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디클로페낙에 특이적으로 결합하는 DNA 앱타머 및 그 제조방법

  • 기술번호 : KST2015131814
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 디클로페낙에 특이적으로 결합하는 DNA 앱타머에 관한 것으로, 상세하게는 랜던 DNA 라이브러리로부터 선택된 디클로페낙에 특이적으로 결합하는 DNA 앱타머 및 그 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 랜덤 DNA pool로부터 디클로페낙에 대해 특이적으로 높은 친화도를 보이는 DNA 앱타머를 SELEX process의 변형된 방법인 FluMag-SELEX를 이용하여 선별하고, 선별된 DNA 앱타머들의 염기서열, 특성 및 디클로페낙에 대한 결합력을 분석하였다. 따라서 본 발명의 DNA 앱타머를 이용하여 수생태계에 잔류하는 의약물, 특히 디클로페낙의 검출 및 제거를 보다 효과적으로 수행할 수 있다. 디클로페낙, DNA 앱타머, SELEX, 자성비드, 잔류의약품
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
CPC C12N 15/115(2013.01) C12N 15/115(2013.01) C12N 15/115(2013.01) C12N 15/115(2013.01)
출원번호/일자 1020090003327 (2009.01.15)
출원인 고려대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1024860-0000 (2011.03.18)
공개번호/일자 10-2010-0083970 (2010.07.23) 문서열기
공고번호/일자 (20110331) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.01.15)
심사청구항수 9

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 구만복 대한민국 서울시 동대문구
2 정춘복 대한민국 경기도 안산시 상록구
3 쟈벳 인도 고려대학교

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이문섭 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****, ***호 제니스국제특허법률사무소 (봉천동, 청동빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 고려대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.01.15 수리 (Accepted) 1-1-2009-0026682-29
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2009.06.09 수리 (Accepted) 4-1-2009-5111177-32
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2010.08.12 수리 (Accepted) 4-1-2010-5149278-93
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2011.02.16 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2011.03.14 수리 (Accepted) 9-1-2011-0019234-36
6 등록결정서
Decision to grant
2011.03.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0144052-15
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.02.11 수리 (Accepted) 4-1-2014-5018243-16
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.04.22 수리 (Accepted) 4-1-2014-5049934-62
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.10.10 수리 (Accepted) 4-1-2019-5210941-09
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번호 청구항
1 1
디클로페낙(diclofenac)에 특이적으로 결합 가능한 DNA 앱타머
2 2
제 1항에 있어서, 상기 DNA 앱타머는 서열번호 1 내지 서열번호 45 중 어느 하나의 염기서열을 갖는 것을 특징으로 하는 디클로페낙에 특이적으로 결합 가능한 DNA 앱타머
3 3
하기 단계들을 포함하는 디클로페낙(diclofenac)에 특이적으로 결합 가능한 DNA 앱타머의 제조방법: a) 디클로페낙과 자성비드(magnetic beads)를 붕산염 버퍼용액에서 반응시켜 공유결합을 유도하는 단계; b) 양 끝에 PCR용 프라이머 영역을 포함하고 중앙에 30-50개의 임의의 염기를 가지는 DNA pool과 상기 공유결합으로 얻은 디클로페낙-자성비드를 버퍼용액에서 혼합하여 상온에서 결합을 유도하는 단계; c) 상기 디클로페낙-자성비드에 결합된 DNA를 자석을 이용하여 분리하는 단계; d) 상기 분리된 디클로페낙-자성비드로부터 DNA를 분리시키는 단계; 및 e) 상기 PCR용 프라이머 영역에 상보적인 프라이머 쌍을 이용하여 PCR을 수행하여 디클로페낙에 특이적으로 결합하는 DNA를 증폭시키는 단계
4 4
제 3항에 있어서, 상기 a)단계의 공유결합은 디클로페낙의 카복실기(carboxyl group)와 자성비드의 아민기(amine group)의 공유결합인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제 3항에 있어서, 상기 a)단계 후, 공유결합된 디클로페낙-자성비드에서 디클로페낙과 결합하지 않은 자성비드의 아민기를 에탄올아민(ethanol amine) 용액으로 20-30℃에서 10-50분간 반응시켜 불활성화 시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제 3항에 있어서, 상기 d)단계에서 DNA의 분리는 70-90℃에 3-10분간 두어 DNA를 디클로페낙-자성비드로부터 분리하는 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제 3항에 있어서, e)단계에서 프라이머 쌍 중 하나에 플루오레세인(fluorescein)이 붙여진 프라이머를 사용하여 PCR을 수행한 후, 전기영동을 통해 상기 플루오레세인에 의해 변성된 단일가닥 DNA를 분리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
8 8
디클로페낙에 특이적으로 결합 가능한 DNA 앱타머를 포함하는 디클로페낙 검출용 조성물
9 9
제 8항에 있어서, 상기 DNA 앱타머는 제 1항의 앱타머인 것을 특징으로 하는 조성물
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 서울시 고려대학교 생명공학연구소 안전한 식수확보를 위한 신속 정확한 휴대형 유해물질 검출시스템 개발