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숙주 세포에서 표적 유전자의 발현을 조절하는 시스템으로서, 상기 숙주세포는 (i) DNA-결합 도메인;(ii) 전사활성 도메인; 및(iii) 엑디손 수용체 리간드 결합 도메인;을 포함하는 엑디손 수용체 복합체 드라이버,(i) 상기 DNA 결합 도메인에 결합할 수 있는 반응 요소; 및(ii) 표적 유전자;를 포함하는 이펙터로 이루어지는 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 시스템
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제1항에 있어서,상기 이펙터의 상기 (i) DNA 결합 도메인에 결합할 수 있는 반응 요소는 5xQUAS, 9xQUAS, 13xQUAS 및 17xQUAS로 이루어진 군으로부터 선택되는 1 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 시스템
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제1항에 있어서,상기 이펙터의 상기 (i) DNA 결합 도메인에 결합할 수 있는 반응 요소는 서열 번호 1 내지 4로 구성된 군으로부터 선택되는 하나의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 시스템
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제1항에 있어서,상기 이펙터는 QUAS 반복서열을 포함하며 서열 번호 5 내지 8로 구성된 군으로부터 선택되는 하나의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 시스템
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제1항에 있어서,상기 드라이버의 (i) DNA-결합 도메인은 QFDBD(QF DNA binding domain)이며, 상기 (ii) 전사활성 도메인은 활성화도메인(activating domain, AD), minimal 활성화도메인, 중간도메인(middle domain), VP16, VP16 2반복체, VP16 3반복체 및 VP16 4반복체로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 시스템
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제1항에 있어서,상기 드라이버는 서열 번호 9 또는 10의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 시스템
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제1항에 있어서,상기 유전자 발현 유도 시스템은 숙주세포의 외부에서 공급하는 엑디손 수용체 리간드의 농도에 따라 발현량이 조절되는 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 시스템
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제7항에 있어서,상기 엑디손 수용체 리간드는 엑디손 또는 테부페노자이드(tebufenozide, Teb)인 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 시스템
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제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 유전자 발현 유도 시스템으로 형질전환된 제브라피쉬
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QUAS 반복서열을 포함하며 서열 번호 1 내지 4로 구성된 군으로부터 선택되는 하나의 이펙터 염기서열을 포함하는 재조합 벡터
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QUAS 반복서열을 포함하며 서열 번호 5 내지 8로 구성된 군으로부터 선택되는 하나의 이펙터 염기서열을 포함하는 재조합 벡터
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DNA-결합 도메인, 전사활성 도메인 및 엑디손 수용체 리간드 결합 도메인을 포함하는 복합체를 암호화하는 서열 번호 9 또는 10의 드라이버 염기서열을 포함하는 재조합 벡터
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제10항 내지 제12항 중 어느 하나의 재조합 벡터로 형질전환된 세포
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제13항에 있어서,상기 형질전환된 세포는 제브라피쉬의 생식세포 또는 체세포인 것을 특징으로 하는 형질전환된 세포
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숙주 세포에서 표적 유전자의 발현을 조절하는 방법으로서, 상기 숙주세포에(i) DNA-결합 도메인;(ii) 전사활성 도메인; 및(iii) 엑디손 수용체 리간드 결합 도메인;을 포함하는 엑디손 수용체 복합체 드라이버를 도입하는 단계(A);(i) 상기 DNA 결합 도메인에 결합할 수 있는 반응 요소; 및(ii) 표적 유전자;를 포함하는 이펙터를 도입하는 단계(B);상기 숙주세포에 엑디손 수용체 리간드를 도입하여 상기 표적 유전자의 발현을 조절하는 단계(C);를 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 발현 유도 방법
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숙주 세포에서 표적 유전자를 영구 발현하는 시스템으로서, 상기 숙주세포는(i) DNA-결합 도메인;(ii) 전사활성 도메인; 및을 포함하는 드라이버,(i) 상기 DNA 결합 도메인에 결합할 수 있는 반응 요소; 및(ii) 표적 유전자;를 포함하는 이펙터로 이루어지는 것을 특징으로 하는 영구 유전자 발현 유도 시스템
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제16항에 있어서,상기 이펙터는 QUAS 반복서열을 포함하며 서열 번호 1 내지 4로 구성된 군으로부터 선택되는 하나의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 영구 유전자 발현 유도 시스템
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제16항에 있어서,상기 드라이버는 서열 번호 11 또는 12의 유전자에 의하여 암호화되는 QF DNA 결합부위, 최소 전사활성 도메인 및 Vp16 을 포함하는 복합체인 것을 특징으로 하는 영구 유전자 발현 유도 시스템
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제16항 내지 제18항 중 어느 한 항의 영구 유전자 발현 유도 시스템으로 형질전환된 제브라피쉬
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DNA-결합 도메인 및 전사활성 도메인을 포함하는 복합체를 암호화하는 서열 번호 11 또는 12의 드라이버 염기서열을 포함하는 재조합 벡터
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제20항의 재조합 벡터로 형질전환된 세포
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제21항에 있어서,상기 형질전환된 세포는 제브라피쉬의 생식세포 또는 체세포인 것을 특징으로 하는 형질전환된 세포
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숙주 세포에서 표적 유전자의 발현을 조절하는 방법으로서, 상기 숙주세포에(i) DNA-결합 도메인;(ii) 전사활성 도메인; 및을 포함하는 드라이버를 도입하는 단계(A);(i) 상기 DNA 결합 도메인에 결합할 수 있는 반응 요소; 및(ii) 표적 유전자;를 포함하는 이펙터를 도입하는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는 영구 유전자 발현 유도 방법
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