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인간 소장 상피세포 전구체(hIEC progenitor)를 EGF, Wnt 저해제 및 Notch 활성제를 포함하는 배지에서 배양하는 단계를 포함하는 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 인간 소장 상피세포 전구체는 내배엽 세포를 EGF, R-spondin 및 인슐린이 포함된 배지에서 배양하여 수득한 것인, 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제2항에 있어서,상기 내배엽 세포는 인간 전분화능 줄기세포(hPSC)를 Activin A 및 FBS가 포함된 배지에서 배양하여 수득한 것인, 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제3항에 있어서,상기 인간 전분화능 줄기세포는 인간 배아 줄기세포(hESC) 또는 유도 만능 줄기세포(iPSC)인, 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제4항에 있어서,상기 유도만능 줄기세포는 소장 조직에서 분리한 섬유아세포(fibroblast)로부터 유래된 것인, 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 Wnt 저해제는 Wnt C-59, IWP-2, LGK974, ETC-1922159, RXC004, CGX1321, XAV-939, IWR, G007-LK, HQBA, PKF115-584, iCRT, PRI-724, ICG001, DKK1, SFRP1 및 WIF1으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인, 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제1항에 있어서,상기 Notch 활성제는 발프로산(valproic aicd), 옥살리플라틴(oxaliplatin), Nrf2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2), DLL1(Delta-like 1), DLL3(Delta-like 3), DLL4(Delta-like 4), JAG1(Jagged1) 및 JAG2(Jagged2)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인, 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제1항에 있어서, 상기 배양이 단층 배양인, 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제1항에 있어서, 상기 방법이 배양중인 인간 소장 상피세포 전구체를 공기에 노출시키는 단계를 더 포함하는 것인, 인간 소장 상피세포 집단의 제조 방법
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제1항의 제조방법으로 제조된 인간 소장 상피세포 집단
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제10항에 있어서,상기 인간 소장 상피세포 집단은 소장세포(enterocytes), 점액분비세포(goblet cells), 호르몬 분비세포(enteroendocrine cell) 및 파네스세포(Paneth cell)를 포함하는 것인, 인간 소장 상피세포 집단
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제10항에 있어서,상기 인간 소장 상피세포 집단은 하기 (i) 내지 (v) 중 하나 이상의 특성을 갖는 인간 소장 상피세포 집단:(i) CDX2, VIL1, ANPEP, SI, LGR5, LYZ, MUC2, MUC13, CHGA 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상에 양성인 특성;(ii) OCLN, CLDN1, CLDN3, CLDN4, CLDN5, CLDN7, CLDN15, ZO-1 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상에 양성인 특성;(iii) ATOH1, AXIN2, CTNNB1 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상에 음성인 특성;(iv) HES1이 양성인 특성; 및(v) CDX2, ANPEP, CYP3A4, GLUT2, GLUT5 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상에 양성인 특성
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제10항에 있어서,상기 인간 소장 상피세포 집단은 인간 대장 선암종 세포주(human colon adenocarcinoma cell line, Caco-2) 대비 CYP3A4 효소 활성이 2배 내지 20배 증가된 것을 특징으로 하는 것인, 인간 소장 상피세포 집단
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제10항의 인간 소장 상피세포 집단을 포함하는 인간 소장 상피 모델
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내배엽 세포를 EGF, R-spondin 및 인슐린이 포함된 배지에서 배양하는 단계를 포함하는, 인간 소장 상피세포 전구체의 제조방법
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제15항에 있어서, 상기 내배엽 세포는 인간 전분화능 줄기세포(hPSC)로부터 분화된 것인, 인간 소장 상피세포 전구체의 제조방법
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제15항의 제조방법으로 제조된 인간 소장 상피세포 전구체
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제17항에 있어서, 상기 인간 소장 상피세포 전구체는 계대배양 가능한 것인, 인간 소장 상피세포 전구체
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EGF, R-spondin 및 인슐린을 포함하는 제 1 조성물; 및 EGF, Wnt 저해제 및 Notch 활성제를 포함하는 제 2 조성물을 포함하는 인간 소장 상피세포 집단의 제조용 키트
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제14항의 인간 소장 상피 모델에 약물을 처리하는 단계; 및상기 인간 소장 상피 모델에서 약물의 흡수도 또는 생체 이용률을 평가하는 단계를 포함하는 약물 평가 방법
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제14항의 인간 소장 상피 모델에 장내미생물을 처리하는 단계; 및상기 인간 소장 상피 모델에서 장내미생물의 생착능과 군집화를 평가하는 단계를 포함하는 장내미생물 평가 방법
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제10항의 인간 소장 상피세포 집단을 포함하는 생체이식용 조성물
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i) 인간 전분화능 줄기세포로부터 제조된 3차원 장 오가노이드(three-dimensional intestinal organoid)를 단일세포 또는 단일 크립트(crypt)로 분리하는 단계;ii) 상기 단일세포 또는 단일 크립트를 이용하여 3차원 장 스페로이드(three-dimensional intestinal spheroid)를 제조하는 단계;iii) 상기 3차원 장 스페로이드를 이용하여 장 줄기세포를 증식하는 단계;iv) 3차원 장 스페로이드를 2차원 장 상피세포로 전환하는 단계; 및 v) 2차원 장 상피세포를 EGF, Wnt 저해제 및 Notch 활성제를 포함하는 배지에서 배양하는 단계를 포함하는, 3차원 장 오가노이드를 2차원 인간 소장 상피모델로 전환하는 방법
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제23항에 있어서,상기 단계 v)에서 2차원 장 상피세포는 2차원의 플레이트 또는 트랜스웰에서 배양되는 것인, 3차원 장 오가노이드를 2차원 인간 소장 상피모델로 전환하는 방법
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