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하나 또는 둘 이상의 아미노산 변이를 갖는 하이드로포빈 Srh1의 신호서열 C-말단에 알파-메이팅 인자(α-mating factor)의 신호서열이 융합된, 인간 인슐린 유사 성장인자-1(hIGF1) 분비 발현을 위한 아미노산 서열로 이루어진, 하이브리드 신호서열(hybrid signal sequence)
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제 1항에 있어서,상기 아미노산 변이는 하이드로포빈 Srh1 신호서열 N-말단의 2번째 아미노산 위치에 아르기닌(arginine)을 삽입한 것인, 하이브리드 신호서열(hybrid signal sequence)
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제 1항에 있어서,상기 하이드로포빈 Srh1은 트리코데르마 하르지아눔(Trichoderma harzianum)에서 유래된 것이고, 상기 알파-메이팅 인자는 효모(Saccharomyces cerevisiae)에서 유래된 것인, 하이브리드 신호 서열(hybrid signal sequence)
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제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항의 하이브리드 신호서열(hybrid signal sequence)을 코딩하는, 폴리뉴클레오티드
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제 4항에 있어서,상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 5의 염기서열로 이루어진 것인, 폴리뉴클레오티드
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제 4항의 폴리뉴클레오티드 및 인간 인슐린 유사 성장인자-1(hIGF1)을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 재조합 발현벡터
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제 6항에 있어서,상기 폴리뉴클레오티드는 2 내지 10회 반복되어 연결된 것인, 재조합 발현벡터
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제 7항에 있어서,상기 재조합 발현벡터는 서열번호 6의 염기서열로 이루어진 것인, 재조합 발현벡터
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제 6항의 재조합 발현벡터가 도입되어 재조합(homologous recombination)에 의해 형질전환된, 인간을 제외한, 형질전환체
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제 9항에 있어서,상기 형질전환체는 코마카타엘라 파피(Komagataella phaffii)인, 형질전환체
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11
제 4항의 재조합 발현벡터를 제작하는 단계;상기 재조합 발현벡터를 인간을 제외한 형질전환가능 숙주에 도입하여 형질전환하는 단계;상기 형질전환체를 배양하여 인간 인슐린 유사 성장인자-1(hIGF1)을 과발현하는 단계; 및과발현된 재조합 단백질을 정제하여 회수하는 단계;를 포함하는, 재조합 단백질의 제조방법
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제 11항의 재조합 단백질의 제조방법을 통해 제조된, 재조합 단백질
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제 12항에 있어서,상기 재조합 단백질은 하이브리드 신호서열(hybrid signal sequence)이 완전히 제거된 것인, 재조합 단백질
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