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혈액응고인자 13 활성도 측정용 칩 및 이를 이용한 혈액응고인자 13 활성도 측정방법

  • 기술번호 : KST2014040853
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 간질환, 출혈, 혈관 내 응고, 백혈병 등 혈액 응고와 관련되어 핵심적인 역할을 수행하는 것으로 알려진 혈액응고인자 13(FXIII)의 활성도 측정에 관한 것으로서, 특히 다수의 시료를 극소량만 사용하여 빠르고, 또한 고감도 분석을 할 수 있는 측정용 칩 개발과 분석방법에 관한 것이다. 기존에 FXIII의 활성도는 주로 ELISA를 통하여 이루어져 왔다. 그러나 이와 같은 방법은 활성도 측정에 시간이 많이 소요되고, 다량의 시료를 필요로 하고, 재현성이 떨어진다. 따라서 본 발명에서는 FXIII의 기질 중 하나인 피브리노겐을 어레이 형태로 제작하여 FXIII의 아미드전이반응(transamidation)을 유도시킴으로써 감도가 높은 형광으로 표지된 검출자를 이용해 형광값을 측정하여 세포나 혈액 내의 FXIII의 양을 측정한다. 따라서 본 발명은 극히 소량의 시료만으로 쉽고 빠르게 분석 가능 하며, 각종 질환 검사에 활용할 수 있다. 혈액응고인자 13, Factor XIII, FXIII, 피브리노겐
Int. CL G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) G01N 33/86 (2006.01)
CPC G01N 33/86(2013.01) G01N 33/86(2013.01) G01N 33/86(2013.01) G01N 33/86(2013.01) G01N 33/86(2013.01)
출원번호/일자 1020090018080 (2009.03.03)
출원인 강원대학교산학협력단, (주)대한임상의학센터
등록번호/일자 10-1096668-0000 (2011.12.14)
공개번호/일자 10-2010-0099533 (2010.09.13) 문서열기
공고번호/일자 (20111222) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.03.03)
심사청구항수 6

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 강원대학교산학협력단 대한민국 강원도 춘천시
2 (주)대한임상의학센터 대한민국 강원도 춘천시 강원대학길 *,

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 하권수 대한민국 강원도 춘천시
2 권미혜 대한민국 강원도 원주시 태

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이문섭 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****, ***호 제니스국제특허법률사무소 (봉천동, 청동빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 강원대학교산학협력단 대한민국 강원도 춘천시
2 (주)대한임상의학센터 대한민국 강원도 춘천시 강원대학길 *,
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2009.03.03 수리 (Accepted) 1-1-2009-0130970-36
2 보정요구서
Request for Amendment		 2009.03.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2009-0016294-21
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2009.04.02 수리 (Accepted) 1-1-2009-0198652-04
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2010.12.15 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2011.01.17 수리 (Accepted) 9-1-2011-0003459-83
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2011.03.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0154498-43
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2011.04.15 수리 (Accepted) 4-1-2011-5075634-10
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2011.05.19 수리 (Accepted) 1-1-2011-0375219-58
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2011.05.19 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0375222-96
10 등록결정서
Decision to grant		 2011.11.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0713121-69
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2011.12.13 수리 (Accepted) 4-1-2011-5249875-98
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2012.03.08 수리 (Accepted) 4-1-2012-5049179-27
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.05 수리 (Accepted) 4-1-2019-5230938-29
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번호 청구항
1 1
하기 단계들을 포함하는 혈액응고인자 13의 활성도 측정방법: a) 다수의 스폿(spot) 상에 혈액응고인자 13(Factor XIII)의 기질인 피브리노겐(fibrinogen)이 고정된 어레이(array) 칩을 준비하는 단계; b) 활성도 측정용 혈액응고인자 13 함유 시료와 트롬빈(trombin), Ca2+ 및 5-(바이오틴아미도)펜틸아민(5-(biotinamido)pentylamine)을 함유하는 반응용액을 상기 피브리노겐 상에 적하하여 피브리노겐의 글루타민과 5-(바이오틴아미도)펜틸아민의 사이의 아미드전이반응(transamidation)을 시키는 단계; 및 c) 상기 아미드전이반응 생성물의 말단부에 위치한 바이오틴에 분석용 표지물질을 도입한 다음 이의 분석을 통해 혈액응고인자 13의 활성도를 측정하는 단계
2 2
제 1항에 있어서, 상기 a)단계에서 피브리노겐을 고정한 후 피브리노겐이 결합되지 않은 스폿의 빈 부분을 블로킹(blocking) 용액으로 처리하여 블로킹시키는 것을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 혈액응고인자 13의 활성도 측정방법
3 3
제 1항에 있어서, 상기 c)단계에서 형광물질이 표지된 스트렙타비딘 또는 아비딘을 이용하는 것을 특징으로 하는 혈액응고인자 13의 활성도 측정방법
4 4
제 3항에 있어서, 상기 형광물질은 싸이3(Cy3), 싸이5(Cy5), 알렉사(Alexa), 보디피(BODIPY), 로다민(Rhodamine) 또는 큐-도트(Q-dot)에서 선택된 형광물질을 사용하고, 형광분석을 통해 혈액응고인자 13의 활성도를 측정하는 것을 특징으로 하는 혈액응고인자 13의 활성도 측정방법
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하기 단계들을 포함하는 혈액응고인자 13의 활성도 측정용 칩의 제조방법: a) 아미노 잔기를 갖는 3-아미노프로필-트리메톡시실란을 기판의 표면에 도입하는 단계; b) 상기 기판의 표면에 소정의 간격으로 천공된 테이프를 부착하여 다수의 스폿이 형성된 어레이 칩을 제조하는 단계; 및 c) 상기 스폿 상에 글루타민을 포함하는 혈액응고인자 13의 기질단백질을 도입하는 단계
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아미노 잔기를 갖는 3-아미노프로필-트리메톡시실란이 도입된 기판의 표면에 소정의 간격으로 천공된 테이프를 부착하여 다수의 스폿을 형성하고, 상기 스폿의 단부에 글루타민을 포함하는 혈액응고인자 13의 기질단백질을 도입하여 제조되는 혈액응고인자 13 활성도 측정용 칩
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