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형광 프로브를 이용한 칸디다 판 및 칸디다 알비칸스 검출용 동시다중 등온증폭반응 프라이머 세트

  • 기술번호 : KST2023002825
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 칸디다 판(Candida pan) 및 칸디다 알비칸스(Candida albicans) 검출을 위한 동시다중 등온증폭반응(multiplex LAMP) 프라이머 세트에 관한 것으로서, 한 번의 검사로 칸디다균 7종을 진단하고, 그 중 칸디다 알비칸스를 감별 진단할 수 있다. 상기 프라이머 세트는 ITS1와 ITS2 부위를 포함한 18s-28s rRNA 유전자 서열을 기반으로 제작되어 높은 민감도와 정확도를 나타내며, 프로브의 3'말단에 MGB 소광물질(quencher)을 추가하여 타겟 서열에 대한 민감도를 증가시킬 수 있다. 본 발명의 검출 방법은 핵산 증폭 여부를 확인하기 위한 전기영동 과정이 불필요하며, 핵산 증폭 시 일정 온도에서 진행되므로 기존의 PCR법 보다 검출 시간이 짧고, 사용할 수 있는 기기의 제한이 적으므로, 기존의 진균 검출법을 대체하는 분자진단검사방법으로 이용될 것으로 기대된다.
Int. CL C12Q 1/6895 (2018.01.01)
CPC C12Q 1/6895(2013.01) C12Q 2527/101(2013.01) C12Q 2563/107(2013.01) C12Q 2565/101(2013.01)
출원번호/일자 1020210179155 (2021.12.14)
출원인 고려대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2023-0090145 (2023.06.21) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2021.12.14)
심사청구항수 13

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 장웅식 서울특별시 동작구
2 임채승 경기도 안양시 동안구
3 문경철 경기도 군포시 오금로 **, *
4 임다혜 인천광역시 계양구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 무한 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, *층(역삼동,화물재단빌딩)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2021.12.14 수리 (Accepted) 1-1-2021-1450412-26
2 [출원서 등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2022.01.14 수리 (Accepted) 1-1-2022-0049063-00
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번호 청구항
1 1
서열번호 1 내지 5의 프라이머와 서열번호 6의 프로브를 포함하고,서열번호 7 내지 11의 프라이머와 서열번호 12의 프로브를 포함하고,서열번호 13 내지 18의 프라이머와 서열번호 19 및 20의 프로브를 포함하는,칸디다 알비칸스(Candida albicans), 칸디다 트로피컬리스(Candida tropicalis), 칸디다 아우리스(Candida auris), 칸디다 글라브라타(Candida glabrata), 칸디다 크루세이(Candida krusei), 칸디다 파라프실로시스(Candida parapsilosis), 및 칸디다 구일리에르몬디(Candida guilliermondii)) 검출용 동시다중 등온증폭반응(multiplex loop-mediated isothermal amplification reaction, multiplex LAMP) 프라이머 세트로서,상기 프라이머 세트는 칸디다 알비칸스를 감별 검출할 수 있는, 동시다중 LAMP 프라이머 세트
2 2
제1항에 있어서,상기 서열번호 6, 12, 및 19의 프로브는 5'말단에 형광물질이 부착된 것을 특징으로 하는, 동시다중 LAMP 프라이머 세트
3 3
제2항에 있어서,상기 형광물질은 각각 상이한 파장을 발하는 것을 특징으로 하는, 동시다중 LAMP 프라이머 세트
4 4
제2항에 있어서,상기 형광물질은 FAM(6-carboxyfluorescein), 텍사스 레드(texas red), 플루오레신(fluorescein), HEX(2',4',5',7'-tetrachloro-6-carboxy-4,7-dichlorofluorescein), 플루오레신 클로로트리아지닐(fluorescein chlorotriazinyl), 로다민 그린(rhodamine green), 로다민 레드(rhodamine red), 테트라메틸 로다민(tetramethyl rhodamine), FITC(fluorescein isothiocyanate), 오레곤 그린(oregon green), 알렉사 플루오로(alexa fluor), JOE(6-Carboxy-4',5'-Dichloro-2',7'-Dimethoxyfluorescein), ROX(6-Carboxyl-XRhodamine), TET(Tetrachloro-Fluorescein), TRITC(tertramethylrodamine isothiocyanate), TAMRA(6-carboxytetramethyl-rhodamine), NED(N-(1-Naphthyl) ethylenediamine), 시아닌(Cyanine) 계열 염료 및 씨아디카르보시아닌(thiadicarbocyanine)으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 동시다중 LAMP 프라이머 세트
5 5
제2항에 있어서,상기 서열번호 6의 프로브는 5' 말단에 FAM(6-carboxyfluorescein)이 부착되었고,상기 서열번호 12의 프로브는 5' 말단에 HEX(2',4',5',7'-tetrachloro-6-carboxy-4,7-dichlorofluorescein)가 부착되었고,상기 서열번호 19의 프로브는 5' 말단에 텍사스 레드(texas red)가 부착된 것을 특징으로 하는, 동시다중 LAMP 프라이머 세트
6 6
제1항에 있어서,상기 서열번호 6, 12, 및 20의 프로브는 각각 3'말단에 소광물질을 포함하는 것을 특징으로 하는, 동시다중 LAMP 프라이머 세트
7 7
제6항에 있어서, 상기 소광물질은 IABkFQ(Iowa black FQ quencher), IAbRQSp(Iowa black RQ quencher), DABCYL(4-dimethylaminoazobenzene-4'-sulfonyl chloride), BHQ (Black Hole Quencher), EBQ(Excellent Bioneer Quencher), 및 ZEN-IBFQ(ZEN-Iowa Black FQ)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 동시다중 LAMP 프라이머 세트
8 8
제1항의 프라이머 세트 및 증폭 반응을 수행하기 위한 시약을 포함하는, 칸디다 알비칸스, 칸디다 트로피컬리스, 칸디다 아우리스, 칸디다 글라브라타, 칸디다 크루세이, 칸디다 파라프실로시스, 및 칸디다 구일리에르몬디 검출용 키트
9 9
제8항에 있어서,상기 증폭 반응을 수행하기 위한 시약은 DNA 중합효소, dNTPs 및 버퍼로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는, 키트
10 10
(1) 생물학적 시료로부터 게놈 DNA(gDNA)를 분리하는 단계; (2) 상기 분리된 gDNA를 주형으로 하고 제1항의 프라이머 세트를 이용하여 등온증폭반응을 수행하여 표적 서열을 증폭하는 단계; 및(3) 상기 증폭된 산물을 검출하는 단계를 포함하는, 칸디다 알비칸스, 칸디다 트로피컬리스, 칸디다 아우리스, 칸디다 글라브라타, 칸디다 크루세이, 칸디다 파라프실로시스, 및 칸디다 구일리에르몬디 검출 방법
11 11
제10항에 있어서,상기 (1) 단계의 생물학적 시료는 혈액(blood), 객담(sputum), 기관지 흡인(bronchial aspiration), 구강세척액(oreal cavity swab), 및 소변(urine)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 검출 방법
12 12
제10항에 있어서,상기 (3) 단계는 DNA 칩, 겔 전기영동, 방사성 측정, 형광 측정, 및 인광 측정으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 방법으로 수행되는 것을 특징으로 하는, 검출 방법
13 13
제10항에 있어서,상기 (3) 단계 이후, 상기 (3) 단계에서 검출하는 시간을 측정하여 칸디다 알비칸스, 칸디다 트로피컬리스, 칸디다 아우리스, 칸디다 글라브라타, 칸디다 크루세이, 칸디다 파라프실로시스, 및 칸디다 구일리에르몬디을 정량화하는 단계를 추가로 포함하는, 검출 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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1 보건복지부 고려대학교 구로병원 연구중심병원육성(R&D) 신종 감염병 초고속 정밀진단기술 개발 및 사업화
2 과학기술정보통신부 고려대학교 산학협력단 (이공)(유형1-1)중견연구(연 평균연구비 1억원 이내) 미세유동기법을 이용한 칸디다 혈류감염의 신속한 분자진단법 개발