 인간 평활근세포(SMC Sheet), 인간 혈관세포(HUVEC Sheet), 쥐(mouse) 근육세포(C2C12 Sheet), 쥐(rat) 신경세포(PC12 Sheet), 쥐 골세포(Rat osteoblast Sheet)), 인간 지방유래 줄기세포 (Human ADSC Sheet), 쥐 골수 유래 줄기세포(Rat bmMSC Sheet) 중에서 선택되는 1종 이상인 것인 세포 시트
5 5
제 1 항에 있어서,상기 세포 시트는 2차원 구조를 가지는 것인 세포 시트
6 6
제 1 항에 있어서,상기 세포 시트에 포함되는 세포는 1종 또는 2종 이상의 세포를 같은 배양 접시에 공 배양시킬 수 있는 것인 세포 시트
7 7
피브리노젠을 무혈청배지에 녹여 피브리노젠 저장 용액을 제조하는 단계,상기 피브리노젠 저장 용액을 세포 배양 배지에 분주시키는 단계,상기 피브리노젠 저장 용액이 분주된 세포 배양 배지의 세포를 배양시켜 피브린층이 형성되면서 시트 형태의 세포 시트로 시트화시키는 단계, 및상기 시트화된 세포 시트를 세포 배양 배지로부터 박리시키는 단계를 포함하는 제 1 항에 따른 피브리노젠을 기반으로 하는 세포 시트의 제조방법
8 8
제 7 항에 있어서,상기 세포 배양 배지는 크기 제한없이 사용 가능한 것인 세포 시트의 제조방법
9 9
제 7 항에 있어서,상기 세포 배양 배지에 분주되는 최종 피브리노젠 저장 용액의 농도는 200~1000㎍/㎖인 것인 제조방법
10 10
제 7 항에 있어서,상기 시트화된 세포 시트를 배양 배지로부터의 박리는 별도의 온도조절, 화학적 및 물리적 박리 기작을 거치지 않는 것인 제조방법
11 11
제 1 항에 따른 세포 시트를 다수 개 적층시킨 것으로 이루어진 다층 구조의 세포 시트
12 12
제 11 항에 있어서,상기 다층 구조의 세포 시트는 이식할 세포의 양을 증대시킬 수 있으며, 서로 다른 세포를 포함하는 세포 시트를 적층시킬 수 있는 것인 다층 구조의 세포 시트
13 13
피브리노젠을 기반으로 하되, 방향성을 가지는 세포 배양 배지를 지지체로 사용하여 여기에 피브리노젠을 분주시켜 상기 피브리노젠으로부터 형성된 피브린층과 세포를 포함하는 방향성을 가지는 세포 시트
14 14
제 13 항에 있어서,상기 세포 배양 배지에 포함된 세포는 지지체에 형성된 방향성과 동일한 형태의 방향성을 따라 배열되는 것인 방향성을 가지는 세포 시트
15 15
제 13 항에 있어서,상기 세포 시트 내에 포함된 세포는 지지체에 형성된 방향성과 동일한 형태의 방향성을 따라 배열되는 것인 방향성을 가지는 세포 시트
16 16
제 13 항에 있어서,상기 방향성은 패턴의 형태에 따라 결정될 수 있으며, 상기 패턴은 구조체의 크기 조절 (Multiscale)이 가능한 것으로 그루브-릿지(Groove-Ridge), 기둥(Pillar), 점(Dot), 방사형(Radial) 중에서 선택되는 1종 이상인 것인 방향성을 가지는 세포 시트
17 17
제 1 항에 따른 세포 시트에 약물을 탑재시킨 세포 시트를 이용한 약물 전달체
18 18
제 17 항에 있어서,상기 약물 전달체는 헤파린이 결합된 피브리노젠과 자유 피브리노젠이 혼합된 혼합 피브리노젠에 약물을 주입하여 배양된 세포에 첨가하여 상기 혼합 피브리노젠으로부터 형성된 피브린층에 상기 약물이 탑재됨과 동시에 세포 시트를 형성하는 것인 세포 시트를 이용한 약물 전달체
19 19
제 18 항에 있어서,상기 약물은 헤파린과 결합가능한 약물로써, 골형성 단백질 (Bone morphogenetic protein; BMP), 혈관 내피 성장 인자 (Vascular endothelial growth factor; VEGF), 변형 성장 인자 (Transforming growth factor-β; TGF-β), 혈소판 유도 성장인자 (Platelet derived growth factor; PDGF) 및 섬유아세포 성장인자 (Fibroblast growth factor; FGF)로부터 선택되는 1종 이상의 성장인자인 세포 시트를 이용한 약물 전달체
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