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1
서열번호 1 내지 6의 프라이머를 포함하는, 리신 독소 검출용 LAMP 프라이머 세트
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2
서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브와 서열번호 22 또는 23의 염기서열을 포함하는 프로브(제1 프로브 세트)를 포함하는,리신 독소 검출용 LAMP 프로브 세트
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3
제2항에 있어서,상기 서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브의 5' 말단에 형광발색제로서 FAM(6-carboxyfluorescein), 텍사스 레드(texas red), 플루오레신(fluorescein), HEX(2',4',5',7'-tetrachloro-6-carboxy-4,7-dichlorofluorescein), 플루오레신 클로로트리아지닐(fluorescein chlorotriazinyl), 로다민 그린(rhodamine green), 로다민 레드(rhodamine red), 테트라메틸 로다민(tetramethyl rhodamine), FITC(fluorescein isothiocyanate), 오레곤 그린(oregon green), 알렉사 플루오로(alexa fluor), JOE(6-Carboxy-4',5'-Dichloro-2',7'-Dimethoxyfluorescein), ROX(6-Carboxyl-XRhodamine), TET(Tetrachloro-Fluorescein), TRITC(tertramethylrodamine isothiocyanate), TAMRA(6-carboxytetramethylrhodamine), NED(N-(1-Naphthyl) ethylenediamine), 시아닌(Cyanine) 계열 염료 및 씨아디카르보시아닌(thiadicarbocyanine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나가 부착된 것을 특징으로 하는, 리신 독소 검출용 LAMP 프로브 세트
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4
제2항에 있어서,상기 서열번호 22 또는 23의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에소광제로서 IABkFQ(Iowa black FQ quencher), IAbRQSp(Iowa black RQ quencher), DABCYL(4-dimethylaminoazobenzene-4'-sulfonyl chloride), BHQ (Black Hole Quencher), EBQ(Excellent Bioneer Quencher), 및 ZEN-IBFQ(ZEN-Iowa Black FQ)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나가 부착된 것을 특징으로 하는,리신 독소 검출용 LAMP 프로브 세트
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5
제2항에 있어서,상기 서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브의 5' 말단에 형광발색제인 Cy5(indocarbocyanine-5)가 표지되고,상기 서열번호 22의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ1이 표지되거나, 서열번호 23의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ2가 표지되는 것을 특징으로 하는, 리신 독소 검출용 LAMP 프로브 세트
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| 6 |
6
서열번호 1 내지 6의 프라이머 및 서열번호 8 내지 13의 프라이머를 포함하는, 리신 독소 및 보툴리눔 독소 B 검출용 LAMP 프라이머 세트
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7
서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브와 서열번호 22 또는 23의 염기서열을 포함하는 프로브(제1 프로브 세트); 및서열번호 14의 염기서열을 포함하는 프로브와 서열번호 22 또는 23의 염기서열을 포함하는 프로브(제2 프로브 세트);를 포함하는,리신 독소 및 보툴리눔 독소 B 검출용 LAMP 프로브 세트
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8
제7항에 있어서,상기 서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브 및 서열번호 14의 염기서열을 포함하는 프로브의 5' 말단에 형광발색제가 부착되고,상기 형광발색제는 FAM(6-carboxyfluorescein), 텍사스 레드(texas red), 플루오레신(fluorescein), HEX(2',4',5',7'-tetrachloro-6-carboxy-4,7-dichlorofluorescein), 플루오레신 클로로트리아지닐(fluorescein chlorotriazinyl), 로다민 그린(rhodamine green), 로다민 레드(rhodamine red), 테트라메틸 로다민(tetramethyl rhodamine), FITC(fluorescein isothiocyanate), 오레곤 그린(oregon green), 알렉사 플루오로(alexa fluor), JOE(6-Carboxy-4',5'-Dichloro-2',7'-Dimethoxyfluorescein), ROX(6-Carboxyl-XRhodamine), TET(Tetrachloro-Fluorescein), TRITC(tertramethylrodamine isothiocyanate), TAMRA(6-carboxytetramethylrhodamine), NED(N-(1-Naphthyl) ethylenediamine), 시아닌(Cyanine) 계열 염료 및 씨아디카르보시아닌(thiadicarbocyanine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 리신 독소 및 보툴리눔 독소 B 검출용 LAMP 프로브 세트
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9
제7항에 있어서,상기 제1 프로브 세트 및 제2 프로브 세트의 서열번호 22 또는 23의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제가 부착되고,상기 소광제는 IABkFQ(Iowa black FQ quencher), IAbRQSp(Iowa black RQ quencher), DABCYL(4-dimethylaminoazobenzene-4'-sulfonyl chloride), BHQ (Black Hole Quencher), EBQ(Excellent Bioneer Quencher), 및 ZEN-IBFQ(ZEN-Iowa Black FQ)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는,리신 독소 및 보툴리눔 독소 B 검출용 LAMP 프로브 세트
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10
제7항에 있어서,상기 제1 프로브 세트에서,서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브의 5' 말단에 형광발색제인 Cy5(indocarbocyanine-5)가 표지되고,서열번호 22의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ1이 표지되거나, 서열번호 23의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ2가 표지되며;상기 제2 프로브 세트에서,서열번호 14의 염기서열을 포함하는 프로브의 5' 말단에 형광발색제인 HEX가 표지되고,서열번호 22의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ1이 표지되거나, 서열번호 23의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ2가 표지되는; 것을 특징으로 하는, 리신 독소 및 보툴리눔 독소 B 검출용 LAMP 프로브 세트
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11
서열번호 1 내지 6의 프라이머 및 서열번호 15 내지 20의 프라이머를 포함하는, 리신 독소 및 포도상구균 엔테로톡신 B 검출용 LAMP 프라이머 세트
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12
서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브와 서열번호 22 또는 23의 염기서열을 포함하는 프로브(제1 프로브 세트); 및서열번호 21의 염기서열을 포함하는 프로브와 서열번호 22 또는 23의 염기서열을 포함하는 프로브(제3 프로브 세트);를 포함하는,리신 독소 및 포도상구균 엔테로톡신 B 검출용 LAMP 프로브 세트
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13
제12항에 있어서,상기 서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브 및 서열번호 21의 염기서열을 포함하는 프로브의 5' 말단에 형광발색제가 부착되고,상기 형광발색제는 FAM(6-carboxyfluorescein), 텍사스 레드(texas red), 플루오레신(fluorescein), HEX(2',4',5',7'-tetrachloro-6-carboxy-4,7-dichlorofluorescein), 플루오레신 클로로트리아지닐(fluorescein chlorotriazinyl), 로다민 그린(rhodamine green), 로다민 레드(rhodamine red), 테트라메틸 로다민(tetramethyl rhodamine), FITC(fluorescein isothiocyanate), 오레곤 그린(oregon green), 알렉사 플루오로(alexa fluor), JOE(6-Carboxy-4',5'-Dichloro-2',7'-Dimethoxyfluorescein), ROX(6-Carboxyl-XRhodamine), TET(Tetrachloro-Fluorescein), TRITC(tertramethylrodamine isothiocyanate), TAMRA(6-carboxytetramethylrhodamine), NED(N-(1-Naphthyl) ethylenediamine), 시아닌(Cyanine) 계열 염료 및 씨아디카르보시아닌(thiadicarbocyanine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는, 리신 독소 및 포도상구균 엔테로톡신 B 검출용 LAMP 프로브 세트
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14
제12항에 있어서,상기 제1 프로브 세트 및 제3 프로브 세트의 서열번호 22 또는 23의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제가 부착되고,상기 소광제는 IABkFQ(Iowa black FQ quencher), IAbRQSp(Iowa black RQ quencher), DABCYL(4-dimethylaminoazobenzene-4'-sulfonyl chloride), BHQ (Black Hole Quencher), EBQ(Excellent Bioneer Quencher), 및 ZEN-IBFQ(ZEN-Iowa Black FQ)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는,리신 독소 및 포도상구균 엔테로톡신 B 검출용 LAMP 프로브 세트
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15
제12항에 있어서,상기 제1 프로브 세트에서,서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프로브의 5' 말단에 형광발색제인 Cy5(indocarbocyanine-5)가 표지되고,서열번호 22의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ1이 표지되거나, 서열번호 23의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ2가 표지되며;상기 제3 프로브 세트에서,상기 서열번호 21의 염기서열을 포함하는 프로브의 5' 말단에 형광발색제인 FAM이 표지되고,상기 서열번호 22의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ1이 표지되거나, 서열번호 23의 염기서열을 포함하는 프로브의 3' 말단에 소광제인 BHQ2가 표지되는; 것을 특징으로 하는,리신 독소 및 포도상구균 엔테로톡신 B 검출용 LAMP 프로브 세트
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16
서열번호 1 내지 6의 프라이머, 및 서열번호 7의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 리신 독소 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트(A 세트);서열번호 8 내지 13의 프라이머, 및 서열번호 14의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 보툴리눔 독소 B 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트(B 세트); 및서열번호 15 내지 20의 프라이머, 및 서열번호 21의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 포도상구균 엔테로톡신 B 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트(C 세트);로 이루어지는 군에서,A 세트; A 및 B 세트; A 및 C 세트; A, B 및 C 세트; 중 선택되는 어느 하나를 포함하는 것을 특징으로 하는, 독소작용제 검출용 키트
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17
서열번호 1 내지 6의 프라이머, 및 서열번호 7의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 리신 독소 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트 (A 세트);서열번호 8 내지 13의 프라이머, 및 서열번호 14의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 보툴리눔 독소 B 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트(B 세트); 및서열번호 15 내지 20의 프라이머, 및 서열번호 21의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 포도상구균 엔테로톡신 B 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트(C 세트);로 이루어지는 군에서,A 세트; A 및 B 세트; A 및 C 세트; A, B 및 C 세트; 중 선택되는 어느 하나를 이용하여 고리매개등온증폭법을 수행하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 독소작용제의 검출방법
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18
(a) 생물학적 시료부터 게놈 DNA를 분리하는 단계; (b) 분리된 게놈 DNA를 주형으로 하고,서열번호 1 내지 6의 프라이머, 및 서열번호 7의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 리신 독소 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트 (A 세트);서열번호 8 내지 13의 프라이머, 및 서열번호 14의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 보툴리눔 독소 B 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트(B 세트); 및서열번호 15 내지 20의 프라이머, 및 서열번호 21의 프로브와 서열번호 22 또는 23의 프로브를 포함하는 포도상구균 엔테로톡신 B 검출용 LAMP 프라이머 및 프로브 세트(C 세트);로 이루어지는 군에서,A, B 및 C 세트를 이용하여 고리매개등온증폭법을 수행하는 단계; 및(c) 리신 독소, 보툴리눔 독소 B 및 포도상구균 엔테로톡신 B를 검출 및 정량하는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는,독소작용제의 검출방법
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