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서열번호 1로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 항-HER2 scFv; 및 서열번호 3으로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 전사인자 CP2c 표적 펩티드;를 포함하는 이중표적 단백질
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2 |
2
제1항에 있어서,상기 CP2c 표적 펩티드는 C-말단에 서열번호 5로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 세포막 투과 펩티드(CPP)가 결합된 것을 특징으로 하는 이중표적 단백질
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3 |
3
제1항 또는 제2항의 이중표적 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터
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4
제3항에 있어서,상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 8의 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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5 |
5
제3항에 있어서,상기 발현 벡터는 MBP(maltose-binding protein), TEV 프로테아제(Tobacco etch virus protease), TEV 프로테아제 절단 위치(cleavage site), 및 상기 이중표적 단백질을 포함하는 융합 단백질을 발현하는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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6 |
6
제5항에 있어서, 상기 융합 단백질은 MBP, TEV 프로테아제, TEV 프로테아제 절단 위치 및 이중표적 단백질이 순차적으로 연결된 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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7
제5항에 있어서,상기 MBP는 서열번호 9로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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8 |
8
제5항에 있어서,상기 TEV 프로테아제는 서열번호 11로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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9 |
9
제5항에 있어서,상기 TEV 프로테아제 절단 위치는 서열번호 13으로 표시되는 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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10
제5항에 있어서, 상기 발현 벡터는 서열번호 10로 표시되는 염기서열로 이루어지고, MBP를 암호화하는 폴리뉴클레오티드;서열번호 12로 표시되는 염기서열로 이루어지고, TEV 프로테아제를 암호화하는 폴리뉴클레오티드;서열번호 14으로 표시되는 염기서열로 이루어지고, TEV 프로테아제 절단 위치를 암호화하는 폴리뉴클레오티드; 및서열번호 8로 표시되는 염기서열로 이루어지고, 상기 이중표적 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드;를 포함하는 것을 특징으로 하는 발현 벡터
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제5항의 발현 벡터로 형질전환된 숙주세포
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제11항에 있어서,상기 숙주세포는 대장균인 것을 특징으로 하는 숙주세포
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(1) MBP, TEV 프로테아제, TEV 프로테아제 절단 위치, 및 제1항 또는 제2항의 이중표적 단백질을 포함하는 융합 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터를 대장균에 형질전환하는 단계;(2) 상기 대장균을 배양하여 이중표적 단백질을 발현시키는 단계; 및(3) 상기 이중표적 단백질을 정제하는 단계;를 포함하는 이중표적 단백질의 대량 생산 방법
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14
제13항에 있어서, 상기 융합 단백질은 MBP, TEV 프로테아제, TEV 프로테아제 절단 위치 및 이중표적 단백질이 순차적으로 연결된 것을 특징으로 하는 이중표적 단백질의 대량 생산 방법
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15
제13항에 있어서,상기 정제는 Ni-NTA 크로마토그래피 방법 또는 풀-다운(pull-down) 방법으로 수행되는 것을 특징으로 하는 이중표적 단백질의 대량 생산 방법
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제1항 또는 제2항에 따른 이중표적 단백질을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물
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