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다공성 천연 고분자 지지체 및 연골세포를 동시 배양하는 단계를 포함하는, 연골모델 제조방법
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제1항에 있어서,상기 천연 고분자는 콜라겐, 피브로넥틴, 젤라틴, 키토산, 알긴산 및 히알루론산으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인, 제조방법
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제1항에 있어서,상기 연골모델은 성장단계, 성숙단계, 노화단계 또는 퇴화단계의 연골모델인 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서,상기 배양은 5개월 이내, 5 내지 7개월동안, 7 내지 9개월동안, 또는 10개월 이상 배양하는 것인, 제조방법
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제1항에 있어서,상기 배양된 연골모델에서 외측층(outer layer)의 두께 변화를 확인하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제5항에 있어서, 상기 연골모델의 외측층 두께 변화를 확인하여, 성장단계 또는 성숙단계 또는 노화단계 또는 퇴화단계의 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 배양된 연골모델에서 콜라겐 타입 I 및 콜라겐 타입 II의 발현을 확인하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제7항에 있어서, 상기 배양된 연골모델 중, 콜라겐 타입 I은 발현이 거의 없지만, 콜라겐 타입 II가 발현되는 연골모델은 성장단계, 성숙단계 또는 노화단계 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제7항에 있어서, 상기 배양된 연골모델 중, 콜라겐 타입 I은 발현되나, 콜라겐 타입 II가 거의 발현되지 않는 연골모델은 퇴화단계 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 배양된 연골모델에서 라쿠나(lacuna) 또는 GAG(Glycosaminoglycan) 형성을 확인하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제10항에 있어서,상기 배양된 연골 모델 중, 라쿠나 구조를 유지하거나, GAG가 형성된 연골모델은 성숙단계 연골모델로 선별하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 배양된 연골모델에서 Ki67의 발현을 확인하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제12항에 있어서, 상기 배양된 연골모델 중, Ki67이 발현되어 세포 증식이 관찰되는 연골모델은 성장단계 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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14
제12항에 있어서,상기 배양된 연골모델 중, Ki67이 거의 발현되지 않아 세포 증식이 거의 관찰되지 않는 연골모델은 성숙단계 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 배양된 연골모델에서 TUNEL 어세이를 통해 연골세포의 아포토시스(apoptosis)를 확인하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제15항에 있어서,상기 배양된 연골모델 중, 연골세포의 아포토시스가 관찰되지 않는 연골모델은 성장단계 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제15항에 있어서,상기 배양된 연골모델 중, 아포토시스 양성 세포가 나타나기 시작하는 연골모델은 성숙단계 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제15항에 있어서,상기 배양된 연골모델 중, 아포토시스 양성 세포가 증가하여 세포 사멸이 많아진 연골모델은 노화단계 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제15항에 있어서,상기 배양된 연골모델 중, 세포 대부분이 아포토시스 양상을 나타내는 연골모델은 퇴화단계 연골모델로 선발하는 단계를 포함하는 것을 특징으로하는, 제조방법
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제1항 내지 제19항중 어느 한 항에 따른 방법으로 제조된, 연골모델
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제20항에 따른 연골모델에 시험 물질을 처리하는 단계를 포함하는, 시험 물질의 활성 또는 독성을 검사하는 방법
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제21항에 있어서,상기 활성은 약물대사 활성 측정 또는 약물 상호작용 평가인 것인, 시험 물질의 활성 또는 독성을 검사하는 방법
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