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서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 인터루킨21 (IL21)에서 N-말단을 기준으로 50, 54, 75 내지 88 및 124번 위치로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 아미노산 서열이 치환 또는 결실된 인터루킨21 변이체
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제1항에 있어서, 상기 서열번호 4의 아미노산 서열 중 다음으로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환 또는 결실을 포함하는 인터루킨21 변이체:(1) K50N,(2) K54Q,(3) K75L,(4) P76D,(5) P77R,(6) S78N,(7) T79L, (8) R83N, R83D, R83L,(9) R84K, R84D, R84W,(10) Q85G, Q85S,(11) K86N, K86L,(12) H87A,(13) R88T, R88G, R88N,(14) R124Q, R124D,(15) 79 내지 82번 위치의 아미노산 결실, 및(16) 81 내지 84번 위치의 아미노산 결실
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제1항에 있어서, 상기 서열번호 4의 아미노산 서열 중 다음으로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 아미노산 치환 및/또는 결실을 포함하는 인터루킨21 변이체:(1) R83N, R84K, R124Q;(2) R83D, R84D, R124D;(3) K50N, K54Q, R86N, R88T; (4) K50N, K54Q, R83D, R84D, R86N, R88T, R124D;(5) K75L, P76D, P77R, S78N, 79 내지 82번 위치의 아미노산 결실, R83L, R84W, Q85G, K86L, H87A, R88G; 및(6) K75L, P76D, P77R, S78N, T79L, 81 내지 84번 위치의 아미노산 결실, Q85S, K86L, H87A, R88N
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제1항에 있어서, 서열번호 5 내지 10으로 구성된 군에서 선택되는 서열을 포함하는 인터루킨21 변이체
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제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 인터루킨21 변이체; 및 제 1 Fc 영역 및 제 2 Fc 영역을 포함하는 항체(immunoglobulin) 중쇄불변부위 (Fc) 쌍을 포함하고, 상기 Fc쌍은 제 1 Fc 영역 또는 제 2 Fc 영역의 CH3 도메인 중 변이를 포함하는 이종이중체 (heterodimer)인, 융합단백질
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제5항에 있어서, 상기 인터루킨21 변이체는 제 1 Fc 영역 또는 제 2 Fc 영역의 N-말단에 결합하는 융합단백질
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제5항에 있어서, 상기 IL-21 또는 이의 변이체는 링커로 제 1 Fc 영역 또는 제 2 Fc 영역에 연결되어 있는 융합단백질
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제7항에 있어서, 상기 링커는 (GS)n, (GGS)n, (GSGGS)n 또는 (GnS)m (n, m은 각각 1 내지 10)을 포함하는 융합단백질
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제5항에 있어서, 상기 제1 Fc 영역 및 제2 Fc 영역 각각은 인간 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA, IgD 및 IgE로 이루어진 군으로부터 선택된 Fc 영역 유래인 융합단백질
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10
제5항에 있어서, 상기 제 1 Fc 영역 또는 제 2 Fc 영역의 CH3 도메인 변이는 다음의 군에서 선택된 하나 이상의 변이를 포함하고 변이 위치는 EU index에 따르는 것을 특징으로 하는 융합단백질:(1) 제 1 Fc 영역의 CH3 도메인 중 K360 위치에서 K360E로 치환; (2) 제1 Fc 영역의 CH3 도메인 중 K409 위치에서 K409W로 치환;(3) 제 2 Fc 영역의 CH3 도메인 중 E347 위치에서 E347R로 치환; 및(4) 제2 Fc 영역의 CH3 도메인 중 F405 위치에서 F405T로 치환 및 D399 위치에서의 D399V로 치환
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제10항에 있어서, 상기 제 1 Fc 영역 또는 제 2 Fc 영역의 CH3 도메인 중 다음을 추가로 포함하고 변이 위치는 EU index에 따르는 것을 특징으로 하는 융합단백질:(i) 제1 Fc 영역의 CH3 도메인 내 Y349 위치에 치환된 시스테인 (C); 또는(ii) 제2 Fc 영역의 CH3 도메인 내 S354 위치에 치환된 시스테인 (C)
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제5항에 있어서, 상기 제 1 Fc 영역 및 제 2 Fc 영역의 CH3 도메인 변이는 다음의 변이를 포함하고 변이 위치는 EU index에 따르는 것을 특징으로 하는 융합단백질:(1) 제 1 Fc 영역의 CH3 도메인 중 K360 위치에서 K360E로 치환, K409 위치에서 K409W로 치환; 및 (2) 제 2 Fc 영역의 CH3 도메인 중 E347 위치에서 E347R로 치환; 및 F405 위치에서 F405T로 치환 및 D399 위치에서의 D399V로 치환
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13
제5항에 있어서, 서열번호 5 내지 10으로 구성된 군에서 선택되는 서열을 포함하는 인터루킨21 변이체, 서열번호 1의 서열을 포함하는 제 1 Fc 영역 및 서열번호 2의 서열을 포함하는 제 2 Fc 영역을 포함하는 항체(immunoglobulin) 중쇄불변부위 (Fc) 쌍을 포함하는, 융합단백질
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제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 인터루킨21 변이체를 코딩하는 핵산
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제14항의 핵산을 포함하는 발현벡터
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제15항의 발현벡터를 포함하는, 형질전환 재조합 세포
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다음 단계를 포함하는 융합단백질의 제조방법:(a) 제16항의 세포를 배양하는 단계; 및(b) 상기 배양된 세포에서 융합단백질을 회수하는 단계
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제5항의 융합단백질을 코딩하는 핵산
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제18항의 핵산을 포함하는 발현벡터
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제19항의 발현벡터를 포함하는, 형질전환 재조합 세포
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21
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 인터루킨21 변이체 또는 제5항의 융합단백질을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 조성물
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22
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항의 인터루킨21 변이체 또는 제5항의 융합단백질을 면역세포에 처리하는 것을 포함하는 배양방법
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제22항에 있어서, 상기 면역세포는 T 세포, NK 세포, 사이토카인 유도 살해세포(Cytokine Induced Killer cell, CIK), 활성화 세포독성 T 림프구(Cytotoxic T Lymphocyte, CTL), 마크로파지, 종양 조직 내 침투 T 세포 (Tumor-Infiltrating Lymphocytes, TIL), 수지상세포로 구성된 군에서 선택된 하나 이상인 배양방법
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