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앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법 및 검출키트

  • 기술번호 : KST2015123313
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 앱타머(aptamer)를 이용한 표적 단백질 검출 방법 및 검출키트에 관한 것으로, 구체적으로 표적 단백질에 결합하는 DNA 앱타머, 앱타머의 일부에 상보적인 단일가닥 DNA, 상기 단일가닥 DNA에 상보적인 단일가닥 RNA 및 RNase H를 이용한 표적 단백질 검출 방법 및 검출키트에 관한 것으로, 본 발명의 DNA 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법은 기존의 항체를 이용한 방법에 비해 간편하고 경제적이며 반복적인 RNase H의 작용에 의한 형광 세기 증폭으로 고감도의 표적 단백질 검출에 이용될 수 있다. 앱타머(aptamer), 형광물질(fluorescence), 신호 증폭(signal amplification), RNase H, 알파-트롬빈(alpha-thrombin), 단일가닥 RNA.
Int. CL C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
CPC G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01)
출원번호/일자 1020070025105 (2007.03.14)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-0896987-0000 (2009.05.04)
공개번호/일자 10-2008-0084029 (2008.09.19) 문서열기
공고번호/일자 (20090514) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2007.03.14)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 안대로 대한민국 서울 성북구
2 양은경 대한민국 서울 서초구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2007.03.14 수리 (Accepted) 1-1-2007-0206191-11
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2007.12.18 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2008.01.14 수리 (Accepted) 9-1-2008-0001150-41
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2008.04.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0230232-95
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2008.06.23 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2008-0447924-57
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2008.06.23 수리 (Accepted) 1-1-2008-0447926-48
7 최후의견제출통지서
Notification of reason for final refusal
2008.10.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0551223-79
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2008.11.28 수리 (Accepted) 1-1-2008-0824825-23
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2008.11.28 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2008-0824824-88
10 등록결정서
Decision to grant
2009.04.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2009-0183997-35
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2009.12.15 수리 (Accepted) 4-1-2009-5247056-16
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
1) 표적 단백질에 결합하며 5'-말단이 연장된 DNA 앱타머(aptamer) 및 상기 앱타머의 말단 부분 및 연장된 부분에 상보적인 G-DNA(Guard-DNA)를 결합시켜 이중가닥 DNA를 형성하는 단계; 2) 단계 1)의 G-DNA에 상보적이며 형광물질(fluorophore)과 형광소멸물질(quencher)이 결합된 단일가닥 RNA에 표적 단백질이 포함된 시료를 처리하는 단계; 3) RNase H를 처리하는 단계; 및 4) 단계 2)의 시료 내의 형광의 세기를 측정하는 단계를 포함하는 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법
2 2
삭제
3 3
삭제
4 4
제 1항에 있어서, 단계 2)의 단일가닥 RNA는 G-DNA의 사슬 길이보다 길지 않은 것을 특징으로 하는 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법
5 5
제 1항에 있어서, 단계 2)의 단일가닥 RNA는 5'-말단에는 형광물질, 3'-말단에는 형광소멸물질로 표지된 단일가닥 RNA(F-RNA-Q)인 것을 특징으로 하는 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법
6 6
제 5항에 있어서, 형광물질은 플루오레세인(fluorescein), 테트라메틸로다민(tetramethylrhodamine), Cy5, Cy3 및 텍사스 레드(Texas Red)로 이루어진 군으로부터 선택되어지는 것을 특징으로 하는 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법
7 7
제 5항에 있어서, 형광소멸물질은 댑실(dabsyl), 댑실(dabcyl) 및 블랙 형광소멸물질(black quencher)로 이루어진 군으로부터 선택되어지는 것을 특징으로 하는 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법
8 8
제 5항에 있어서, 형광소멸물질은 FRET(fluorescence resonance energy transfer) 작용을 하는 형광물질인 것을 특징으로 하는 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법
9 9
제 1항에 있어서, 단계 2)의 표적 단백질이 포함된 시료는 항체, 리간드, 천연화합물, 추출물, 합성 펩타이드, 신약 후보물질 또는 단백질 중 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법
10 10
제 1항에 있어서, 단계 4)의 형광의 세기는 트라이애드 멀티모드 디텍터(TRIAD Multimode Detector), 왈락/빅터 형광(Wallac/Victor Fluorescence) 또는 퍼킨-엘머 LB50B 형광분광광도계(Perkin-Elmer LB50B luminescence spectrometer)를 이용하여 측정되어지는 것을 특징으로 하는 앱타머를 이용한 표적 단백질 검출 방법
11 11
a) 표적 단백질에 결합하며 5'-말단이 연장된 DNA 앱타머(aptamer) 및 상기 앱타머의 말단 부분 및 연장된 부분에 상보적인 G-DNA로 구성된 이중가닥 DNA; b) 형광물질과 형광소멸물질(quencher)이 결합되며 상기 G-DNA에 상보적인 단일가닥 RNA; 및 c) RNase H를 포함하는 표적 단백질 검출키트
12 12
삭제
13 13
삭제
14 14
제 11항에 있어서, a)의 표적 단백질은 항체, 리간드, 천연화합물, 추출물, 합성 펩타이드, 신약 후보물질 또는 단백질 등에 포함되어 있는 것임을 특징으로 하는 표적 단백질 검출키트
15 15
제 11항에 있어서, b)의 단일가닥 RNA는 a)의 G-DNA와 상보적인 것을 특징으로 하는 표적 단백질 검출키트
16 16
제 11항에 있어서, b)의 단일가닥 RNA는 a)의 G-DNA의 사슬 길이보다 길지 않은 것을 특징으로 하는 표적 단백질 검출키트
17 17
제 11항에 있어서, b)의 형광물질은 단일가닥 RNA의 5'-말단에 표지된 것을 특징으로 하는 표적 단백질 검출키트
18 18
제 17항에 있어서, 형광물질은 플루오레세인(fluorescein), 테트라메틸로다민(tetramethylrhodamine), Cy5, Cy3 및 텍사스 레드(Texas Red)로 이루어진 군으로부터 선택되어지는 것을 특징으로 하는 표적 단백질 검출키트
19 19
제 11항에 있어서, b)의 형광소멸물질은 단일가닥 RNA의 3'-말단에 표지된 것을 특징으로 하는 표적 단백질 검출키트
20 20
제 19항에 있어서, 형광소멸물질은 댑실(dabsyl), 댑실(dabcyl) 및 블랙 형광소멸물질(black quencher)로 이루어진 군으로부터 선택되어지는 것을 특징으로 하는 표적 단백질 검출키트
21 21
제 19항에 있어서, 형광소멸물질은 FRET(fluorescence resonance energy transfer) 작용을 하는 형광물질인 것을 특징으로 하는 표적 단백질 검출키트
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP01972693 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
2 EP01972693 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 JP20259496 JP 일본 FAMILY
4 US07642056 US 미국 FAMILY
5 US20080261225 US 미국 FAMILY
6 WO2008111818 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP1972693 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
2 EP1972693 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
3 JP2008259496 JP 일본 DOCDBFAMILY
4 US2008261225 US 미국 DOCDBFAMILY
5 US7642056 US 미국 DOCDBFAMILY
6 WO2008111818 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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