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대상 용매 및 분자 내 전하 전달(intramolecular charge transfer; ICT)이 가능한 염료를 포함하는 측정 샘플을 준비하는 단계; 및형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 형광 신호를 분석하는 단계;를 포함하고,상기 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 형광 신호를 분석하는 단계에서 상기 대상 용매의 수소 결합 유무 또는 상기 수소 결합의 방향을 검출하는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제1항에 있어서, 상기 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 형광 신호를 분석하는 단계는 상기 대상 용매의 유전 상수를 이용하여 상기 대상 용매의 수소 결합 유무 또는 상기 수소 결합의 방향을 검출하는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제2항에 있어서, 상기 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 형광 신호를 분석하는 단계는,상기 분자 내 전하 전달이 가능한 염료의 형광의 형광 신호를 분석하여 수소결합을 하지 못하는 비양성자성 용매(aprotic solvent)의 유전 상수 추세선을 포함하는 형광 스펙트럼을 수득하고,상기 형광 스펙트럼을 분석하여 측정된 스펙트럼 위치 또는 스펙트럼 평균(spectral peak 또는 spectral mean)이 상기 비양성자성 용매의 유전 상수 추세선을 기준으로 벗어난 위치 또는 거리에 따라 상기 대상 용매의 수소 결합 유무 또는 상기 수소 결합의 방향을 검출하는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제2항에 있어서, 상기 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 형광 신호를 분석하는 단계는,상기 대상 용매에 대한 상기 분자내 분자 내 전하 전달이 가능한 염료에서 방출되는 형광을 측정하여 얻은 형광 스펙트럼을 분석하여 측정된 스펙트럼 위치 또는 스펙트럼 평균(spectral peak 또는 spectral mean)을 상기 대상 용매의 유전 상수에 따라 그래프에 표기(plot)하고, 상기 비양성자성 용매(aprotic solvent)의 스펙트럼 위치로부터 상기 대상 용매의 스펙트럼 이동(spectrum shift)을 분석하는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제3항에 있어서, 상기 대상 용매가 수소결합 주개(hydrogen band donor) 특성을 가지면, 상기 형광 스펙트럼이 상기 비양성자성 용매의 유전 상수 추세선보다 장파장에서 나타나고,상기 대상 용매가 수소 결합 받개(hydrogen band acceptor) 특성을 가지면, 상기 형광 스펙트럼이 상기 비양성자성 용매의 유전 상수 추세선보다 단파장에서 나타나는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제3항에 있어서, 상기 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 형광 신호를 분석하는 단계는,상기 대상 용매에 대해 측정한 형광 스펙트럼으로부터 얻어진 형광 강도 가중 스펙트럼 평균 값을 유전 상수에 대해 상기 비양성자성 용매의 유전 상수 추세선보다 위에 위치하면 수소 결합 주개로 해석하고,상기 비양성자성 용매의 유전 상수 추세선보다 아래에 위치하면 수소 결합 받개로 해석하는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제3항에 있어서, 상기 대상 용매의 수소 결합 강도는 상기 비양성자성 용매의 유전 상수 추세선으로부터 거리에 비례하는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제1항에 있어서, 상기 용매의 수소 결합 센싱 방법은,상기 측정 샘플을 준비하는 단계 내지 상기 형광 신호를 분석하는 단계를 적어도 2회 이상 반복적으로 진행하여 정량 형광 스펙트럼을 추출하고,상기 정량 형광 스펙트럼을 이용하여 상기 대상 용매의 종류를 특정하는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제1항에 있어서, 상기 분자 내 전하 전달이 가능한 염료는 나일 블루(Nile blue), 아주르 A, 나일 레드(Nile red) 및 페릴린(perylene)계 염료 중 적어도 어느 하나를 포함하는 것을 특징으로 하는 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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형광 비즈를 글라스 바텀 디시(glass bottom dish)에 고정하는 단계;상기 형광 비즈를 초고해상도 형광현미경을 이용하여 촬영하여 위치 정보와 스펙트럼 정보가 포함된 공간(spatial) 이미지 및 스펙트럼(spectral) 이미지를 수득하는 단계;상기 공간(spatial) 이미지와 상기 스펙트럼(spectral) 이미지 간의 위치 맵핑을 수행하는 단계;분자 내 전하 전달이 가능한 염료를 포함하는 형광 용액을 준비하는 단계;상기 형광 용액을 커버 글라스(cover glass)에 코팅하여 상기 분자 내 전하 전달이 가능한 염료를 상기 커버 글라스에 고정시키는 단계;상기 분자 내 전하 전달이 가능한 염료가 고정된 커버 글라스를 대상 용매를 포함하는 슬라이드 글라스에 부착하여 측정 샘플을 준비하는 단계; 및상기 초고해상도 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 이미징하고, 형광 신호를 분석하는 단계;를 포함하고, 상기 초고해상도 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 이미징하고, 형광 신호를 분석하는 단계에서 상기 대상 용매의 수소 결합 유무 또는 상기 수소 결합의 방향을 검출하는 것을 특징으로 하는 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제10항에 있어서, 상기 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 형광 신호를 분석하는 단계는 상기 대상 용매의 유전 상수를 이용하여 상기 대상 용매의 수소 결합 유무 또는 상기 수소 결합의 방향을 검출하는 것을 특징으로 하는 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제11항에 있어서, 상기 초고해상도 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 이미징하고, 형광 신호를 분석하는 단계는,상기 분자 내 전하 전달이 가능한 염료의 형광의 형광 신호를 분석하여 수소결합을 하지 못하는 비양성자성 용매(aprotic solvent)의 유전 상수 추세선을 포함하는 형광 스펙트럼을 수득하고,상기 형광 스펙트럼을 분석하여 측정된 스펙트럼 위치 또는 스펙트럼 평균(spectral peak 또는 spectral mean)가 상기 비양성자성 용매의 유전 상수 추세선을 기준으로 벗어난 위치 또는 거리에 따라 상기 대상 용매의 수소 결합 유무 또는 상기 수소 결합의 방향을 검출하는 것을 특징으로 하는 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제11항에 있어서, 상기 초고해상도 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 이미징하고, 형광 신호를 분석하는 단계는,상기 대상 용매에 대한 상기 분자내 분자 내 전하 전달이 가능한 염료에서 방출되는 형광을 측정하여 얻은 형광 스펙트럼을 분석하여 측정된 스펙트럼 위치 또는 스펙트럼 평균(spectral peak 또는 spectral mean)을 상기 대상 용매의 유전 상수에 따라 그래프에 표기(plot)하고, 상기 비양성자성 용매(aprotic solvent)의 스펙트럼 위치로부터 상기 대상 용매의 스펙트럼 이동(spectrum shift)을 분석하는 것을 특징으로 하는 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제10항에 있어서, 상기 초고해상도 형광현미경을 이용하여 상기 측정 샘플의 형광을 측정하여 이미징하고, 형광 신호를 분석하는 단계는,상기 공간(spatial) 이미지 및 스펙트럼(spectral) 이미지를 포함하는 초고해상도 이미지를 생성하고,상기 초고해상도 이미지는 점묘화로 상기 초고해상도 이미지에 포함된 적어도 하나 이상의 점의 색을 구별하여 상기 대상 용매의 수소 결합 유무 또는 상기 수소 결합의 방향을 검출하는 것을 특징으로 하는 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제10항에 있어서, 상기 대상 용매는 적어도 두 개 이상의 용매를 포함하는 혼합 용매이고,상기 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법은 상기 초고해상도 이미지에 포함된 적어도 하나 이상의 점의 색에 따른 상기 점의 개수에 따라 수소 결합의 종류에 따른 개수를 측정하여 상기 혼합 용매의 비율을 검출하는 것을 특징으로 하는 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제10항에 있어서, 상기 용매의 수소 결합 센싱 방법은,상기 측정 샘플을 준비하는 단계 내지 상기 형광 신호를 분석하는 단계를 적어도 2회 이상 반복적으로 진행하여 정량 형광 스펙트럼을 추출하고,상기 정량 형광 스펙트럼을 이용하여 상기 대상 용매의 종류를 특정하는 것을 특징으로 하는 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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제10항에 있어서, 상기 용매의 수소 결합 센싱 방법은,상기 대상 용매에 이온을 추가하였을 때 상기 분자 내 전하 전달이 가능한 염료와 상기 대상 용매 사이의 수소 결합 방향 변화를 센싱하는 것을 특징으로 하는 초고해상도 형광현미경을 이용한 용매의 수소 결합 센싱 방법
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