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하기 단계를 포함하는 Cas 단백질 복합체를 이용한 타겟 분자 검출 방법:(a) DNA 변형 효소를 이용하여 crRNA에 연장되어 있는 DNA 길이를 변화시키는 단계; (b) (a)단계의 반응물과 Cas 단백질을 혼합하여 Cas 단백질 복합체를 형성하는 단계; 및(c) Cas 단백질 복합체의 절단(cleavage) 활성 신호를 측정하는 단계
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제1항에 있어서, 상기 타겟 분자는 핵산, 단백질, 효소 및 세포로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 1종인 것을 특징으로 하는 타겟 분자 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 Cas 단백질은 Cas12a, Cas13 및 Cas9으로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 1종인 것을 특징으로 하는 타겟 분자 검출 방법
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제1항에 있어서, 상기 (c)단계의 절단(cleavage)은 시스-절단(cis-cleavage) 또는 트랜스-절단(trans-cleavage)인 것을 특징으로 하는 타겟 분자 검출 방법
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하기 단계를 포함하는 Cas 단백질 복합체를 이용한 타겟 핵산 검출 방법:(a) DNA 변형 효소를 이용하여 crRNA에 연장되어 있는 DNA 길이를 변화시키는 단계; (b) (a)단계의 반응물과 Cas 단백질을 혼합하여 Cas 단백질 복합체를 형성하는 단계; 및(c) Cas 단백질 복합체의 절단(cleavage) 활성 신호를 측정하는 단계
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제5항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소는 MseI, 엑소뉴클리에이즈 I, 엑소뉴클리에이즈 III 및 말단 뉴클레오티드 전이효소로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종 인것을 특징으로 하는 타겟 핵산 검출 방법
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제6항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 MseI인 경우, 상기 (a)단계에서 crRNA에 연장되어있는 DNA와 부분적으로 결합하는 프로브를 추가적으로 더 포함하고, 상기 프로브의 길이는 10 내지 20 bp인 것을 특징으로 하는 타겟 핵산 검출 방법
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제6항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 MseI, 엑소뉴클리에이즈 I 및 엑소뉴클리에이즈 III인 경우, crRNA에 연장되어 있는 DNA의 길이는 31-mer이고,상기 DNA 변형 효소가 말단 뉴클레오티드인 경우, crRNA에 연장되어 있는 DNA의 길이는 11-mer인 것을 특징으로 하는 타겟 핵산 검출 방법
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하기 단계를 포함하는 Cas 단백질 복합체를 이용한 타겟 효소 검출 방법:(a) 타겟 효소를 이용하여 crRNA에 연장되어 있는 DNA 길이를 변화시키는 단계; (b) (a)단계의 반응물과 Cas 단백질을 혼합하여 Cas 단백질 복합체를 형성하는 단계; 및(c) Cas 단백질 복합체의 절단(cleavage) 활성 신호를 측정하는 단계
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제9항에 있어서, 상기 타겟 효소는 DNA 변형 효소이고, 상기 DNA 변형 효소는 MseI, 엑소뉴클리에이즈 I, 엑소뉴클리에이즈 III 및 말단 뉴클레오티드 전이효소로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종 인것을 특징으로 하는 타겟 효소 검출 방법
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제10항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 MseI인 경우, 상기 (a)단계에서 crRNA에 연장되어있는 DNA와 부분적으로 결합하는 프로브를 추가적으로 더 포함하고, 상기 프로브의 농도는 사용한 crRNA 농도 대비 0
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제10항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 MseI인 경우, 상기 (c)단계의 절단 활성 신호를 측정한 결과, (a)단계를 수행하기 전의 반응물과 혼합하였을 때의 Cas 단백질 복합체의 절단 활성 신호보다 증가하면 타겟 효소가 있는 것으로 판단하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 타겟 효소 검출 방법
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제10항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 엑소뉴클리에이즈 I인 경우, 상기 (c)단계의 절단 활성 신호를 측정한 결과, (a)단계를 수행하기 전의 반응물과 혼합하였을 때의 Cas 단백질 복합체의 절단 활성 신호보다 증가하면 타겟 효소가 있는 것으로 판단하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 타겟 효소 검출 방법
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제10항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 엑소뉴클리에이즈 III인 경우, 상기 (a)단계에서 crRNA에 연장되어있는 DNA와 부분적으로 결합하는 프로브를 추가적으로 더 포함하고, 상기 프로브의 농도는 사용한 crRNA 농도 대비 0
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제10항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 엑소뉴클리에이즈 III인 경우, 상기 (c)단계의 절단 활성 신호를 측정한 결과, (a)단계를 수행하기 전의 반응물과 혼합하였을 때의 Cas 단백질 복합체의 절단 활성 신호보다 증가하면 타겟 효소가 있는 것으로 판단하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 타겟 효소 검출 방법
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제10항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 말단 뉴클레오티드 전이효소 (Terminal deoxynucleotidyl transferase) 인 경우, 상기 (c)단계의 절단 활성 신호를 측정한 결과, (a)단계를 수행하기 전의 반응물과 혼합하였을 때의 Cas 단백질 복합체의 절단 활성 신호보다 감소하면 타겟 효소가 있는 것으로 판단하는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 타겟 효소 검출 방법
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제10항에 있어서, 상기 DNA 변형 효소가 MseI, 엑소뉴클리에이즈 및 엑소뉴클리에이즈 III인 경우, crRNA에 연장되어 있는 DNA의 길이는 31-mer이고,상기 DNA 변형 효소가 말단 뉴클레오티드 전이효소인 경우, crRNA에 연장되어 있는 DNA의 길이는 11-mer인 것을 특징으로 하는 타겟 효소 검출 방법
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DNA 변형 효소를 이용하여 crRNA에 연장되어 있는 DNA 길이를 변화시키는 단계를 포함하는 타겟 분자 검출용 키트로서, 상기 키트는 crRNA 및 Cas 단백질을 포함하는 것을 특징으로 하는 타겟 분자 검출용 키트
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제18항에 있어서, DNA 변형 효소는 MseI, 엑소뉴클리에이즈 I, 엑소뉴클리에이즈 III 및 말단 뉴클레오티드 전이효소로 이루어진 군에서 선택되는 어느 1종 인것을 특징으로 하는 타겟 분자 검출용 키트
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