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패혈증 단백질 치료제의 효능 분석 및 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2014046171
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 LRR(Leucine rich repeat) 모듈의 반복적 조합에 의하여 구성된, LRR 단백질의 패혈증 저해 단백질 치료제로서의 효능을 분석하고, 서열변이 라이브러리로부터 우수한 저해효능을 보이는 단백질 치료제를 스크리닝하는 어세이 시스템의 구축에 관한 것이다. 보다 구체적으로, LPS 신호 전달 수용체가 표면에 발현된 세포주를 이용한 어세이 시스템에 정제한 MD-2 단백질을 첨가하는 단계를 포함하는 패혈증 단백질 치료제의 효능 분석 방법 또는 스크리닝 방법, THP-1 세포주에 정제한 외래 MD-2 단백질을 첨가하는 단계를 포함하는 패혈증 단백질 치료제의 효능 분석 방법 또는 스크리닝 방법, 상기 효능 분석용 또는 스크리닝용 세포주, 상기 세포주 및 정제한 외래 MD-2를 포함하는 패혈증 치료제 스크리닝용 또는 효능 분석용 키트에 관한 것이다.
Int. CL G01N 33/15 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020110025446 (2011.03.22)
출원인 한국생명공학연구원, 한국과학기술원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2012-0107741 (2012.10.04) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.01.16)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
2 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이승구 대한민국 대전광역시 유성구
2 김학성 대한민국 대전광역시 유성구
3 김유정 대한민국 대전광역시 유성구
4 이상철 대한민국 대전광역시 유성구
5 한지은 대한민국 대전광역시 유성구
6 이상준 대한민국 대전광역시 유성구
7 김수진 대한민국 대전광역시 유성구
8 손정훈 대한민국 대전광역시 유성구
9 하재석 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2011.03.22 수리 (Accepted) 1-1-2011-0210122-59
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2011.03.30 수리 (Accepted) 1-1-2011-0232020-16
3 보정요구서
Request for Amendment		 2011.03.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2011-0028009-10
4 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2011.04.14 수리 (Accepted) 1-1-2011-0274754-72
5 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)		 2012.01.16 수리 (Accepted) 1-1-2012-0040555-51
6 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2012.08.16 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
7 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2012.09.21 수리 (Accepted) 9-1-2012-0072906-21
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
9 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2013.06.18 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0414275-70
10 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2013.08.19 수리 (Accepted) 1-1-2013-0750030-47
11 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2013.09.23 수리 (Accepted) 1-1-2013-0860733-27
12 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2013.10.04 수리 (Accepted) 1-1-2013-0902190-10
13 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2013.10.04 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0902191-55
14 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2014.02.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0143461-11
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
19 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
20 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
21 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) LPS(lipopolysaccharide) 신호 전달 수용체가 표면에 발현된 세포주로, NF-κB 결합 모티프가 결합된 프로모터에 리포터 단백질을 코딩하는 유전자가 작동가능하게 연결된 발현 카세트를 포함하는 벡터, 및 NF-κB 결합 모티프가 없는 프로모터에 리포터 단백질을 코딩하는 유전자가 작동가능하게 연결된 발현 카세트를 포함하는 벡터를 도입하는 단계;(b) 정제 MD-2(Myeloid differentiation protein-2), LPS 및 패혈증 단백질 치료제들을 미리 섞어서 준비하는 단계;(c) 상기 (b) 단계에서 준비된 혼합액을 상기 (a) 단계의 세포주에 접촉시키는 단계; 및(d) 상기 단백질 치료제와 접촉시킨 실험군이 비교하고자 하는 패혈증 단백질 치료제를 접촉시키지 않은 대조군에 비해 리포터 단백질의 발현양이 적은 경우, 상기 실험군의 패혈증 단백질 치료제의 기능이 대조군의 패혈증 단백질 치료제보다 효능이 좋은 것으로 판단하는 단계를 포함하는, 패혈증 단백질 치료제의 효능 분석 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 (a) 단계의 리포터 단백질 각각은 서로 다른 리포터 단백질로서, 반딧불이 루시퍼레이즈 및 레닐라 루시퍼레이즈인 것인 방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 (d) 단계는 NF-κB 결합 모티프가 결합된 프로모터에 작동가능하게 연결된 리포터 단백질의 발광값을 NF-κB 결합 모티프가 없는 프로모터에 작동가능하게 연결된 리포터 단백질의 발광값으로 나눈 값을 비교하여, 대조군에 비해 낮은 경우, 패혈증 단백질 치료제의 효능이 좋은 것으로 판단하는 것인 방법
4 4
(a) THP-1 세포주를 PMA(phorbol 12-myristate 13-acetate)로 분화시키는 단계;(b) MD-2(Myeloid differentiation protein-2), LPS 및 패혈증 단백질 치료제들을 미리 섞어서 준비하는 단계;(c) 상기 (b) 단계에서 준비된 혼합액을 상기 (a) 단계의 세포주에 접촉시키는 단계; 및(d) 상기 패혈증 단백질 치료제와 접촉시킨 실험군이 비교하고자 하는 패혈증 단백질 치료제를 접촉시키지 않은 대조군에 비해 TNF-α를 분비하는 양이 적은 경우, 상기 실험군의 패혈증 단백질 치료제의 기능이 대조군의 패혈증 단백질 치료제보다 효능이 좋은 것으로 판단하는 단계를 포함하는, 패혈증 단백질 치료제의 효능 분석 방법
5 5
제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 패혈증 단백질 치료제는 LRR(Leucine rich repeat) 패밀리 단백질인 것인 방법
6 6
제5항에 있어서, 상기 LRR 패밀리 단백질은 인터날린 B 단백질의 N-말단, VLR(Variable Lymphocyte Receptor) 단백질의 변형된 반복모듈 및 VLR 단백질의 C-말단이 융합된, In-VLR5-c인 것인 방법
7 7
제4항에 있어서, 상기 TNF-α의 측정은 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)방법에 의한 것인 방법
8 8
(a) LPS 신호 전달 수용체가 표면에 발현된 세포주로, NF-κB 결합 모티프가 결합된 프로모터에 리포터 단백질을 코딩하는 유전자가 작동가능하게 연결된 발현 카세트를 포함하는 벡터 및 NF-κB 결합 모티프가 없는 프로모터에 리포터 단백질을 코딩하는 유전자가 작동가능하게 연결된 발현 카세트를 포함하는 벡터를 도입하는 단계;(b) MD-2(Myeloid differentiation protein-2), LPS 및 패혈증 치료제 후보물질을 함께 또는 패혈증 치료제 후보물질 없이 미리 섞는 단계;(c) 상기 (b) 단계에서 준비된 혼합액을 상기 (a) 단계의 세포주에 접촉시키는 단계; 및(d) 상기 후보물질과 접촉시킨 실험군이 후보물질과 접촉시키지 않은 대조군에 비해 리포터 단백질의 발현양이 적은 경우, 상기 후보물질을 패혈증 치료제라고 판단하는 단계를 포함하는, 패혈증 치료제의 스크리닝 방법
9 9
제8항에 있어서, 상기 (a) 단계의 리포터 단백질 각각은 서로 다른 리포터 단백질로서, 반딧불이 루시퍼레이즈 및 레닐라 루시퍼레이즈인 것인 방법
10 10
제8항에 있어서, 상기 (d) 단계는 NF-κB 결합 모티프가 결합된 프로모터에 작동가능하게 연결된 리포터 단백질의 발광값을 NF-κB 결합 모티프가 없는 프로모터에 작동가능하게 연결된 리포터 단백질의 발광값으로 나눈 값을 비교하여, 대조군에 비해 낮은 경우, 패혈증 치료제라고 판단하는 것인 방법
11 11
(a) THP-1 세포주를 PMA(phorbol 12-myristate 13-acetate)로 분화시키는 단계;(b) MD-2(Myeloid differentiation protein-2), LPS 및 패혈증 치료제 후보물질을 함께 또는 패혈증 치료제 후보물질 없이 미리 섞는 단계;(c) 상기 (b) 단계에서 준비된 혼합액을 상기 (a) 단계의 세포주에 접촉시키는 단계; 및(d) 상기 후보물질과 접촉시킨 실험군이 후보물질과 접촉시키지 않은 대조군에 비해 TNF-α를 분비하는 양이 적은 경우, 상기 후보물질을 패혈증 치료제라고 판단하는 단계를 포함하는, 패혈증 치료제의 스크리닝 방법
12 12
제8항 또는 제11항에 있어서, 상기 패혈증 치료제 후보물질은 LRR(Leucine rich repeat) 패밀리 단백질인 것인 방법
13 13
제12항에 있어서, 상기 LRR 패밀리 단백질은 반복단백질 TV3, 또는 인터날린 B 단백질의 N-말단, VLR(Variable Lymphocyte Receptor) 단백질의 변형된 반복모듈 및 VLR 단백질의 C-말단이 융합된 In-VLR5-c인 것인 방법
14 14
제11항에 있어서, 상기 TNF-α의 측정은 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) 방법에 의한 것인 방법
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4 WO2012128577 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
5 WO2012128580 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 US2014088292 US 미국 DOCDBFAMILY
2 US9441017 US 미국 DOCDBFAMILY
3 WO2012128577 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
4 WO2012128577 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
5 WO2012128580 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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1 교육과학기술부 한국생명공학연구원 미래원천기술개발사업 통합적 단백질 설계를 위한 고속친화도 분석 및 스크리닝 기술 개발