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(i) 그라핀 산화물(graphene oxide); 및(ii) 제1말단에는 그라핀 산화물과 결합 가능한 단일가닥 DNA 꼬리(tail)를 갖고, 제2말단 쪽에는 그라핀 산화물과 인접하면 소광되는 발광 표지물질이 표지되고, 제1말단과 제2말단 사이에 효소 절단 부위를 포함하는 이중가닥 DNA 기질(substrate)을 포함하는, DNA 절단효소 또는 메틸전이효소 활성 분석용 키트
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제1항에 있어서, 상기 DNA 기질은 효소 인식 부위를 더 포함하는 것인 키트
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제1항에 있어서, 상기 표지물질은 형광물질인 것인 키트
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제1항에 있어서, 효소반응용 완충용액을 추가로 포함하는 것인 키트
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제1항에 있어서, DNA 절단효소를 추가로 포함하는 것인 키트
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6
제1항에 있어서, DNA 메틸전이효소를 추가로 포함하는 것인 키트
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7
(i) 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 기재된 키트를 준비하는 제1단계;(ii) 상기 키트에서 단일가닥 DNA 꼬리(tail)을 통해 DNA 기질(substrate)을 그라핀 산화물에 연결시키는 단계로서, 이로 인해 DNA 기질에 표지된 발광 표지물질이 인접한 그라핀 산화물에 의해 소광된 제2단계;(iii) 상기 DNA 기질에 분석 효소를 처리하는 제3단계; 및(iv) 제3단계의 처리 결과물의 발광여부 또는 발광정도를 확인하는 제4단계를 포함하고,이때, 제3단계에서, DNA 기질은 분석 효소에 의해 효소 절단 부위가 절단되거나 절단되지 아니할 수 있고,절단된 경우 표지물질로 표지된 제2말단쪽 부분이 단일가닥 DNA 꼬리를 갖는 제1말단쪽 부분으로부터 분리되어 발광하고,제4단계에서 발광이 검출되면 분석 효소가 DNA 절단효소인 것으로 판정하는 것이 특징인 DNA 절단효소 스크리닝 방법
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8
(i) 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 기재된 키트를 준비하는 제1단계;(ii) 상기 키트에 포함된 DNA 기질에 분석 효소를 처리하는 제2단계;(iii) 제2단계의 결과물에 그라핀 산화물을 처리하는 제3단계; 및(iv) 제3단계의 처리 결과물의 발광여부 또는 발광정도를 확인하는 제4단계를 포함하고,이때, 제2단계에서, DNA 기질은 분석 효소에 의해 효소 절단 부위가 절단되거나 절단되지 아니할 수 있고, 절단된 경우 표지물질로 표지된 제2말단쪽 부분이 단일가닥 DNA 꼬리를 갖는 제1말단쪽 부분으로부터 분리되고,제3단계에서 단일가닥 DNA 꼬리를 가진 DNA 기질이 그라핀 산화물에 결합되고, 이때 그라핀 산화물에 결합된 DNA 기질에 표지물질이 연결되어 있으면 소광되고, 표지물질이 분석 효소에 의해 절단되어 분리되면 발광하고,제4단계에서 발광이 검출되면 분석 효소가 DNA 절단효소인 것으로 판정하는 것이 특징인 DNA 절단효소 스크리닝 방법
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제7항에 있어서, 제4단계에서, 발광 정도를 측정하여 분석 효소의 DNA 절단 활성 정도를 측정하는 것이 특징인 DNA 절단효소 스크리닝 방법
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(i) 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 키트를 준비하는 제1단계;(ii) 상기 키트에서 단일가닥 DNA 꼬리(tail)을 통해 DNA 기질(substrate)을 그라핀 산화물에 연결시키는 단계로서, 이로 인해 DNA 기질에 표지된 발광 표지물질이 인접한 그라핀 산화물에 의해 소광된 제2단계;(iii) 상기 DNA 기질에 분석 효소를 처리하는 제3단계;(iv) 제3단계 처리 결과물에 DNA 절단효소를 처리하는 제4단계;(v) 제4단계의 처리 결과물의 발광여부 또는 발광정도를 확인하는 제5단계를 포함하고,이때, 제3단계에서 DNA 기질이 분석 효소에 의해 메틸화된 경우, 제4단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되지 아니할 수 있고,제3단계에서 DNA 기질이 분석 효소에 의해 메틸화되지 않는 경우, 제4단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되며, 표지물질로 표지된 제2말단쪽 부분이 단일가닥 DNA 꼬리를 갖는 제1말단쪽 부분으로부터 분리되어 발광하고,제5단계에서 소광이 검출되면 분석 효소가 DNA 메틸전이효소인 것으로 판정하는 것이 특징인 DNA 메틸전이효소를 스크리닝하는 방법
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(i) 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 키트를 준비하는 제1단계;(ii) 상기 키트에 포함된 DNA 기질에 분석 효소를 처리하는 제2단계;(iii) 제2단계 처리 결과물에 DNA 절단효소를 처리하는 제3단계; (iv) 제3단계의 처리 결과물에 그라핀 산화물을 처리하는 제4단계; 및(v) 제4단계의 처리 결과물의 발광여부 또는 발광정도를 확인하는 제5단계를 포함하고,이때, 제2단계에서 DNA 기질이 분석 효소에 의해 메틸화된 경우, 제3단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되지 아니할 수 있고,제2단계에서 DNA 기질이 분석 효소에 의해 메틸화되지 않는 경우, 제3단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되며, 표지물질로 표지된 제2말단쪽 부분이 단일가닥 DNA 꼬리를 갖는 제1말단쪽 부분으로부터 분리되고,제4단계에서, 단일가닥 DNA 꼬리를 가진 DNA 기질이 그라핀 산화물에 결합되고, 이때 그라핀 산화물에 결합된 DNA 기질에 표지물질이 연결되어 있으면 소광되고, 표지물질이 제2단계의 효소에 의해 절단되어 분리되면 발광하고,제5단계에서 소광이 검출되면 분석 효소가 DNA 메틸전이효소인 것으로 판정하는 것이 특징인 DNA 메틸전이효소를 스크리닝하는 방법
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제10항에 있어서, 제5단계에서, 소광 정도를 측정하여 분석 효소의 DNA 메틸전이 활성 정도를 측정하는 것이 특징인 DNA 메틸전이효소 스크리닝 방법
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(i) 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 키트를 준비하는 제1단계;(ii) 상기 키트에서 단일가닥 DNA 꼬리(tail)을 통해 DNA 기질(substrate)을 그라핀 산화물에 연결시키는 단계로서, 이로 인해 DNA 기질에 표지된 발광 표지물질이 인접한 그라핀 산화물에 의해 소광된 제2단계;(iii) DNA 절단효소에 분석물질을 처리하는 제3단계; (iv) 상기 DNA 기질에 제3단계 처리 결과물을 처리하는 제4단계; 및(v) 제4단계의 처리 결과물의 발광여부 또는 발광정도를 확인하는 제5단계를 포함하고,이때, 제3단계에서 분석물질이 DNA 절단효소의 활성을 억제하는 경우, 제4단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되지 아니할 수 있고, 이때 그라핀 산화물에 결합된 DNA 기질에 표지물질이 연결되어 있어서 소광을 유지하고,제3단계에서 분석물질이 DNA 절단효소의 활성을 억제하지 않는 경우, 제4단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되며, 표지물질로 표지된 제2말단쪽 부분이 단일가닥 DNA 꼬리를 갖는 제1말단쪽 부분으로부터 분리되어 발광하고,제5단계에서 소광이 유지되면 분석물질이 DNA 절단효소 억제제인 것으로 판정하는 것이 특징인 DNA 절단효소 억제제를 스크리닝하는 방법
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(i) 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 키트를 준비하는 제1단계;(ii) DNA 절단효소에 분석물질을 처리하는 제2단계;(iii) 상기 키트에 포함된 DNA 기질에 제2단계 처리 결과물을 처리하는 제3단계;(iv) 제3단계의 처리 결과물에 그라핀 산화물을 처리하는 제4단계; 및(v) 제4단계의 처리 결과물의 발광여부 또는 발광정도를 확인하는 제5단계를 포함하고,이때, 제2단계에서 분석물질이 DNA 절단효소의 활성을 억제하는 경우, 제3단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되지 아니할 수 있고, 제4단계에서, 단일가닥 DNA 꼬리를 가진 DNA 기질이 그라핀 산화물에 결합되고, 이때 그라핀 산화물에 결합된 DNA 기질에 표지물질이 연결되어 있어서 소광되고,제2단계에서 분석물질이 DNA 절단효소의 활성을 억제하지 않는 경우, 제3단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되며, 표지물질로 표지된 제2말단쪽 부분이 단일가닥 DNA 꼬리를 갖는 제1말단쪽 부분으로부터 분리되어 발광하고,제5단계에서 소광이 검출되면 분석물질이 DNA 절단효소 억제제인 것으로 판정하는 것이 특징인 DNA 절단효소 억제제를 스크리닝하는 방법
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(i) 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 기재된 키트를 준비하는 제1단계;(ii) 상기 키트에서 단일가닥 DNA 꼬리(tail)을 통해 DNA 기질(substrate)을 그라핀 산화물에 연결시키는 단계로서, 이로 인해 DNA 기질에 표지된 발광 표지물질이 인접한 그라핀 산화물에 의해 소광된 제2단계;(iii) DNA 메틸전이효소에 분석물질을 처리하는 제3단계;(iv) 상기 DNA 기질에 제3단계 처리 결과물을 처리하는 제4단계;(v) 제4단계 처리 결과물에 DNA 절단효소를 처리하는 제5단계; 및(vi) 제5단계의 처리 결과물의 발광여부 또는 발광정도를 확인하는 제6단계를 포함하고,이때, 제3단계에서 분석물질이 DNA 메틸전이효소의 활성을 억제하는 경우, 제4단계에서 DNA 기질은 DNA 메틸전이효소에 의해 메틸화되지 아니하여, 제5단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되며, 표지물질로 표지된 제2말단쪽 부분이 단일가닥 DNA 꼬리를 갖는 제1말단쪽 부분으로부터 분리되어 발광하고,제3단계에서 분석물질이 DNA 메틸전이효소의 활성을 억제하지 않는 경우, 제4단계에서 DNA 기질은 DNA 메틸전이효소에 의해 메틸화되어, 제5단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되지 아니하여 그라핀 산화물에 결합된 DNA 기질에 표지물질이 연결되어 있어서 소광을 유지하고,제6단계에서 발광이 검출되면 분석물질이 DNA 메틸전이효소 억제제인 것으로 판정하는 것이 특징인 DNA 메틸전이효소 억제제를 스크리닝하는 방법
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(i) 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 기재된 키트를 준비하는 제1단계;(ii) DNA 메틸전이효소에 분석물질을 처리하는 제2단계;(iii) 상기 키트에 포함된 DNA 기질에 제2단계 처리 결과물을 처리하는 제3단계;(iv) 제3단계 처리 결과물에 DNA 절단효소를 처리하는 제4단계;(v) 제4단계의 처리 결과물에 그라핀 산화물을 처리하는 제5단계; 및(vi) 제5단계의 처리 결과물의 발광여부 또는 발광정도를 확인하는 제6단계를 포함하고,이때, 제2단계에서 분석물질이 DNA 메틸전이효소의 활성을 억제하는 경우, 제3단계에서 DNA 기질은 DNA 메틸전이효소에 의해 메틸화되지 아니하여, 제4단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되며, 표지물질로 표지된 제2말단쪽 부분이 단일가닥 DNA 꼬리를 갖는 제1말단쪽 부분으로부터 분리되어 발광하고,제2단계에서 분석물질이 DNA 메틸전이효소의 활성을 억제하지 않는 경우, 제3단계에서 DNA 기질은 DNA 메틸전이효소에 의해 메틸화되어, 제4단계에서 DNA 기질은 효소 절단 부위가 절단되지 아니할 수 있고, 제5단계에서, 단일가닥 DNA 꼬리를 가진 DNA 기질이 그라핀 산화물에 결합되고, 이때 그라핀 산화물에 결합된 DNA 기질에 표지물질이 연결되어 있어서 소광되고,제6단계에서 발광이 검출되면 분석물질이 DNA 메틸전이효소 억제제인 것으로 판정하는 것이 특징인 DNA 메틸전이효소 억제제를 스크리닝하는 방법
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제8항에 있어서, 제4단계에서, 발광 정도를 측정하여 분석 효소의 DNA 절단 활성 정도를 측정하는 것이 특징인 DNA 절단효소 스크리닝 방법
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제11항에 있어서, 제5단계에서, 소광 정도를 측정하여 분석 효소의 DNA 메틸전이 활성 정도를 측정하는 것이 특징인 DNA 메틸전이효소 스크리닝 방법
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