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타입 III 폴리케타이드 합성 효소를 코딩하는 유전자가 게놈에 삽입되어 있거나; 또는 타입 III 폴리케타이드 합성 효소를 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터가 도입되어 있는, 말로닐-코에이 검출용 재조합 미생물
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제1항에 있어서, 상기 타입 III 폴리케타이드 합성 효소는 스트렙토마이세스 그리세우스(Streptomyces griseus), 스트렙토마이세스 코엘리컬러(Streptomyces coelicolor), 스트렙토마이세스 아베르미틸리스(Streptomyces avermitilis), 사카로폴리스포라 에리트레아(Saccharopolyspora erythraea), 스트렙토마이세스 퓨세티우스(Streptomyces peucetius) 및 스트렙토마이세스 아쿨레오라투스(Streptomyces aculeolatus)로 구성된 군에서 선택된 미생물 유래의 RppA; 슈도모나스 플루오레센스(Pseudomonas fluorescens)유래의 PhlD(polyketide synthase);아미코라톱시스 메디테라네이(Amycolatopsis mediterranei) 유래의 DpgA(polyketide synthase); 레움 팔마툼(Rheum palmatum) 유래의 ALS(aloesone synthase); 또는 알로에 아르보레센스(Aloe arborescens)유래의 PCS(5,7-dihydroxy-2-methylchromone synthase), OKS(octaketide synthase), PKS3(aloesone synthase), PKS4(octaketide synthase 2) 또는 PKS5(octaketide synthase 3);인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
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제1항에 있어서, 상기 재조합 벡터는 tac, trc, T7, BAD, λPR 및 앤더슨 합성 프로모터로 구성된 군에서 선택된 프로모터에 상기 타입 III 폴리케타이드 합성 효소를 코딩하는 유전자가 작동 가능하도록 연결된 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
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제1항에 있어서, 상기 재조합 미생물은 대장균, 리조비움(Rhizobium), 비피도박테리움 (Bifidobacterium), 로도코커스 (Rhodococcus), 칸디다 (Candida), 에르위니아(Erwinia), 엔테로박터 (Enterobacter), 파스테렐라(Pasteurella), 맨하이미아 (Mannheimia), 액티노바실러스 (Actinobacillus), 아그레가티박터(Aggregatibacter), 잔토모나스(Xanthomonas), 비브리오(Vibrio), 슈도모나스(Pseudomonas), 아조토박터(Azotobacter), 애시네토박터(Acinetobacter), 랄스토니아(Ralstonia), 아그로박테리움(Agrobacterium), 로도박터(Rhodobacter), 자이모모나스(Zymomonas), 바실러스(Bacillus), 스테필로코커스(Staphylococcus), 락토코커스(Lactococcus), 스트렙토코커스(Streptococcus), 락토바실러스(Lactobacillus), 클로스트리디움(Clostridium), 코리네박테리움(Corynebacterium), 스트렙토마이세스(Streptomyces), 비피도박테리움(Bifidobacterium), 사이아노박테리움(Cyanobacterium) 및 사이클로박테리움(Cyclobacterium)으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
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하기 단계를 포함하는 말로닐-코에이 생산 유도물질의 스크리닝하는 방법:(a) 제1항의 재조합 미생물을 배양하는 단계;(b) 상기 재조합 미생물에 후보물질을 첨가하는 단계; (c) 상기 후보물질 첨가 후의 재조합 미생물 배양 상층액과 상기 후보물질 첨가 전의 재조합 미생물 배양 상층액의 색을 비교하는 단계; 및(d) 상기 후보물질 첨가 후의 재조합 미생물 배양 상층액이 상기 후보물질 첨가 전의 재조합 미생물 배양 상층액에 비해 더 붉은 색을 나타내는 경우의 후보물질을 말로닐-코에이 생산 유도물질로 선별하는 단계
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제5항에 있어서, 상기 (c) 단계의 색은 육안으로 비교하는 것을 특징으로 하는 방법
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제5항에 있어서, 상기 (c) 단계의 색은 흡광도를 측정하여 비교하고,상기 (d) 단계는 상기 후보물질 첨가 후 흡광도가 후보물질 첨가 전 흡광도에 비해 증가하는 경우의 후보물질을 말로닐-코에이 생산 유도물질로 선별하는 것을 특징으로 하는 방법
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하기 단계를 포함하는 말로닐-코에이 생산능 증가에 관여하는 유전자의 스크리닝 방법:(a) 제1항의 재조합 미생물에 상기 재조합 미생물 내 유전자 발현을 변화시키는 유전자 조절 라이브러리를 도입하여 재조합 미생물 내 유전자 발현이 변화된 재조합 미생물 라이브러리를 제작하는 단계;(b) 상기 제작된 재조합 미생물 라이브러리를 배양하여 배양 상층액의 흡광도를 측정하고, 유전자 조절 라이브러리가 도입되기 전의 재조합 미생물을 배양하여 배양 상층액의 색을 비교하는 단계; 및(c) 상기 유전자 조절 라이브러리가 도입되기 전의 재조합 미생물의 배양 상층액의 색에 비해 붉은 색이 증가하는 경우의 재조합 미생물 라이브러리에 도입된 유전자를 선별하는 단계
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제8항에 있어서, 상기 (b) 단계의 색은 육안으로 비교하는 것을 특징으로 하는 방법
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제8항에 있어서,상기 (b) 단계의 색은 흡광도를 측정하여 비교하고,상기 (c) 단계에서는 상기 유전자 조절 라이브러리가 도입되기 전의 재조합 미생물의 배양 상층액의 흡광도에 비해 흡광도가 증가하는 경우의 재조합 미생물 라이브러리에 도입된 유전자를 선별하는 것을 특징으로 하는 방법
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제8항에 있어서, 상기 유전자 조절 라이브러리는 sRNA 라이브러리, 게놈 라이브러리, cDNA 라이브러리, gRNA 라이브러리, 및 넉아웃 또는 돌연변이 제작용 올리고뉴클레오티드 라이브러리로 구성된 군에서 선택되는 라이브러리인 것을 특징으로 하는 방법
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